大肠杆菌yqhD基因的克隆与表达

摘　　要:

以大肠杆菌Escherichia coli K-12基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增得到假定的氧化还原酶（putative oxidoreductase）基因yqhD,将它连接到克隆质粒pGEM-3zf（＋）上,得到重组质粒pGEM-yqhD,对此重组质粒进行序列测定,对其DNA序列分析表明,yqhD基因全长为1 164 bp.再将yqhD基因插入表达载体pSE380,构建成重组子pSE380-yqhD,并在E.coli BL21中获得表达.研究表明,以1,3-丙二醇为底物时,基因工程菌在30°C下,以1.0 mmol/L IPTG诱导12 h的酶活力达到3.13 U/mL,比对照菌株提高4.4倍. (共5页)