嵌套多重PCR——研究田间植物部分丛枝菌根真菌和微生物区系的一个可行技术

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摘　　要:

对感染植物根部的丛枝菌根真菌进行准确鉴定是菌根研究的基础，而仅仅通过形态学特征不可能将根内菌根真菌鉴定到种．为了快速、准确而又经济地鉴定植物根内与根际的菌根真菌区系，本研究设计和应用了嵌套多重聚合酶链式反应（PCR）技术．本研究中，首先对所用PCR引物进行了种特异性验证和相容性分析．对4种孢子HAUO3，Glomus intraradices，Scutellospora castaneae和Glomus sp．HAUO4的研究结果表明，嵌套PCR具高度敏感性．在嵌套多重PCR的可行性研究中，应用混合孢子样品，于温室条件下培养得到的4种菌根真菌共感染的紫云英根段，以及于田间采集得到的15种植物的根段．结果证明，嵌套多重PCR反应同样具有高度敏感性，准确率达到95％．同时检测到4种菌根真菌对植物的感染，证明了此实验技术具高度敏感性、高效性，是菌根研究的一种新的简易、经济而又切实可行的方法．