农学 >> 干旱地区农业研究 >> 2007年25卷4期 >> 摘要

转甜菜碱醛脱氢酶基因油菜的获得及其耐盐性研究

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韩德俊[1] 陈耀锋[1] 李春莲[1] 郭东伟[1] 李振岐[2]

[1]西北农林科技大学农学院,陕西杨凌712100 [2]西北农林科技大学植保学院,陕西杨凌712100

《干旱地区农业研究》

2007年第25卷第4期

摘　　要:

以9个甘蓝型油菜（Brassica nupas L.）材料为受体,分别以其子叶和下胚轴为外植体,利用农杆菌将来自山菠菜的BADH基因导入甘蓝型油菜,研究了转化植株的抗盐性。结果表明,依据对农杆菌侵染的反应,参试品种可划分为三种类型：抗性类型（resistant type,R）;超敏感类型（supper susceptive type,SS）和中间类型（middletype,M）。R型外植体切口易发生过敏反应导致失去再生能力;SS型外植体极易受农杆菌快速增殖影响,最终导致整体褐化死亡;只有M型外植体还保留部分再生能力,可产生少量不定芽。通过改进培养方式可提高外植体在农杆菌胁迫下的芽发生频率,在无菌滤纸上进行共培养,不仅能降低“玻璃化”现象,还能延长共培养时间,为外植体细胞的再分化提供了时间保障。分化培养基中加入3-6 mg/L AgNO3可减轻外植体褐化程度,提高不定芽分化率。PCR分析和BADH活性检测发现,有部分转化体BADH酶活性明显高于对照,表明转基因植株在盐胁迫下外源BADH基因已表达,转基因植株能够在0.5%NaCl培养基上正常生长,而对照在相同的培养基上生长缓慢且生根困难。 (共6页)