野油菜黄单胞菌8004菌株hrp基因簇侧翼序列大片段缺失突变体的构建及表型分析

何勇强[1,2] 姚子颖[2] 姜伯乐[1] 唐纪良[1,2]

[1]广西亚热带生物资源保护利用重点实验室 [2]广西大学生命科学与技术学院,广西南宁530005

摘  要:

野油菜黄单胞菌野油菜致病变种(Xanthomonas campestrispv.campestris,简称Xcc),是一类能在全球范围引起十字花科植物黑腐病的γ变形菌纲细菌。该菌有一个长41.7kb的Hrp致病岛,包含41个开放阅读框(0RF)。Hrp致病岛5’端边界为ISl479插入元件,3’端边界为ISl595插入元件。G+C含量为62.3%,明显低于全基因组64.9%的G+C含量。根据基因类型,将该致病岛分为三个区段:位于致病岛中心区的hrp基因簇、及其左侧翼的假定基因区段(HGR)和右侧翼的降解酶类基因区段(EGR)。HGR长7.4kb,注释蛋白编码基因6个,全部为功能未知的假定基因。EGR长9.3kh,注释蛋白编码基因8个,其中6个为降解酶类基因。为了鉴定hrp基因簇侧翼序列的功能,采用标记置换的突变方法,将Xcc 8004的hrp基因簇右侧翼EGR片段缺失。该突变体8004△R对寄主植物的致病力比野生型菌株显著降低,而在非寄主植物辣椒ECW-10R上仍能引起过敏反应。该突变体其它的致病相关生化因子,如胞外多糖产量和胞外酶的活力均未受明显影响。实验结果表明EGR区段的缺失不影响三型分泌系统的正常功能,也不影响该菌在基本培养基上的生长,但使Xcc的致病力明显降低,提示Xcc8004菌株hrp基因簇右侧翼序列中存在与致病相关的基因。 (共8页)

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