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低叶绿素b水稻突变体类囊体膜的比较蛋白质组学

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陈熙[1] 崔香菊[1] YING-XIN ZHAO[2] 张炜[1]

[1]南京农业大学生命科学学院生物化学与分子生物学系,南京农业大学．GEHealthcareBiosciences蛋白质组学合作示范实验室,南京210095 [2]Department of Chemistry, University of Tennessee, Knoxville, TN37996, USA

《生物化学与生物物理进展》

2006年第33卷第7期

摘　　要:

采用蓝绿温和胶凝胶电泳（blue-nadve polyacrylamide gel-electrophoresis，BN-PAGE），以及改进的第二向SDS-PAGE分离了水稻低叶绿素b突变体ZH249-Y和野生型ZH249-W类囊体膜蛋白复合物，系统比较了突变体和野生型各复合物亚基的表达差异．结果显示，第一向BN-PAGE分离了PSI-LHCI、LHCI缺失的PSI、ATP合成酶、细胞色素b6f、CP43缺失的PSⅡ及LHCⅡ六种复合物．上述各复合物经第二相SDS-Urea-PAGE分离后，利用胶内酶解，高效液相层析分离肽段，电喷雾串联质谱鉴定了复合物的亚基．结合免疫印迹研究，证明和野生型相比，突变体光系统Ⅱ捕光天线复合体的表达量适度下降，但光系统Ⅰ捕光天线破坏严重，同时光系统Ⅱ核心蛋白和ATP合成酶的表达量上升．研究结果对揭示低叶绿素b水稻突变体较高光化学效率和光稳定性的分子基础提供了线索，同时也表明，改进的BN／SDS-PAGE双向电泳不仅可以有效地分离膜蛋白复合物及亚基，也可以进行不同生理条件下，或野生型和突变体之间膜蛋白质组的比较研究．