噬菌体展示肽库筛选赭曲霉毒素A模拟表位的研究
刘仁荣 余宙 何庆华 王希 许杨
南昌大学食品科学教育部重点实验室,南昌330047
摘 要:
目的从噬茵体随机肽库中筛选模拟赭曲霉毒素A表位的噬茵体粒子,并以其替代毒素建立免疫学检测方法。方法以抗赭曲霉毒素A的单克隆抗体为配基,免疫亲和筛选以融合蛋白形式表达在丝状噬茵体M13外壳蛋白Ⅲ上的随机七肽库,以ELISA方法鉴定阳性克隆,同时进行DNA测序确定插入七肽的氨基酸序列。结果经过4轮淘选,共筛选到11株能与该抗体特异性结合的阳性克隆,且该结合能被赭曲霉毒素A阻断,模拟表位的共有序列为IRPMVXX,X为任意氨基酸。以其中的P2号克隆建立了竞争ELISA检测方法,线性范围为200~8000pg/ml,检测下限为150pg/ml。结论噬茵体展示技术可成功筛选到赭曲霉毒素A模拟表位,筛选到的噬茵体粒子可作为毒素的替代品建立免疫学分析方法。 (共3页)参考文献


















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