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pfl-act基因在大肠杆菌中的高效表达及其纯化

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杨登峰[1] 韦宇拓[2,3] 黄志明[1] 周兴[1] 黄日波[2,3]

[1]广西科学院,广西南宁530003 [2]广西大学生命科学与技术学院,广西南宁530005 [3]广西亚热带生物资源保护利用重点实验室,广西南宁530005

《广西农业生物科学》

2006年第25卷第4期

摘　　要:

丙酮酸甲酸裂解酶是肠道细菌在厌氧代谢中十分关键的酶，丙酮酸甲酸裂解酶激活因子（pyruvate formate lyase activator．PFL-A）在功能上具有重要的作用。为进一步研究PFL—A的激活机理，以大肠杆菌K-12的基因组为模板．通过GenBank上公布的序列设计引物，扩增出目的基因，克隆到pMD18-T载体．经测序，所扩增出的基因与pfl-act基因具有99％的同源性。将pfl-act连接到高效表达载体pET-22b（＋）中，经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导，结果发现，pfz—act以包涵体形式表达。改变诱导剂、诱导剂量或培养温度，对包涵体的形成均没有明显的影响。 (共5页)