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连翘乙酸乙酯部位的化学成分与抗肿瘤活性研究认领

作者：

江园园

学位授予单位：

哈尔滨商业大学

摘要：

连翘(Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl)是双子叶植物纲、捩花目、木樨科、连翘属落叶灌木,是我国珍贵的中药材。连翘含有丰富的化学成分,主要为苯乙醇苷类、木脂素类、酚酸类、黄酮类和挥发油类成分等。连翘始载于《神农本草经》,主清热解毒,消肿散结等功效。连翘因其具有广泛的药理作用如抗炎、抗菌等从古至今一直被各个领域的医药工作者所使用,其在抗肿瘤方面的研究也具有较好的发展前景。传统中医药理论与现代高科技水平研究相结合,为连翘的应用提供更大的发展空间。本文采用75%乙醇水溶剂对连翘果实进行超声提取,有机试剂萃取,之后利用Hp20柱色谱、硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱、开放ODS柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱及制备型高效液相色谱等方法,对连翘乙酸乙酯部位的化学成分进行分离纯化,通过理化性质和波谱学手段,鉴定所得化合物的结构。采用网络药理学和分子对接相结合的方法,探讨连翘抗肿瘤作用的分子作用机制,通过MTT比色法对得到的单体化合物进行抗肿瘤活性研究;利用气相质谱结合保留指数(GC-MS)的方法,对六种不同产地连翘的挥发油成分进行分析。实验最终共得到9个单体化合物,分别为forsythiayanoside E(1)、(+)-epipinoresinol-4-O-β-D-glucopyranoside(2)、(+)-pinoresinol-4-O-β-D-glucopyranoside(3)、matairesinol-4'-O-β-D-glucopyranoside(4)、(+)-epipinoresinol-4'-O-β-D-glucopyranoside(5)、连翘脂苷I(6)、山奈酚-3-O-洋槐糖苷(7)、山奈酚-3-O-芸香糖苷(8)、连翘脂苷A(9)。其中化合物1为未见文献报道的新化合物。通过网络药理学和分子对接的结果确认了quercetin、kaempferol和luteolin等10个抗肿瘤活性成分,作用于AKT1,IL6和CCND1等16个关键靶点,参与Pathways in cancer等20条信号通路;分子对接结果显示氢键、Pi-cation键连接、疏水作用可能是其作用机制。抗肿瘤活性实验结果显示,9个单体化合物均对人乳腺癌细胞MCF-7和人恶性黑色素瘤细胞A-375均具有抑制作用。GC-MS结果显示,六种不同产地连翘的共有成分为α-pinene、β-myrcene、methyl benzoate、limonene等。除此外六种不同产地连翘既有其共有成分也有其特征成分。连翘挥发油多数为单萜、单萜醇类化学成分、烯醛类化学成分等。并首次对比了黑龙江产两种连翘与其他产地连翘中的挥发油成分的质量,发现黑龙江产地两种连翘中含有连翘中的共有的挥发油外,每种连翘中还具有其独特的成分。本文通过对连翘的化学成分、药理作用及气质联用技术的文献进行整理和收集,通过实验研究方法得到连翘单体化合物,并对其进行抗肿瘤活性测试,以期阐明连翘中抗肿瘤的药效物质基础具有一定的意义,希望为发现新的抗肿瘤新的先导化合物提供物质基础和理论依据,连翘挥发油成分的定性研究希望为以后连翘的质量评价研究提供参考和依据。

摘要译文

关键词：

连翘; 化学成分; 抗肿瘤; 网络药理学; 气质联用技术

学位年度：

2021

学位类型：

硕士

学科专业：

中药学

导师：

阎新佳

中图分类号：

R285[中药药理学]

学科分类号：

100505[临床中药学];100801[中药资源学];100806[中药药理学];100808[临床中药学]

D O I：

10.27787/d.cnki.ghrbs.2021.000680