以共价连接法使抗原固相化制备酶联免疫吸附测定试剂的研究

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摘　　要:

目的 通过共价法使抗原固相化减小抗原-抗体反应空间位阻，提高酶联免疫吸附测定（ELISA）灵敏度。方法 用含1％鱼明胶和0．2％的多聚赖氨酸的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（pH9．5）溶液封闭反应板，以溴化氢溶液在pH11．0环境下活化海藻糖，然后使海藻糖的活化基团连接在固相蛋白的-NH2上，以同样原理将重组人丙型肝炎病毒抗原接到海藻糖上，最后加入甘氨酸封闭未反应的海藻糖的活化基团。结果 共价连接法建立的检测系统比吸附法建立的检测系统灵敏度提高约1～2个滴度。结论 共价连接法可降低酶联免疫检测过程中抗原-抗体结合空间位阻并提高检测灵敏度。