小鼠白细胞介素2基因克隆及其逆转录病毒载体的构建
殷俊 杨玲 李厚达
扬州大学比较医学中心,江苏扬州225009
摘 要:
从小鼠脾脏淋巴细胞中抽提总RNA，应用RT-PCR技术扩增出mIL-2基因，按常规方法构建T载体，然后克隆、酶切鉴定、测序分析；通过双酶切将该基因片段接入逆转录病毒载体pGEZ-Term中，脂质体法共转染包装细胞293T；用含病毒颗粒的293T细胞上清液感染L929细胞，加入Zeocin进行筛选，挑选出能稳定表达抗性的L929细胞株，并通过RT-PCR技术检测到转基因L929细胞株中mIL-2基因的转录，表明成功构建了含mIL-2基因的重组逆转录病毒载体并筛选出整合有mIL-2基因的细胞株。 (共4页)
学科分类:
Q786[生物科学 > 分子生物学 > 基因工程(遗传工程） > 基因的表达]
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