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几种酶分离山羊小肠上皮细胞方法的比较

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王海霞 匡伟 赵国琦

扬州大学动物科学与技术学院,江苏扬州225009

家畜生态学报
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国际标准刊号:ISSN 1673-1182
国内统一刊号:CN 61-1433/S

摘  要:

用不同酶消化分离山羊小肠上皮细胞,从而找到最佳的分离方法,为进一步研究IEC提供合适的细胞模型。本研究分别用胶原酶工、嗜热菌蛋白酶、胶原酶Ⅺ/中性蛋白酶I消化分离刚出生未进奶的山羊小肠上皮细胞,通过观察IEC生长状态、形态特征、抗原鉴定比较哪种分离效果最佳。结果表明,联合用胶原酶Ⅺ/中性蛋白酶I1h可分离出大量健全绒毛隐窝单位,进一步培养获得的小肠粘膜上皮(IEC),上皮细胞膜抗原均呈阳性,用胶原酶工和嗜热菌蛋白酶分离得到的大部分是成纤维细胞。选用用胶原酶Ⅺ/中性蛋白酶工作为分离IEC的消化酶,可获得较纯的IEC。[著者文摘]

Acta Ecologae Animalis Domastici

栏目信息:

科学研究

分 类 号:

S811.5

文献标识码:

A

文章编号:

1004-5228(2007)06-0009-04

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参考文献(7篇)  主题相关

[参考文献]

Comparison of Methods to Generate Vialde Goat Intestinal Epithelial Call by Enzymes

WANG Hai-xia ,KUANG Wei, ZHAO Guo-qi(College of Animal Science and Technology, Yangzhou University ,Yangzhou 225009, China)

Abstract:

To find the optimal method to isolate and culture the goat intestine epithelial cells,collagenase I . thermolysin.collagenaseXI/dispase I digestion technique were used to isolate IEC from the fetal goat. Optimal culture conditions were determined by both cellular morphology under light microscope and 4 immunocytochemical characterization. The results showed that large amount of villi crypt units were attainable and the attached cells were positive for cytokeratin using collagenaseXI/dispase I digestion technique while many fibroblast cells contaminated when using collagenase I and thermolysin digestion techniques. This study showed that viable epithelial cells can be relatively easily generated from fetal goat small intestine by collagenaseXI/dispase I digestion technique.[著者文摘]

Key words:

goat intestine epithelial cells; collagenase I; collagenaseⅪ/dispase I ; thermolysin

收稿日期: 2007-01-09

基金资助:

国家自然基金(编号:30471259).

作者简介:

王海霞(1982-),女,江苏如皋人,在读硕士生,主要研究方向:反刍动物分子营养。 通讯作者 赵国琦。Email:jszhaoguoqi@sohu.com

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