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根癌农杆菌介导的马铃薯转化系统的优化

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熊伟[1] 马耀华[1] 胡碧波[1] 陈保善[1,2]

[1]广西大学生命科学与技术学院,广西南宁530005 [2]广西大学微生物及植物遗传工程教育部重点实验室,广西南宁530005

《广西农业生物科学》

2007年第26卷第1期

摘　　要:

以马铃薯品种PB04的叶片和茎段为外植体，对其再生和农杆菌介导的遗传转化体系进行了研究。分别比较不同转化条件（菌液浓度、感染时间、预培养及共培养时间）对马铃薯遗传转化效率的影响，以及选择压浓度和加入时间对抗性愈伤出芽的影响，结果表明：（1）在玉米素（ZT）2mg／L，萘乙酸（NAA）0．01mg／L条件下能有效地提高马铃薯愈伤组织分化率；（2）外植体经过2d的预培养，在OD600=0．8的农杆菌菌液中侵染10min后，抗性愈伤诱导率最高。（3）头孢霉素（Cef）比羧苄青霉素（Car）更适合用于马铃薯外植体的遗传转化。（4）农杆菌侵染后恢复培养5～7d再加入卡那霉素（Km）50mg／L能有效地提高外植体的转化率。 (共7页)