畜牧兽医 >> 中国草食动物 >> 2007年27卷2期 >> 摘要

贵德黑裘皮羊耳成纤维细胞系的建立和生物学特性的研究

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陆会宁[1] 刘丑生[2] 王志刚[2] 张利平[1] 赵俊金[2] 孟飞[2]

[1]甘肃农业大学动物科技学院,兰州730070 [2]全国畜牧兽医总站畜禽牧草种质资源保存利用中心,北京100094

《中国草食动物》

2007年第27卷第2期

摘　　要:

以贵德黑裘皮羊耳缘组织为材料，采用组织块贴壁培养法和细胞冷冻技术成功构建了成纤维细胞系，并对培养细胞进行了形态学、生长动力学观察、细胞活力测定、核型分析和微生物检测。结果表明：细胞群体倍增时间（PDT）约为36h，冻存前细胞活力为96．2％，以DMEM／F-12＋20％FBS中添加10％DMSO冻存成纤维细胞，解冻后细胞活力为93．6％，24h后的贴壁率为85％。在传代10次之前，细胞染色体中二倍体（2n=54）占主体，约为82％～90％，细菌、真菌、病毒、支原体检测为阴性。该细胞系的建立，使贵德黑裘皮羊这一国家重要种质资源在细胞水平上保存下来，也为体细胞克隆等研究提供了理想的生物材料。