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新型皱纹盘鲍防御素hd-def的cDNA序列分析基因组克隆及表达研究

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洪旭光[1,2] 孙修勤[2] 郑明刚[2] 昝金东[2] 曲凌云[2] 张进兴[2]

[1]中国海洋大学生命科学与技术学院,青岛266003 [2]国家海洋局第一海洋研究所,青岛266061

《高技术通讯》

2008年第18卷第3期

摘　　要:

从构建的皱纹盘鲍肝肾cDNA文库中筛选到了鲍防御素基因EST。通过序列分析发现该基因的全长cDNA序列编码66个氨基酸残基，其前体由信号肽、前导肽和成熟肽组成。该前体的成熟肽含42个氨基酸（6个Cys），推测分子量为4323Da，等电点为8．02。氨基酸序列同源性分析表明，该多肽与昆虫防御素的相似性较高，最高可达70％。因成熟肽二级结构具有典型的昆虫防御素结构特征，该多肽应属于抗菌肽中的昆虫防御素亚家族，是一种新型抗菌肽，将其命名为鲍防御素hd—def。采用基因组步移法获得了全长4032bp的基因组序列。分析表明，该基因由3个内含子和4个外显子编码组成；3个内含子大小分别为497bp、2357bp和528bp，其中两个内含子存在于编码信号肽的序列中。用鳗弧菌和金黄色葡萄球菌刺激皱纹盘鲍，能诱导hd—def的表达。实验检测了5种组织，发现hd—def基因仅在肝胰腺中表达，具有明显的组织表达特异性；其表达属于诱导型表达，提示该基因可能参与皱纹盘鲍的抗细菌感染。 (共7页)