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SYBR Green Ⅰ荧光RT—PCR法检测H5亚型禽流感病毒

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刘丽玲[1,2] 王秀荣[1] 陈化兰[1] 孙凯[2] 魏萍[2]

[1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室／兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001 [2]东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030

《黑龙江畜牧兽医》

2006年第11期

摘　　要:

用2株不同致病力的H5亚型禽流感病毒（AIV）感染Madin—Darby canine kidney（MDCK）细胞，收集感染后6，12，24，48，72h的病毒，提取总RNA，利用Rotor Gene RG3000实时定量PCR仪对H5亚型AIV的HA基因进行检测，试图建立快速检测H5亚型AIV的real—time RT—PCR方法．并用所建立的方法对来自全国各地的疑似H5亚型AIV的病料和咽喉拭子、泄殖腔拭子346份进行检测结果表明：农业部动物流感重点开放实验室建立的HA基因的real—time RT—PCR方法可以检测到细胞培养物中和临床样品中是否含有H5亚型AIV，与常规RT—PCR比较，该方法更加特异、准确、快速。 (共3页)