临床医学 >> 生物化学与生物物理进展 >> 2006年33卷3期 >> 摘要

应用蛋白质组学技术筛选胃癌耐药相关蛋白质

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易红[1] 杨轶轩[1,3] 陈主初[1,2] 张桂英[1,3] 张鹏飞[1] 李建玲[1] 朱果[1,2] 肖志强[1]

[1]中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室,长沙410078 [2]中南大学湘雅医学院肿瘤研究所,长沙410008 [3]中南大学湘雅医院消化科,长沙410008

《生物化学与生物物理进展》

2006年第33卷第3期

摘　　要:

胃癌多药耐药性是临床胃癌化疗失败最主要的原因之一，但其分子机制仍然不太清楚．为了寻找新的胃癌耐药相关的蛋白质，揭示胃癌多药耐药的分子机制，以胃癌细胞SGC7901和长春新碱诱导的耐药胃癌细胞SGC7901/VCR为研究对象，应用二维凝胶电泳（two-dimensional electrophoresis，2-DE）技术分离两种细胞的总蛋白质，图像分析识别差异表达的蛋白质点，基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（matrix-assisted laser desorption／ionization time of flight mass speetromelry，MALDI-TOF-MS）及电喷雾电离串联质谱（electrospray ionization tandem mass spectromelry，ESI-Q-TOF）对差异表达的蛋白质点进行鉴定，蛋白质印迹和实时RT-PCR验证部分差异蛋白质在两株细胞中的表达水平，反义核酸转染技术分析HSP27（heatshock protein27，HSP27）高表达与SGC7901/VCR耐药的相关性．得到了分辨率较高、重复性较好的两株细胞系的二维凝胶电泳图谱，质谱分析共鉴定了24个差异蛋白质点，蛋白质印迹和实时RT-PCR验证了部分差异蛋白的表达水平，反义寡核苷酸抑制HSP27表达能增加SGC7901NCR对长春新碱的敏感性．研究结果不仅提示这些差异蛋白质如HSP27，Sorcin等可能与胃癌的多药耐药相关，而且为揭示胃癌细胞的多药耐药性产生机制提供了线索． (共10页)