摘 要:
目的：观察高糖对体外培养的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）功能以及与成骨细胞转分化相关蛋白表达的变化,探讨糖尿病血管病变的可能细胞/分子发病机制。方法：用组织贴块法建立SD大鼠胸主动脉VSMCs的体外培养技术;高糖（葡萄糖浓度：50 mmol/L）作用该细胞,设相同浓度甘露醇为对照组,观察在不同的培养时间下（3、12h和第3、6、9、12d）,采用免疫蛋白印迹法和间接免疫荧光法分别检测α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）,骨桥蛋白（osteopontin,OPN）和成骨细胞特异性核转录因子（core-binging factorα-1,Cbfα-1/RUNX 2）的表达。细胞钙沉积含量测定观察培养细胞钙盐的沉积。结果：组织贴块法培养的大鼠原代胸主动脉VSMCs呈梭型,α-SMA表达强阳性;高糖作用12h,VSMCs的Cbfα-1表达明显上升;高糖作用9d后,VSMCs的α-SMA表达量较高糖作用前降低近90%;免疫荧光染色显示VSMC细胞呈低强度的α-SMA染色阳性;同时,高糖作用下的VSMCs能够检测到OPN蛋白的表达,与对照组相比差异显著;高糖作用下细胞钙沉积含量明显增加。结论：持续的高糖作用能够使动脉VSMCs发生向类似成骨样细胞的转分化,提示高糖诱导的VSMCs转分化可能参与糖尿病血管病变的发生发展。
