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农业 前沿问题
主题描述甜樱桃 草原樱桃 检测方法 茎尖培养 叶片 病毒病 检测技术 库尔勒香梨 iba 分子生物学 离体培养 再… 共有12篇文章
孔宝华 常胜军| >>被引6次
为了从植物组织中快速检测李坏死环斑病毒9PNRSV),根据该病毒RNA3序列设计引物,对感病和健康组织总RNA进行RT-PCR,结果从感病组织中扩增出了大约450bp的目的片段,而健康组织中无此扩增带。将此PCR产物连接到pGEM-T-easy载体也能转化大肠杆菌DH55α菌株,得到了含有目的片段的重组子。并采用双脱氧终止法进行序列配美国报道的李坏死环斑病毒RNA3序列对应部分核苷酸基本一致,这表
韩文璞 袁明莲| >>被引6次
李宝江 代汉平 等| >>被引7次
韩文璞 袁明莲| >>被引5次
甜樱桃组织培养时,在培养基中加入250mg/L的活性碳,可使试管苗增殖5.1倍,成苗率达86.7%,且生长健壮,叶色浓绿。加入1000mg/L的活性炭,生根率达100%,根系发达、洁白,移栽成活率高。
刘庆忠 李志强 等| >>被引6次
用甜樱桃矮化砧木吉塞拉(Gisela)5号、7号(Prunus cerasus×P.canescens)无菌生根苗的叶片作为外植体,进行不定芽再生植株的研究。以WPM+BA5-7mg/L+IBA0.1-1.0mg/L做培养基,不定芽再生率高达70%,吉塞拉5号的再生率明显高于7号;培养基中高浓度的细胞分裂素抑制吉塞拉7号的不定芽再生。不定芽的增殖、生根、温室锻炼、大田移栽均已获得成功,同时观察了植株在大田的生长状况。该成果可用于樱桃转基因育种和多倍体植株培育的研究。
代汉萍 李宝江 等| >>被引6次
吴霞 上官小霞 等| >>被引5次
樱桃采用试管苗组织培养快繁,在MS培养基内附加1.0mg/L6-BA,茎芽繁殖系数较高,附加0.5mg/L IBA和0.1mg/L NAA,生根效果最好。
代红艳 侯义龙 等| >>被引8次
研究了茎尖大小、接种方式、培养基成分、试材基因型对甜樱桃品种茎尖培养的影响。1年生成熟枝条上茎成苗率为8.3%-23.7%,嫩梢上的茎成苗率为27.3%-37.5%。利用RT-PCR技术对部分甜樱桃试管苗进行了早期病毒鉴定,筛选出一些不带李坏死环斑病毒(PNRSV)的甜樱桃试管苗,并证明甜樱桃试管苗微茎尖培养不能有效脱除PNRSV。
牛建新 刘连科 等| >>被引7次
用已知带梨脉病毒(Pear vein yellow virus ,PVYV)的库尔勒香梨植株和库尔勒香梨无病毒实生苗为供试材料,分别选用新鲜幼嫩叶片,4℃条件下保存2~4d的幼嫩叶片,冷冰的幼嫩叶片和层为试材,进行dsRNA的分离提取实验,得到了与PVYV基因组RNA长度9306bp相当大小的dsRPNA谱带,并以dsRNPA为模板,利用设计的特异引物,研究建立了梨脉黄病毒(PVYV)的RT-PCR检测技术体系,能有效地扩增出PVYV的一条长为316bp的特异片段,该技术可广泛应用于果树病毒的分子检测。
陈建军 刘崇怀 古勤生 潘兴 曹孜义| >>被引5次
在生长季节分3次对部分葡萄品种枝条上部、中部和下部叶片及韧皮部,进行双抗体夹心法(DAS—ELISA)、反转录聚合酶链式反应(RT—PCR)和免疫捕捉反转录聚合酶链式反应(IC—RT—PCR)3种方法检测卷叶病毒Ⅲ(GLRaV—3)的比较。结果表明:DAS—ELISA的检出率明显低于RT—PCR和IC—RT—PCR方法。RT—PCR可以检测出RNA提取液为1:10^-4的GLRaV—3病毒,但它受到了提取RNA难以及其它物质(如蛋白质、DNA等)干扰的影响,检测难度增加。从检测的灵敏度来看,RT—PCR和IC—RT—PCR比DAS—ELISA灵敏;并且,IC—RT—PCR比其它两种方法较快,整个过程仅需8h。
王关林 夏秀英 钟文田 方宏筠 姜明兰| >>被引7次
以优良樱桃砧木新品系98-1、Colt、大青叶为试材进行叶片离体再生及根癌农杆菌介导遗传转化,建立了高频率再生系统,并获得抗菌肪转基因植株。诱导叶片再生的最佳培养基为MS附加BAl.0-2.0mg/L,NAA0.3-0.5mg/L、GA0.5mg/L、AgNO3 5.0-10.0mg/L。农杆菌及受体感受态是影响转化的关键,延迟筛选可提高叶片中转化细胞对卡那霉素的抗性而利于再生。PCR及Southern Blot检测为阳性,表明抗菌肽基因已整合到樱桃砧木98-1基因组。
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