摘 要:
棉花是一种重要的经济作物，其生产和产量要受到干旱、低温和高盐等环境胁迫的影响，因此提高棉花对这些胁迫的抗性非常重要．脱水应答元件（DRE-dehydration responsive element）结合蛋白（DBP）在调节植物对环境胁迫的抗性中起到非常重要的作用．而且过量表达DBP类基因的转基因植株能够很好抵抗这些环境胁迫，所以研究棉花中此类DRE元件结合蛋白对棉花生产有非常重要的意义．在以前的工作中，从棉花中分离一个DBP基因，命名为GhDBP1并在转录水平上分析它在棉花植株中的表达特征．在研究中，报道了GhDBP1的原核表达、纯化和它的DNA结合特性．GhDBP1基因的编码区用PCR技术扩增出来插入到原核表达载体pET28a中，并转化到大肠杆菌菌株BL21（DE3）中．经过IPTG诱导，GhDBP1融合蛋白在BL21（DE3）菌株中成功进行表达．利用Ni-NTA亲和层析技术得到了纯化的融合蛋白．在非同位素的凝胶滞留实验中，纯化的GhDBP1融合蛋白能够结合到含有DRE元件的DNA片段上．另外，用SWISS-MODEL软件对GhDBP1蛋白的DNA结合区的三维结构进行了计算机模拟．模拟的结果显示，GhDBP1蛋白的DNA结合区的主链结构和折叠模式与已知的拟南芥GCC盒结合蛋白AtERF1的DNA结合区结构很相似．这些结果显示了GhDBP1是一个脱水应答元件（DRE）结合的转录因子，并可能运用与AtERF1的DNA结合区相似的结构和它的目标序列脱水应答元件（DRE）相结合． (共7页)
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