转基因山羊羊乳中重组人乳铁蛋白性质的检定与研究

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摘　　要:

目的：检定与研究转基因山羊CLF123—1羊乳中重组人乳铁蛋白（rhLF）及其分子特性。方法：利用SDS—PAGE，West—ern—blotting及Edman降解法测定分析转基因山羊羊乳中rhLF的相对分子质量、免疫学特性和N-末端15个氨基酸残基；利用紫外分光光度法比较rhLF、天然人乳铁蛋白（hLF）与Fe^3＋离子结合的动力学过程，测定Fe^3＋与LF发生结合反应达到平衡状态后在279nm和465nm的吸收度值，Fe^3＋与LF的物质的量比值分别为：0：1，0．5：1，1：1，2：1，4：1。结果：rhLF的相对分子质量为（8．06±0．15）万（2次实验，6条电泳谱带计算结果）；Western—blotting结果显示rhLF可特异地与兔抗人LF抗体发生特异性结合；rhLF的N-末端1—15个氨基酸残基的序列为G R R R R S V Q W X T V S Q P；rhLF和hLF与Fe^3＋结合特性与趋势几乎完全一致。结论：本文所研究的转基因山羊羊乳中的乳铁蛋白是与人乳铁蛋白分子特性一致的rhLF。 (共4页)