p27^Kip1在RA诱导人神经前体细胞分化中的作用

许秋岩[1] 赵咏梅[1] 王一松[2] 李卫红[3] 刘扬[1] 徐群渊[2] 张海燕[3]

[1]首都医科大学宣武医院教育部神经变性病学重点实验室,北京100053 [2]首都医科大学细胞生物学系,北京100069 [3]首都医科大学北京市神经科学研究所,北京100069

摘  要:

目的观察全反式视黄酸(RA)对体外培养的人神经前体细胞的诱导作用,研究在这个过程中细胞周期调节蛋白p27^Kip1、p21Cip1及相关分子cdk2、cyclinE的变化,探讨p27脚。在RA诱导的人神经前体细胞分化过程中的作用。方法取12wk的人胚胎前脑纹状体,原代培养人神经前体细胞。在细胞进入对数生长期时给予1μmol·L^-1RA诱导。在诱导的d1、3、7,用相差显微镜观察细胞形态的变化;用免疫细胞化学染色、RT—PCR等方法检测p27^Kip1、p21Cip1及其相关的cdk2、cyclinE的变化。结果在RA诱导d3,人神经前体细胞形态发生变化,至d7时已接近成熟神经元形态。免疫细胞化学染色结果显示p27^Kip1的表达在RA诱导d3增加,在RA诱导d7时明显增加,与未经RA诱导的细胞相比差异有统计学意义(P〈0.05)。RT—PCR结果显示,p27^Kip1mRNA的表达在RA诱导d3增加,并在RA诱导d5达到高峰。而p27^Kip1mRNA的表达在RA诱导后略呈下降趋势。cdk2、cyclinE的mRNA水平在RA诱导前后没有明显变化。结论p27^Kip1在RA诱导的人神经前体细胞分化过程中具有重要作用,并且其表达增加是通过转录水平调节的。 (共4页)

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