猪O型口蹄疫病毒P1/3C基因共表达重组腺病毒的构建与鉴定

黄毓茂[1] 王声会[1] 焦茂兴[2]

[1]华南农业大学兽医学院,广东广州510640 [2]宜春学院农学院,江西宜春336000

摘  要:

通过PCR和RT—PCR扩增出目的基因,将FMDVP1和3C基因通过IRES串联,构建出重组腺病毒穿梭质粒,在BJ5173细菌中同源重组获得同源重组腺病毒质粒,转化XL1-Gold超级感受态细胞以扩大培养,PacⅠ酶切后转染AD-293细胞,纯化获得了重组腺病毒。该重组腺病毒于AD-293细胞连续传代培养,初步浓缩后TCID50为10^10.71/mL。应用O型口蹄疫病毒阳性血清进行间接荧光抗体试验,病毒感染的AD-293细胞可见清晰荧光,证明该重组腺病毒对目的基因进行了成功的表达,为FMDVP1/3C基因共表达腺病毒活载体疫苗的研究奠定了基础。 (共5页)

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