牙胚中上游刺激因子部分序列的cDNA克隆

摘　　要:

目的：克隆牙胚中上游刺激因子（upstream stimulatory factor,USF)基因编码区特异片段。方法：从生后5d balb/c鼠牙胚中抽提总RNA，用随机引物逆转录合成cDNA，然后 用PCR方法借助特异性引物以cDNA中扩增小鼠USF1基因片段（289bp），电泳检测、回收目的片段，将所得的基因片段连接至Teasy质粒载体，并转化到大肠杆菌DH5α后挑选阳性克隆，扩大培养，提取重组质粒DNA，酶切分析和核苷酸序列分析鉴定阳性克隆。结果：酶切图谱显示质粒重组，克隆成功，序列分析结果与国外报道一致。结论：在牙胚中克隆到USF1基因片段。