Tet调控STGC3基因表达CNE2细胞系的建立及其功能初步研究

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摘　　要:

利用Tet-on调控系统，建立受强力霉素诱导STGC3基因表达的CNE2细胞系，为进一步研究STGC3的功能提供了一个理想的实验平台．先后将调控质粒pTet-on和反应质粒pTRE-STGC3转染入CNE2细胞，并用G418和潮霉素分别进行两轮筛选，运用RT-PCR选择对强力霉素诱导敏感的细胞克隆．用不同浓度强力霉素诱导CNE2／Tet／pTRE-STGC3细胞，RT-PCR检测STGC3的表达，确定强力霉素的最佳诱导浓度．采用此浓度的强力霉素分别诱导CNE2、CNE2/Tet／pTRE、CNE2/Tet／pTRE-STGC3三组细胞，测定细胞的生长曲线、克隆形成率和细胞周期分布．诱导STGC3基因高表达，CNE2细胞增殖速度显著减慢（P〈0．05），克隆形成能力显著降低（P〈0．01）；流式细胞仪检测结果显示，瘤细胞群体中处于G0／G1期细胞数增加，细胞阻滞于G0／G1期．Tet调控STGC3基因表达CNE2细胞系的成功建立，为进一步研究STGC3基因的功能提供一个理想的细胞模型．