生物学 >> 林业科学研究 >> 2007年20卷1期 >> 摘要

中间锦鸡儿fad2基因片段克隆、反义表达载体构建及遗传转化初步研究

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汪阳东[1,2] 李春秀[1] 齐力旺[1] 张守攻[1]

[1]中国林业科学研究院林业研究所,国家林业局林木培育重点实验室,北京100091 [2]中国林业科学研究院亚热带林业研究所,浙江富阳311400

《林业科学研究》

2007年第20卷第1期

摘　　要:

以我国重要的生物能源灌木——中间锦鸡儿枝叶和种子为材料，根据GenBank中已经发表fad2基因的同源序列，利用PCR技术克隆得到基因片段。在GenBank中Blast（GenBank登录号AY957393）所得基因片段和同属豆科的Glycine max Gmfad2-2a同源性高达88％，位于fad2基因编码区中部。将所得片段经BamHI和SacI酶切后插入表达载体质粒pBI121，构建了反义表达载体pBI121fad2，并利用农杆菌介导法转入烟草叶片，获得了抗卡那霉素和氨苄青霉素的再生烟草植株。初步分析结果表明：与对照烟草相比，转基因烟草种子脂肪酸含量没有明显差异，而亚油酸则减少10．3％。