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煤尘致人胚肺成纤维细胞纤维化中胸腺分化抗原-1DNA甲基化的变化

《环境与职业医学》2016年 第8期 | 魏丛慧 王瑶 王凯 王和静 张庆锋 刘志宏   宁夏医科大学公共卫生与管理学院 宁夏银川750004 辽宁省疾病预防控制中心业务与应急管理办公室 辽宁沈阳110000
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摘 要:[目的]观察煤尘通过单核细胞源性巨噬细胞致人胚肺成纤维细胞MRC-5纤维化改变过程中,胸腺分化抗原-1(Thy-1)表达及其DNA甲基化变化。[方法]用含500nmol/L佛波酯的1640培养液培养人单核细胞,24h诱导分化后成巨噬细胞;收集100gg/mL煤尘刺激巨噬细胞24h的培养上清,再刺激MRC-524、48、72h,对照组分别为正常巨噬细胞和正常人胚肺成纤维细胞。酶联免疫分析法测定巨噬细胞上清液中IL-6、TGF-β1蛋白表达水平和MRC-5中TGF-β1蛋白表达水平,实时荧光定量PCR法检测胶原蛋白-I、胶原蛋白-Ⅳ、α-SMA、Thy-1、DNA甲基化转移酶(DNMTs)1、3a、3bmRNA的表达,巢式降落式特异性PCR检测Thy-1DNA甲基化。[结果]煤尘组巨噬细胞上清中IL-6、TGF-β1蛋白表达水平与对照组比较明显增加[(5.542±0.953)ng/mLvs(2.498±0.456)ng/ML,(462.435±56.620)ng/Lvs(329.971±17.911)ng/L](JP〈0.05);巨噬细胞染尘后上清刺激MRC-5 24、48、72h,TGF-β1蛋白表达[(223.813±5.723),(263.757±17.254),(326.720±11.263)ng/L]和胶原蛋白ImRNA表达(3.38±0.37,3.87±0.28,4.40±0.10)、胶原蛋白ⅢmRNA表达(1.65±0.12,2.37±0.19,2.66±0.28)、α-SMAmRNA表达(2.41±0.47,4.76±0.10,4.23±0.63)均升高;且均存在时间效应关系,r值分别为0.965,0.876,0.899,0.667(P〈0.05);煤尘组MRC.5中Thy—1mRNA表达均低于对照组,随着巨噬上清液作用时间的增加,其表达逐渐降低(0.634±0.014,0.448±0.055,0.352±0.044),呈负相关(F=--0.945,P〈0.05);煤尘组MRC-5中DNMTsmRNA表达均较对照组升高(DNMT1:1.57±0.12,2.51±0.33,7.00±0.71;DNMT3a:0.74±0.09,2.89±0.52,3.31±0.53;DNMT3b:1.46±0.18,2.25±0.44,5.33±0.16),且均存在时间效应关系,r值分别为0.92
【分 类】【医药、卫生】 > 预防医学、卫生学 > 卫生基础科学 > 卫生毒理
【关键词】 煤尘 单核细胞源性巨噬细胞 人胚肺成纤维细胞 纤维化 胸腺分化抗原-1 DNA甲基化
【出 处】 《环境与职业医学》2016年 第8期 742-748页 共7页
【收 录】 中文科技期刊数据库