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摘要： 目的研究人参果Solanum muricatum Ait.的化学成分及其抗氧化活性。方法人参果85%乙醇提取物采用硅胶、MCI、Sephadex LH⁃20、RP⁃C18、TLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。DPPH自由基清除活性筛选技术对其进行抗氧化活性评价。结果从中分离得到25个化合物,分别鉴定为咖啡酸(1)、5⁃羟基麦芽酚(2)、琥珀酸单甲酯(3)、烟酸(4)、胡萝卜苷(5)、α⁃菠甾醇⁃3⁃O⁃β⁃D⁃吡喃葡萄糖苷(6)、susaroyside A(7)、阿魏酸(8)、对香豆酸(9)、咖啡酸甲酯(10)、咖啡酸乙酯(11)、4,4⁃二甲基⁃庚二酸(12)、毛蕊异黄酮(13)、反⁃4,4′⁃二羟基⁃二苯基乙烯(14)、24⁃亚甲基环阿尔廷醇(15)、油酸(16)、油酸乙酯(17)、β⁃谷甾醇(18)、柠檬二烯醇(19)、二十五烷(20)、β⁃谷甾醇棕榈酸酯(21)、(E)⁃4⁃[5⁃(hydroxymethyl)furan⁃2⁃yl]but⁃3⁃en⁃2⁃one(22)、双⁃(5⁃甲酰基糠基)醚(23)、(E)⁃4⁃[5⁃(methoxymethyl)furan⁃2⁃yl]but⁃3⁃en⁃2⁃one(24)、1,5⁃bis(5⁃methoxymethyl)furan⁃2⁃yl⁃penta⁃1,4⁃dien⁃3⁃one(25)。人参果85%乙醇提取物抗氧化能力强于其水提物。人参果85%乙醇提取物各极性段抗氧化能力依次为30%甲醇部分、甲醇部分、60%甲醇部分、水部分。结论化合物1~7、9~25均为首次从该植物中分离得到。人参果不同提取溶剂及不同极性段提取物具有一定的抗氧化活性。
关键词: 人参果 ；化学成分 ；分离鉴定 ；抗氧化活性
被引量
2
摘要： 目的:考察人参不同极性部位抗氧化活性差异,筛选最佳活性部位。方法:本研究以石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取人参水提物。通过高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)、紫外分光光度计测定人参不同极性部位总酚酸、总皂苷、总多糖、总黄酮、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1含量;以DPPH自由基、ABTS^(+)自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基及细胞氧化损伤模型测定不同极性部位间体外抗氧化活性;结合熵权法与灰色关联度分析,建立人参不同极性部位的质量评价模型。对人参不同极性部位的12个质量特性指标赋权,最终优选出人参抗氧化最佳极性部位。结果:人参不同极性部位成分含量及抗氧化活性差异明显。其中,正丁醇部位的总酚酸、总黄酮、人参皂苷Rb1含量高于其他部位。正丁醇部位抗氧化活性最强,对DPPH自由基、ABTS^(+)自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基具有一定的清除能力,相应的IC50值分别为0.14、0.57、0.92、0.75 mg/mL。另外,结合质量评价模型得到人参不同极性部位的相对关联度值的范围为0.352~0.618,正丁醇部位测得相对关联度最高(0.618),进一步表明正丁醇部位抗氧化活性最强。结论:综合熵权法和灰色关联度分析的评价结果,初步优选出正丁醇部位为人参抗氧化最理想部位,为人参作为天然抗氧化剂的研究及人参抗氧化食品的开发应用提供理论基础。
关键词: 人参 ；不同极性部位 ；化学成分 ；抗氧化活性 ；熵权法 ；灰色关联分析
被引量
8
摘要： 目的研究三七Panax notoginseng花的化学成分。方法采用65%乙醇水热回流提取,石油醚、醋酸乙酯与正丁醇萃取,运用大孔吸附树脂Diaion HP-20、硅胶、MCI gel CHP 20P、Sephadex LH-20等柱色谱及半制备液相色谱等方法进行分离纯化,根据化合物的理化性质和波谱数据进行结构鉴定,并对部分化合物进行肿瘤细胞毒和抗氧化活性评价。结果从三七花正丁醇部位分离得到11个化合物,包括大环内酯类1个、酚酸类2个、木脂素类3个、黄酮类5个,分别鉴定为(11Z,10R,17R)-17-乙烯基-10-羟基氧杂环十七烷-11-烯-13,15-二炔-2-酮(1)、反式对羟基肉桂酸(2)、3-O-对香豆酰基奎宁酸(3)、(-)-芝麻素(4)、2-甲氧基芝麻素(5)、ecbolin B(6)、槲皮素(7)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃木糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖苷(9)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖苷(10)、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖苷(11)。结论化合物1为新的多烯炔型大环内酯,命名为三七花大环内酯。化合物2~6、8为首次从人参属植物中分离得到,化合物2~9为首次从三七花中分离得到。化合物4对白血病HL-60细胞的体外肿瘤生长具有弱的抑制作用。化合物7~10表现出较强的清除DPPH自由基活性。
关键词: 三七 ；酚酸类 ；木脂素类 ；黄酮类 ；三七花大环内酯 ；(-)-芝麻素 ；槲皮素-3-O-β-D-吡喃木糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖苷 ；肿瘤细胞毒活性 ；抗氧化活性
被引量
1
摘要： 目的考察阴干、晒干、冷冻干燥、微波干燥、鼓风干燥(40~80℃)等不同干燥方法及干燥温度对人参饮片化学成分及抗氧化活性的影响。方法分别制备阴干、晒干、冷冻干燥、微波干燥、鼓风干燥(40~80℃)人参饮片。采用苯酚-硫酸法、硝酸铝比色法、福林酚法、高效液相色谱法测定各样品中总黄酮,总多糖,总酚以及人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rb3、Rd含量。采用DPPH法测定不同人参饮片提取物体外抗氧化活性。结果不同干燥温度和干燥方法对人参中各类成分和抗氧化活性影响较大。冷冻干燥人参饮片总多糖、总酚、总皂苷含量均较高,总黄酮含量较低,抗氧化活性好;低温鼓风干燥人参饮片总多糖、总黄酮、总酚和总皂苷含量均较高,其中总多糖和总黄酮含量高于冷冻干燥饮片,抗氧化活性较好;随着鼓风干燥温度升高,各类成分含量和抗氧化活性有不同程度下降;微波干燥饮片各类成分含量和抗氧化活性较低。结论综合人参饮片中各类成分含量、抗氧化活性和干燥效率等三种因素,低温鼓风干燥饮片各类成分含量较高,抗氧化活性较好,干燥时间较阴干更快,采用低温鼓风干燥的方法加工人参饮片较好;冷冻干燥可以适当更多的用于人参各种提取物的生产。
关键词: 人参饮片 ；干燥温度 ；干燥方法 ；化学成分 ；抗氧化活性
被引量
8
摘要： 目的:开发以人参—酸枣仁为原料的相关保健品。方法:应用HPLC、紫外分光光度计对人参、酸枣仁不同配伍比例进行化学成分研究;应用DPPH自由基、ABTS自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基清除率分析样品的体外抗氧化活性;同时采用灰色关联度法,以熵权法所得权重为分辨系数进行统计分析,结合性状进行综合评价优选出最佳配伍比例。结果:人参—酸枣仁不同配比的样品的抗氧化活性与总酚酸、酸枣仁皂苷A、斯皮诺素含量呈显著相关关系;m_(人参)∶m_(酸枣仁)为1∶1的样品的总酚酸、酸枣仁皂苷A、斯皮诺素含量高于其他配比的,且其抗氧化活性强于其他配比的,说明抗氧化活性的药效物质基础是总酚酸、酸枣仁皂苷A、斯皮诺素。结论:人参—酸枣仁抗氧化活性最佳配比(m_(人参)∶m_(酸枣仁))为1∶1。
关键词: 人参 ；酸枣仁 ；配比 ；化学成分 ；抗氧化活性 ；相关性分析
被引量
3
摘要： 目的:比较不同配比人参-黄芪药对中指标性成分差异,探究其抗氧化活性。方法:制备人参、黄芪提取物及不同配伍比例(1∶1,1∶2,1∶4,m/m)的人参-黄芪药对提取物,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)和2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸+[2,2'-azinobis(3-ethylbenzothiazoline)-6-sulfonate+,ABTS+]和等化学法检测人参-黄芪药对清除自由基能力;建立H_(2)O_(2)诱导的HepG2细胞氧化损伤模型,通过荧光探针法与ELISA法分析人参-黄芪药对对HepG2细胞模型中氧化因子分泌水平的影响;建立D-半乳糖诱导小鼠衰老模型分析人参-黄芪药对不同配比的体内抗氧化活性;采用紫外分光光度法和HPLC-ELSD法,分析比较各提取物中活性成分(总酚酸、总皂苷、总多糖、总黄酮、总蛋白)及7种主要化学成分的含量差异。结果:人参-黄芪药对不同配比提取物,均显示出较好的抗氧化活性,人参-黄芪(1∶2)药对具有较强的清除自由基能力。体外细胞模型实验中,人参-黄芪药对给药后可显著提高细胞活力、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)含量,降低丙二醛(malondialdehyde,MDA)浓度,其中,人参-黄芪(1∶2)给药浓度为400μg·mL^(-1)时,细胞活力最高可达(92.88±2.81)%。体内实验表明,人参-黄芪(1∶2)可以增强模型小鼠血液和肝脏中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶含量,降低丙二醛浓度。人参-黄芪药对活性成分分析结果表明,人参-黄芪(1∶2)配比时总黄酮和总皂苷含量最高。结论:与单药材提取物相比,人参-黄芪药对不同配比提取物均具有良好的清除自由基能力及体内体外抗氧化作用,其中人参-黄芪(1∶2)药对的抗氧化活性最好。
关键词: 人参 ；黄芪 ；药对 ；化学成分 ；抗氧化活性
被引量
8
摘要： 比较研究了人参不同部位提取物体外的抗氧化活性及化学成分差异,为合理开发利用人参资源提供理论依据。分别采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除法(DPPH)、2,2′-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺自由基清除法(ABTS)和铁离子还原法(FRAP)评价人参不同部位提取物的抗氧化活性,利用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对人参不同部位乙酸乙酯提取物(EAE)中的化合物进行鉴别与比较。DPPH、ABTS及FRAP实验结果表明人参茎叶EAE提取物的抗氧化效果最好。其中DPPH试验EAE的半数抑制浓度(IC_(50))值为(0.66±0.02)g/L,阳性药-2,6-二叔丁基对甲基苯酚(BHT)的IC_(50)值为(0.26±0.02)g/L;ABTS试验EAE IC_(50)值为(0.54±0.26)g/L,阳性药BHT的IC_(50)值为(0.15±0.04)g/L;FRAP试验EAE结果为(272.09±3.78)mg/L,阳性药BHT的值为(1319.37±3.80)mg/L。经GC-MS分析,分别从人参根、人参茎叶、人参花和人参种子EAE提取物中鉴别出20、27、14和14种成分,其中共有成分1种,为亚油酸。本研究为更好地合理开发与利用人参资源及精深加工抗氧化食品、化妆品产品提供了理论依据。
关键词: 人参提取物 ；抗氧化活性 ；化学成分 ；成分差异
被引量
13
摘要： 为探究九蒸九晒炮制方法对人参不同部位的化学成分和抗氧化活性的影响,该试验采用超高效液相色谱法测定在九蒸九晒炮制过程中人参不同部位的10种人参皂苷和5-羟甲基糠醛(5-HMF)的含量,并测定其抗氧化活性,结合主成分分析(PCA)、聚类分析(HCA)和正交偏最小二乘判别分析法(OPLS-DA)进行质量评价。结果显示,人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd、Rc、Rb2的含量先升高后降低;人参皂苷Rg3、Rk1、Rg5、Rh1的含量逐渐升高;5-HMF的含量先升高后降低。PCA结果共提取到2个主成分,HCA结果将须根部位与其他部位进行区分,OPLS-DA结果确定了人参皂苷Rg5、Rk1、Rg1和Re、Rg3、Rh1为主要差异性成分。不同蒸晒次数的人参的抗氧化活性具有一定差异,其中,人参第二次蒸晒的须根样品对羟自由基清除能力最强。本研究通过九蒸九晒的炮制和化学计量学模式的识别,揭示了人参不同根部部位化学成分和抗氧化活性之间的规律,即稀有人参皂苷与抗氧化活性呈现负相关性。此结果可为人参的进一步开发利用提供科学依据。
关键词: 人参 ；九蒸九晒 ；根部的不同部位 ；化学计量学 ；抗氧化
被引量
3
摘要： 绞股蓝是一味传统中药,含有皂苷类、黄酮类、多糖类等化学成分,其主要药理作用有抗氧化、抗癌、降血脂、预防衰老、提高免疫力等作用,与人参相似,被誉为"南方人参"。本文总结了近年来绞股蓝总提物、多糖、皂苷及其他成分的抗氧化活性的研究进展,为进一步阐明绞股蓝抗氧化作用的药效物质基础及更好地应用于治疗氧化损伤引起的疾病提供依据。
关键词: 绞股蓝 ；皂苷 ；黄酮 ；多糖 ；抗氧化
被引量
10
摘要： 为研究9个产地白术挥发油的化学成分,并分析挥发油的抗氧化和抑菌活性。运用水蒸气蒸馏法提取9个地区的白术挥发油,利用GC-MS对挥发油的化学成分进行测定,同时,采用抑菌圈法对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及枯草芽孢杆菌进行抑菌活性研究,使用DPPH、FRAP、ABTS法对9个产地白术挥发油进行抗氧化活性研究。鉴定出27种化学成分,主要成分为苍术酮、甘香烯、β-人参烯和9,10-脱氢-异长叶烯等;白术挥发油对大肠杆菌、枯草杆菌和金黄色葡萄球菌均具有一定的抑制作用,浙江磐安产区的挥发油对抑制金黄色葡萄球菌效果最佳,抑菌圈直径1.61±0.067cm,陕西商洛抑制枯草杆菌效果最佳,抑菌圈直径1.2±0.019cm,浙江天台抑制大肠杆菌效果最佳,抑菌圈直径1.07±0.019cm;抗氧化实验表明,9个产地白术挥发油均具有较强的抗氧化活性,其中浙江新昌产地白术挥发油对DPPH、ABTS自由基清除能力最高,分别为407.15μg Trolox·mL^(-1)和4.417mmol·mL^(-1)。浙江天台产地白术挥发油FRAP抗氧化能力最高,为213.28mmol·mL^(-1);综合实验结果表明,浙江地区的白术挥发油成分含量、抑菌活性和抗氧化能力要强于其他地区。
关键词: 白术挥发油 ；抗菌活性 ；抗氧化活性 ；主成分分析 ；聚类分析
摘要： 目的研究三七Panax notoginseng叶乙醇提取物的化学成分及抗氧化活性(ABTS和DPPH)。方法利用硅藻土、硅胶、MCI柱色谱、凝胶柱色谱、中压制备液相色谱和制备液相等色谱技术进行分离纯化,并应用质谱、核磁共振等波谱技术鉴定化合物结构。初步考察了这些化合物的抗氧化能力。结果从三七叶95%乙醇提取物的氯仿、丙酮-乙醇(4∶1)和丙酮-乙醇(1∶1)3个洗脱部位中分离鉴定了15个化合物,分别为falcarinol(1)、γ-tocopherol(2)、(5S)-3α-acetyl-2,3,5-trimethyl-7α-hydroxy-5-(4,8,12-trimethyltridecanyl)-1,3α,5,6,7,7α-hexahydro-4-oxainden-1-one(3)、picrionoside B(4)、linarionoside A(5)、viburnolide A(6)、槲皮素(7)、lilyn(8)、茵芋苷(9)、阿彼斯基姆素(10)、daphnin methylether(11)、20(S)-人参皂苷Rh2(12)、人参皂苷F2(13)、20(R)-人参皂苷Rh2(14)、异人参皂苷Rh3(15)。结论化合物3、6、9~11为首次从人参属植物中分离得到,化合物2、4为首次从该植物中分离得到。化合物2、4、7、8具有较强的抗氧化活性。
关键词: 三七 ；viburolide ；A ；茵芋苷 ；阿彼斯基姆素 ；daphnin ；methylether ；抗氧化
被引量
51
【会议论文】 •
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会议名称： 2012中国吉林·国际人参大会(2012 International Conference on Ginseng·Jinlin China)
会议时间： 2012-09-04
摘要： 人参(Panax ginseng C.A.Meyer)为五加科(Araliaceae)植物人参的根,主产于中国东北地区,是中国传统中药,素有百草之王之称。中国历史上第一部药学名著《神农本草经》中记载:"人参,主补五脏、安精神、定魂魄、止惊悸、除邪气、明目、开心、益智,久服轻身延年",已经有2000多年的应用历史。
传统人参加工经过蒸制、干燥是为了便于保存并且改变药性。人参加工品有多种,本文主要研究白参、红参和黑参这三种人参加工产品。白参是由鲜人参经过干燥制成的,红参是鲜人参在95-100℃条件下蒸2-3小时,然后干燥加工而成。大量研究发现，红参比白参或未加工的人参具有更强的生物活性，例如抗氧化活性、抗焦虑样作用以及抗肿瘤活性。黑参是白参在98℃条件下，蒸3小时，然后干燥，如此经过9次循环加工而成。黑参中含多种白参中没有的人参皂苷，包括人参皂苷Rg3、Rg5、Rk1等。黑参的生物活性比白参和红参强。众所周知人参在加热过程中化学成分会发生变化，但是随着加热次数的变化，人参皂苷的组成及含量变化研究报道较少。本文应用HPLC-UV方法对几种重要的人参皂苷的变化进行了考察。结果表明在鲜人参中没有发现的稀有皂苷(Rg3,Compound K and Rg5)经过4次加热循环后，达到71.40±1.34mg/g，但常见皂苷(Rf,Rg2,Rb1,Rc,Rb2,Rb3 and Rd)大幅减少。此外，由DPPH自由基清除作用测定结果，经过4次加热循环后，ECS。值最低(0.35 mg/mL)。传统上高丽黑参采用9次循环加热干燥，实验证明4次可能是最佳结果，不仅稀有皂苷含量高，而且抗氧化活性也强。关于其他生物活性有待进一步研究。
关键词: 人参皂苷 ；蒸制干燥加工 ；成分分析 ；抗氧化作用
摘要： 葛根（Pueraria lobata）,又称印度葛藤,有着亚洲人参的美称。它是分布在印度和其他亚洲国家的草本豆科植物,是一种生长迅速的大型多年生攀缘植物,有大块根,其味甘、辛,性凉。数千年来,它一直是食物、饲料和药物的来源,也是中国大部分地区已知最早、最有价值的可食用草本植物之一。中国传统草药、中国药典记录报告称,它们被用于治疗废渴,降血糖。现代药理研究表明,葛根对高血压、糖尿病、心血管疾病、缺血性脑卒以及抗氧化等都有作用。葛根的重要生物活性功能归因于它的化学成分,包括类黄酮（特别是葛根素和大豆黄酮素）、酚类化合物和多糖。目前对葛根的研究主要集中在类黄酮分子和酚类化合物上,对葛根中的大分子多糖的研究却很少,对其化学修饰产物的探究几乎没有,这也就限制了葛根多糖及化学修饰产物的生物活性的相关应用。近年来,中药多糖因其具有抗肿瘤、降糖、抗辐射、降血脂、调节机体免疫和抗氧化功能等多种功能受到广泛的关注。葛根是我国传统的可食用药材,富含多种天然产物,在免疫调节以及抗氧化等方面均有较好的应用前景。综上,对葛根多糖（PLPs）进行深入研究是非常有必要的。本实验中经过水提醇沉法制备得到PLPs并对其进行了提取工艺的响应面优化。接着对葛根多糖进行磷酸化、羧甲基化和乙酰化修饰得到相应的三种衍生物（P-PLPs、CM-PLPs、Ac-PLPs）。同时利用紫外（UV）光谱、傅里叶红外（FT-IR）光谱图和核磁共振（NMR）仪对PLPs及其化学修饰产物进行表征。最后通过测定羟基自由基清除活性、抗脂质过氧化活性和DPPH自由基清除活性3个来评价4种多糖（PLPs、P-PLPs、CM-PLPs、Ac-PLPs）的抗氧化活性。本实验的相关研究内容和结论如下:1.PLPs的提取:本实验采用热水提取法进行葛根多糖的提取,从单因素实验入手,采用响应面分析的方法,对PLPs的提取工艺进行优选。最终得到以下最佳提取工艺参数:提取温度84℃,液固比为11 m L/g,提取时间是73 min,提取率可以达到8.59%。在多糖的除杂方面:用Sevag法脱除溶于水的蛋白和用H2O2除掉色素后得到精致的PLPs,并利用高效液相色谱（HPLC）对其进行单糖组成分析,结合FT-IR和NMR对其进行结构表征。最终得出PLPs主要由葡萄糖残基组成,PLPs的化学结构存在→4)-α-D-Glcp-(1→连接的重复骨架单元。2.PLPs的化学修饰:采用三氯氧磷法、氯乙酸法和乙酸酐法对PLPs进行了结构修饰,分别得到P-PLPs、Ac-PLPs和CM-PLPs,同时对这几种化学修饰产物的结构和取代度进行了分析。结合相应的文献,FT-IR和NMR的结果均显示3种化学修饰是成功的。苯酚-硫酸法测定了3种衍生物的总糖含量,发现经过化学修饰后的多糖,总糖含量都有了一定的下降,这是由于在化学修饰反应中部分多糖被水解所致。P-PLPs、CM-PLPs和Ac-PLPs的总糖含量分别是75.52%、64.36%和51.63%。其中,Ac-PLPs的含糖量最低,但所有修饰过后的多糖总糖含量均大于50%。此外,P-PLPs、CM-PLPs和Ac-PLPs的取代度分别是0.15、0.58和0.78,参考相关的文献,他们的取代度是在一个合理的范围。3.对PLPs和三种化学修饰产物（P-PLPs、CM-PLPs、Ac-PLPs）进行了抗氧化活性的研究和讨论。通过羟基自由基（·OH）清除活性、抗脂质过氧化清除活性和DPPH自由基清除活性的3个实验,分析并讨论了葛根多糖及其化学修饰产物的抗氧化活性。综合3个实验的结果分析发现:1)经化学修饰后的PLPs活性有了显著提升,但是不同化学修饰对PLPs抗氧化活性的提升效果不同;2)以磷酸化修饰对多糖的抗氧化活性提升最为明显,特别是在高浓度时,P-PLPs的DPPH自由基清除活性已经达到88.78%,几乎趋近于同浓度VC的清除效果。其中P-PLPs在三个抗氧化实验中都表现出远优于其他多糖的清除能力,被认为是一种高效的化学改性方式。3)CM-PLPs在大多数情况下都表现出了较优异的清除活性,其中羟基自由基和DPPH自由基的清除活性都能达到60%以上,是一种具有潜力的修饰手法。
关键词: 葛根多糖 ；制备 ；表征 ；化学修饰 ；氧化活性
被引量
1
摘要： 肝损伤是一类因多种致病因素影响进而导致肝细胞损伤和肝脏功能异常的疾病。芪胶升白胶囊是贵州省苗族民间验方,中医古方中记载芪胶升白胶囊用来治疗正气虚邪气实以及气血两虚。芪胶升白胶囊已经被临床用于治疗化疗造成的白细胞以及血小板减少症,取得了良好疗效。近年来,临床研究发现芪胶升白胶囊对肝损伤具有良好保护作用,本研究通过对芪胶升白胶囊的保肝作用及其机制进行系统研究,为开发其新适应症奠定基础。
本研究第一章首先通过构建四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝损伤模型,观察芪胶升白胶囊对CCl4诱导大鼠肝损伤的保护作用,验证其保肝活性。结果显示芪胶升白胶囊能够降低CCl4引起的肝损伤大鼠血清中的谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)水平,并且能够改善肝损伤大鼠肝脏组织病理结构的改变以及炎症细胞浸润。除此之外,本研究还对肝脏组织中的丙二醛(MDA)、总谷胱甘肽(GSSG+GSH)、总谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)以及超氧化物歧化酶(SOD)的含量或活力进行测定。结果显示芪胶升白胶囊能够抑制肝脏中的MDA的产生并上调肝脏中GSH-Px以及SOD的活力,这表明芪胶升白胶囊具有良好的保肝作用。
在明确了芪胶升白胶囊体内保肝作用之后,为了进一步确定芪胶升白胶囊中具体发挥肝保护作用的活性成分,本研究在前期研究基础上,第二章选择了芪胶升白胶囊中各单味药提取物或单味药中具有代表性的活性成分,对它们在抗氧化、抗炎和肝细胞直接保护作用等方面的活性进行筛选。在抗氧化活性筛选中,发现血人参、黄芪和淫羊藿中成分具有较强的直接抗氧化活性;黄芪中黄芪甲苷和环黄芪醇能够显著抑制酵母多糖(zymosan)诱导中性粒细胞释放超氧化物。在抗炎活性筛选中,发现血人参、黄芪、淫羊藿和当归中的成分能够显著抑制脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞释放一氧化氮(NO);血人参、黄芪和淫羊藿中成分能够显著抑制巨噬细胞分泌炎症因子TNF-α和IL-6。在肝细胞直接保护作用筛选中,建立了 CCl4、过氧化氢和乙醇诱导的肝细胞损伤模型,对芪胶升白胶囊各单味药及其中化合物的直接保肝活性进行了筛选。结果显示血人参、黄芪、淫羊藿和苦参中化学成分对CCl4和过氧化氢诱导的肝细胞损伤具有较强的保护作用;黄芪和苦参中化学成分还对乙醇诱导的肝细胞损伤具有一定的保护作用;另外凋亡分析显示芪胶升白胶囊总提物、血人参提取物和黄芪提取物对CCl4诱导的肝细胞凋亡具有一定的抑制作用。
在对芪胶升白胶囊各单味药的提取物及单体化合物进行抗氧化、抗炎和肝细胞直接保护作用筛选中,发现血人参提取物及从中分离化合物具有抗氧化、抗炎和肝细胞直接保护作用等多方面活性。特别是其中的化合物ZYF-4在三方面筛选中显出了和血人参提取物一致的活性,并且ZYF-4在抗炎方面表现出突出的活性,因此我们在第三章中对ZYF-4抗炎作用及机制进行了研究。结果显示血人参中活性成分ZYF-4能够显著抑制巨噬细胞释放NO,还能抑制TNF-α、IL-6、IL-1β、MIP-1α、MCP-1和IFN-β等炎症因子的mRNA转录,同时抑制炎症因子TNF-α、IL-6、MCP-1和IFN-β的分泌,另外对中性粒细胞释放活性氧也具有显著抑制作用,其作用机制可能主要是通过抑制JNK1/2、ERK1/2和STAT1信号通路发挥药效作用。
综上所述,本研究首先通过体内实验验证了芪胶升白胶囊肝保护的药效作用,然后在体外通过多种模型筛选芪胶升白胶囊中发挥肝保护的活性成分,最后对血人参中代表性活性化合物发挥药效的分子机制进行研究,揭示了芪胶升白胶囊主要是通过血人参、黄芪和淫羊藿中活性成分以抗氧化、抗炎和直接肝细胞保护作用等多方面机制发挥保肝作用。以上研究结果表明,芪胶升白胶囊具有开发为保肝药物的重大潜力。
关键词: 肝保护 ；巨噬细胞 ；抗炎 ；芪胶升白胶囊 ；血人参
被引量
1
摘要： 第一部分生慧颗粒制备工艺研究目的:目前我国人口老龄化形势日益严峻,作为常见的老年病,阿尔茨海默症(Alzheimer’s disease,AD)的发病率呈现上升趋势,由于其难治性和发病机制不确定性,必将长期成为医学研究的热点。生慧汤载于清代名医陈士铎的《辩证录?健忘门》,全方由熟地黄、石菖蒲、山茱萸、远志、柏子仁(去油)、酸枣仁、茯神、人参、白芥子九味中药组成,具有益气养血,交通心肾的功效,临床上常用于治疗老年性痴呆。我校老年医学研究所多年的临床实践证明,生慧汤具有良好的改善学习记忆能力和防治失眠的功效。原方为汤剂,未建立起一套控制质量的规范,且具服用量大、不易携带等缺点,因此本研究团队运用传统工艺及现代分析技术将其开发为医院制剂,以期克服汤剂所存在的不足之处。生慧汤水提物收膏率较高,故选择将其制成颗粒剂,生产过程简单、易于贮藏运输、患者服用的顺应性高、作用迅速,利于医院药剂室使用,能较好满足其临床运用的目的。方法:生慧颗粒制备工艺研究包括提取工艺、纯化工艺、浓缩干燥工艺、成型工艺的研究。采用正交试验法,以莫诺苷和马钱苷的总含量及干膏得率为评价指标优选水提工艺,并进行验证试验。为减少日服剂量,同时考虑到实际生产中经济便捷的要求,选择静置纯化,在室温与冷藏两种情况下,分析静置时间对评价指标的影响,并对浓缩干燥工艺进行考察。在成型工艺中,以吸湿率、成型性、流动性为评价指标,优选辅料种类、辅料用量与制粒条件。按照最佳制备工艺制备生慧颗粒,根据2015版《中国药典》四部制剂通则0104对生慧颗粒进行相应的检查。优选出的最佳制备工艺参数为:全方药材浸泡1小时,补足药材吸水量,加至10倍量的水,提取2次,每次1.5小时;提取液在室温下(25℃)静置12小时,吸取上清液,浓缩至相对密度为1.07-1.08(60℃)的清膏,加入0.5-1倍左右干膏量的糊精,混匀,置60℃减压干燥箱中干燥,研磨至粉,喷洒80%乙醇过1号筛制软材,置60℃干燥,用1号筛与5号筛整粒,制备的颗粒均符合2015版《中国药典》四部制剂通则0104的各项检查。结果:结论:本试验优选的制备工艺切实可行,验证三批小试结果均符合规定,小试工艺条件经中试进一步调整后,可过渡到产业化生产。第二部分基于系统生物学的生慧颗粒益智药效物质与机理研究目的:本部分基于网络药理学与秀丽隐杆线虫试验,对生慧颗粒防治AD的药效物质基础、作用机制进行了初步研究,以期为生慧颗粒的临床应用提供科学依据以及为中药复方防治AD开拓新思路。方法:1.生慧颗粒防治AD的网络药理学研究:首先通过TCMSP等中药数据库对方中9味中药的化学成分进行系统的整理分析,随后运用UHPLC-LTQ-Orbitrap-MS色谱技术进行定性分析,以现有的对照品结合色谱图、质谱离子片段的保留时间和相关文献筛选出与AD靶点密切相关的活性成分;由薄层色谱(TLC)-生物自显影技术快速检测生慧颗粒中抗氧化活性成分;通过计算AD与非AD患者基因表达差异探索生慧颗粒成分作用的核心靶点,由KEGG与GO富集分析寻找生慧颗粒防治AD的多种潜在作用机制。2.生慧颗粒的药理学研究:选择秀丽隐杆线虫作为试验模式生物,通过百草枯氧化胁迫试验筛选生慧颗粒具有抗氧化活性的最佳药物浓度;通过寿命试验考察生慧颗粒抗衰老、延寿药理作用;通过趋化以及短期联想学习记忆试验,以期证实生慧颗粒的提高学习记忆能力、改善健忘的功效;运用UHPLC-QQQ-MS色谱技术检测秀丽隐杆线虫给药后神经递质的含量变化,以期阐释生慧颗粒具有增强学习记忆能力作用机制。结果:1.利用网络药理学分析得到93种化学成分,结合UHPLC-LTQ-Orbitrap色谱技术,筛选出其中5种与AD靶点密切相关的共同活性化合物,即芦丁、芥子酸、金丝桃苷、槲皮苷、山萘酚;由TLC-生物自显影试验证实生慧颗粒中这五种成分具有抗氧化活性,同时一些具有较强抗氧化作用的未知成分尚需要通过富集、结构鉴定加以确认;由Drug Bank分析,一共得到202个靶点,其中169个靶点与AD相关,19个靶点与AD直接作用,联合蛋白互作网络(PPI)结果发现,ADRA1B、ADRA1A、ADRA1D、ADRB2、F2、GABRA2、GABRA1、CHRM2、CHRM1、CHRM3这10个靶点主要与神经元-突触有关;由生物过程和信号通路富集分析得到生慧颗粒防治AD可能与调节肾上腺素能受体、神经元-突触通路、胆碱能通路有关。2.百草枯氧化胁迫试验优选的最佳药物浓度为40 mg/ml。以最佳浓度开展的寿命试验结果表明,生慧颗粒与化合物芥子酸均能显著延长野生型秀丽隐杆线虫的生存时间;短期联想学习记忆试验结果表明,生慧颗粒组比空白组的联想记忆能力更强,至遗忘的时间点更远;UHPLC-QQQ-MS色谱技术检测神经递质试验结果表明,与空白组相比给药组的肾上腺素(Epi)、谷氨酸(Glu)水平显著降低,多巴胺(DA)、γ-氨基丁酸(GABA)水平显著升高。结论:1.芦丁、芥子酸、金丝桃苷、槲皮苷、山萘酚为生慧颗粒中与AD靶点密切相关的主要活性成分,其良好的抗氧化活性可能是生慧颗粒防治AD的主要药效物质基础。2.生慧颗粒可能通过调节肾上腺素能受体等生物过程,影响核心靶蛋白的表达,作用于神经元-突触通路、胆碱能通路发挥药效。3.生慧颗粒对秀丽隐杆线虫具有抗氧化应激、延寿、增强联想记忆能力的药理活性。4.生慧颗粒可以调节秀丽隐杆线虫的DA、Glu、GABA和Epi等神经递质水平,这可能是使其学习记忆能力提高的因素之一。
关键词: 生慧颗粒 ；制备工艺 ；水提工艺 ；成型工艺 ；网络药理学 ；秀丽隐杆线虫 ；阿尔茨海默症 ；生慧汤
被引量
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摘要： 目的结合网络药理学与分子对接技术,对巴西人参-覆盆子的潜在活性成分与核心靶点进行探究,为后期课题研究提供基础与研究方向;通过腺嘌呤对大鼠造模,初步探究巴西人参-覆盆子在少弱精子症上的治疗效果,以验证网络药理学结果;通过对热风干燥、真空干燥、喷雾干燥与冷冻干燥的粉体进行多指标测定及物理指纹图谱评价以讨论不同干燥方法的差异,为后期固体制剂的研究提供有价值的参考;基于QbD概念研制巴西人参-覆盆子泡腾片,在对产品质量目标、关键质量属性与关键物料属性确定的理论基础上对泡腾片的处方进行优化设计,在达到崩解时限、发泡量等药典质量要求的同时获得最佳味觉感受,以达到泡腾片产品设计的质量目标。方法1.巴西人参-覆盆子用于治疗少弱精子症的网络药理学研究。运用TCMSP、TCMID及文献检索等方法获取巴西人参及覆盆子的活性成分,在Pub Chem数据库及中国天然产物化学成分库中确认化合物结构并建立成分数据库。在Swiss ADME数据库中以同时符合Lipinski五规则及Veber规则为条件进行筛选。通过Swiss Target Prediction对活性成分进行靶点预测及筛选。在Gene Cards、Pharm Gkb、OMIM、Uni Prot数据库中收集与少弱精子症相关的疾病靶点。通过构建药材-成分-靶点网络的构建预测药物对发挥治疗少弱精子症作用的关键靶点与活性成分。针对核心靶点进行GO BP、GO CC、GO MF分析,并利用富集结果推测巴西人参-覆盆子防治少弱精子症的作用机制。2.巴西人参-覆盆子治疗少弱精子症模型大鼠的药效研究。将56只雄性大鼠随机分为7组。分别为正常组、模型组、阳性对照组、巴西人参低剂量组、巴西人参高剂量组、巴西人参-覆盆子低剂量组、巴西人参-覆盆子高剂量组,每组8只。除正常组外,其余各组每日均给予250mg·kg-1腺嘌呤,连续灌胃4周。自第5周起,正常组、模型组均给予等量纯水,阳性对照组给予左卡尼汀100mg·kg-1,巴西人参低剂量组给予1000mg·kg-1,巴西人参高剂量组给予1500mg·kg-1,巴西人参-覆盆子低剂量组给予巴西人参1000mg·kg-1、覆盆子450mg·kg-1,巴西人参-覆盆子高剂量组给予巴西人参1000mg·kg-1、覆盆子860mg·kg-1。每日灌胃1次,连续给药4周后取材,对受试大鼠的精子数量、精子活力、SOD活力及MDA含量进行检测,对大鼠睾丸的组织形态及附睾内精子的形态进行染色观察。3.不同干燥方式巴西人参-覆盆子提取物粉体学性质比较。采用真空干燥、喷雾干燥、热风干燥、冷冻干燥方法制备巴西人参-覆盆子粉末样品,通过中值粒径、粒径分布宽度、粒径分布范围表征均一性;通过松装密度、振实密度表征堆积性;通过颗粒间孔隙率、卡尔指数表征可压性;通过休止角、豪纳斯比表征流动性;通过含水量、吸湿率表征稳定性。根据上述二级指标构建巴西人参-覆盆子提取物粉末的物理指纹图谱,并通过相似度分析、聚类分析及主成分分析比较各干燥方式间的差异及产生差异的主要因素。4.基于QbD概念巴西人参-覆盆子泡腾片的制备。依次确定产品质量目标、关键质量属性及关键物料属性;以崩解时限、发泡量为重点考察因素,分别对巴西人参-覆盆子泡腾片的酸碱比、填充剂、甜味剂、润滑剂及主药添加量分别进行单因素考察;根据单因素考察结果进行Box-Behnken响应面试验优化,通过二阶回归模型方差分析得到最佳处方,并对该处方进行感官评价验证以及泡腾片质量检查。结果1.共获得类药性成分32个,核心靶点主要包括CDK1、CCNA2、CCNB1、CCNB2、CDC20、CDK2、CCNA1、CDC25C、BUB1、CCNE1。主要富集于Cell cycle、p53 signaling pathway、Cellular senescence、AMPK signaling pathway、Fox O signaling pathway等通路,涉及睾丸组织细胞周期调控及类固醇类激素代谢等生物过程。2.少弱精子症模型大鼠给药4周后,阳性对照组、巴西人参低剂量组、巴西人参高剂量组、巴西人参-覆盆子低剂量组、巴西人参-覆盆子高剂量组均对大鼠的睾丸组织产生一定程度的修复作用,睾丸生精小管相对饱满,上皮结构尚完整,但各级生精细胞略为紊乱,相较于模型组管腔内可见较多的精子细胞。巴西人参及其与覆盆子配伍后可提高大鼠的精子浓度及活力,适当提升SOD活力,降低睾丸中MDA含量,并减少腺嘌呤对于睾丸部位的损害,以药效实验验证了网络药理学的研究结果。3.热风干燥粉、真空干燥粉、喷雾干燥粉、冷冻干燥粉与对照图谱的相关性系数分别为0.516、0.965、0.697、0.717。真空干燥粉与冷冻干燥粉的粉体学性质最为相似,但冷冻干燥粉由于含水量更高,干燥用时更长。热风干燥粉的含水量最少,较易出现糊化现象。喷雾干燥粉流动性最好,但堆积性与可压性较差。4.单因素试验结果为酸碱比在1.3:1至1.5:1范围内较为合适,填充剂为微晶纤维素、甜味剂为赤藓糖醇、润滑剂为PEG6000。响应面优化结果表明各因素对泡腾片感官评分的影响大小依次为:B主药添加量>C酸碱比>A崩解剂添加量。通过所建立的二阶回归模型预测泡腾片的最佳处方为主药添加量20%,崩解剂添加量50%,酸碱比1.4:1,经验证后模型较为可靠。结论巴西人参-覆盆子可能通过其抗炎、抗氧化活性成分改善大鼠少精弱精症状,其作用机制可能为对大鼠睾丸生精上皮细胞产生的保护作用,使其减少腺嘌呤在体内对于睾丸的损害,减少氧化应激的发生从而提高精子质量。通过两种药材所制备的喷雾干燥粉可以很好地应用于泡腾片的制备中,在压片过程中吸湿现象不明显,巴西人参-覆盆子泡腾片的研制可为巴西人参相关产品的开发提供一定参考。
关键词: 巴西人参 ；少弱精子症 ；网络药理学 ；分子对接 ；片剂 ；QbD
摘要： 目的:采用综合评价的方法优选人参片和整支人参的冻干工艺;比较传统干燥方式和冻干对人参化学成分和感官品质的变化;对不同干燥方式的人参进行质量评价,为规范人参的生产及质量控制,更好的储存人参提供理论依据和方法参考;通过考察不同干燥方式人参中皂苷类成分在人工胃液中的溶出度,对不同干燥方式人参的生物活性进行初步探究。方法:1.单因素试验为基础,基于信息熵理论和反向传播人工神经网络(BP-ANN)结合正交试验,以切片厚度、主干燥温度、主干燥时间、主干燥压力为考察因素,以外观性状、失水率、人参皂苷Rg1、Re、Rb1含量、浸出物含量为评价指标,优选人参片冻干工艺;以失水率为评价指标,优选整支人参冻干工艺。2.以不同干燥方式人参为研究对象,通过紫外分光光度法测定人参总皂苷、总黄酮、总糖的含量,色差仪测定其色差值,DPPH法评价其体外抗氧化活性,复水法测定复水比,通过测定人参切片干燥前后的直径和厚度计算其体积收缩率,参照《中国药典》2020版四部项下通则2201测定浸出物含量;综合上述结果通过变异系数法对其品质进行比较分析。3.建立不同干燥方式人参样品HPLC测定方法,通过《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》,对色谱图进行分析并建立其指纹图谱,评价其相似度,通过SPSS 21.0版对结果进行聚类分析。4.采用液质联用技术对仿生提取的冻干人参样品的皂苷类成分进行定性分析,质谱条件:电喷雾离子源(ESI),采用负离子扫描模式,喷雾电压-3.5k V,质量扫描范围m/z100-1500,鞘气流量35 Arb,辅助气流量10Arb,S-lens射频水平50%,毛细管温度320℃。液相条件:Waters BEH C18(100 mm×2.1 mm×1.7μm)色谱柱;流动相A为0.1%甲酸-水溶液,B为乙腈,梯度洗脱,流速0.2 m L/min;进样量1μL;柱温35℃。定量测定仿生提取的不同干燥方式人参中人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rb2、Rh1、Rc、Rd在人工胃液中的溶出度。结果:1.人参片的最佳冻干条件为切片厚度2-4 mm,预冻-30℃,2 h、主干燥温度-10℃、压力0.70 mbar、干燥时间≥8 h。整支人参的最佳冻干工艺为将整支人参按大小排8～12针置冻干机内,预冻-40℃,3 h;主干燥-30℃,12 h;-20℃,12 h;-10℃,12 h;0℃,12 h,压力0.370 mbar;终末干燥温度30℃,6 h,压力0.213 mbar。2.不同干燥方式人参其综合评分由高到低依次是:冻干>55℃烘干>30℃烘干>晒干>阴干。冻干人参的品质最优,阴干人参的品质最差。3.考察了不同干燥方式人参指纹图谱的重复性、精密度、稳定性结果RSD均小于3%,确定16个共有峰,其中4号峰为Rg1、5号峰为Re、7号峰为Rb1、10号峰为Rc、11号峰为Rh1、12号峰为Rb2、14号峰为Rd,S1-S20样品与对照指纹图谱的相似度均大于0.9;聚类分析结果显示,样品被归为4类,其中55℃烘干组、晾干组、冻干组、30℃烘干组与阴干组有很十分明显的区分,其中阴干组、30℃烘干组的区分不是十分清晰,可以归为一类。4.仿生提取的冻干人参通过质谱裂解碎片以及精确分子量共鉴定出21种人参皂苷,对其中7种人参皂苷通过高效液相进行定量测定。人参皂苷Rg1含量:冻干>30℃烘干>晾干>阴干>55℃烘干;人参皂苷Re含量:冻干>阴干>30℃烘干>晾干>55℃烘干;人参皂苷Rc含量:冻干>阴干>30℃烘干>晾干>55℃烘干;人参皂苷Rb1含量:30℃烘干>冻干>阴干>55℃烘干>晾干;人参皂苷Rd含量:冻干>30℃烘干>阴干>55℃烘干>晾干;人参皂苷Rh1含量:冻干>30℃烘干>晾干>阴干>55℃烘干;人参皂苷Rb2:含量冻干>30℃烘干>晾干>阴干>55℃烘干。七种人参皂苷含量之和:冻干>30℃烘干>阴干>晾干>55℃烘干。结论:1.确定了人参片和整支人参的最佳冻干工艺参数,经验证工艺参数稳定可行,为企业规模化生产提供了依据。2.不同干燥方式的人参外观性状、感官品质、内在活性成分具有一定差异,可以优先选择冻干或热风干燥进行加工处理。冻干饮片更好保留鲜参品质,体积收缩小,外形饱满,质地酥脆,口感好,但耗能大;热风干燥快速,体积收缩大,外形皱缩,质地坚硬,但操作简便,耗能低,生产效率高。在实际生产过程中,可根据具体需要和生产条件进行合理选择。3.通过对不同产地不同干燥方式人参中皂苷类成分进行指纹图谱相似度分析、聚类分析,表明4批5种不同干燥方式的人参饮片高效液相色谱图之间存在相似关系,不同干燥方式人参也存在差异。4.不同干燥方式的人参因失水方式和仿生提取过程中皂苷类成分转化使其人参皂苷含量在人工胃液中的溶出度存在差异,其中冻干的样品质地酥脆,口感佳,极易粉碎,仿生提取的有效成分含量高,其生物利用度更高。
关键词: 人参 ；真空冷冻干燥 ；品质 ；液质联用 ；人工胃液
被引量
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摘要： 红景天（Rhodiola rosea）为景天属多年生草本植物,种类繁多,主要分布在新疆,有着“高原人参”的称号,主要成分有皂苷、多糖,黄酮和维生素等。近年来药理研究发现红景天具有抗缺氧、抗疲劳、抗衰老、抗抑郁症和免疫调节等多种作用,作为保健药物与食品资源已得到认可。目前研究最多的是红景天的活性成分提取工艺和有效成分分离纯化,有关其它成分和药理研究甚少。本文以抗衰老活性为研究重点,利用HSF和HaCaT细胞紫外照射受损来建立细胞光老化衰老模型,从四种天然产物中筛选得到效果最佳的红景天,从红景天的化学成分、生物活性入手,对其有效成分进行分离纯化,重点研究抗衰老活性。远志、酸枣仁、山麦冬和红景天粉末分别用75%乙醇加热回流提取得到乙醇粗提物,再经过有机溶剂分级萃取得到四个极性部位萃取物（石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相和水相）。建立HSF和HaCaT细胞UVB照射损伤模型,确定细胞照射能量。对4个品种进行皮肤细胞的抗光老化衰老实验筛选,得到效果最佳的为红景天,再针对红景天的乙醇粗提物和四个极性部位进行抗氧化、抗肿瘤、抗衰老实验。在抗氧化中,以Vc为阳性对照,采用DPPH、ABTS、FRAP三种体系检测样品的抗氧化性,结果显示红景天整体样品的抗氧化性都很强,乙酸乙酯相和正丁醇相尤为突出;抗肿瘤中,整体效果一般,低浓度时几乎无抗癌作用;抗衰老中,红景天乙酸乙酯相和正丁醇相的效果最明显。综合考虑研究结果,证实红景天经过分级萃取后,活性成分大都集中在乙酸乙酯相和正丁醇相中,因此后续重点研究乙酸乙酯相和正丁醇相。为全面研究红景天的有效成分,提取红景天四大类（皂苷、黄酮、多糖和挥发油）,测定四大类的含量,分别为总皂苷含量56.82%,总黄酮含量44.14%,总多糖含量55.58%,挥发油提取率为0.12%。对四大类进行了抗氧化、抗肿瘤和抗衰老活性的研究,结果表明:抗氧化活性中,黄酮和皂苷的抗氧化性较好于多糖和挥发油;抗肿瘤活性中,四者的效果都不明显;在抗衰老活性中,皂苷的效果是最佳的,且好于阳性对照,多糖和挥发油效果一般。利用硅胶柱、ODS柱、凝胶柱等分离手段,对红景天的乙酸乙酯相和正丁醇相进行分离纯化,得到四个单体化合物,结合现代波谱方法(1H-NMR和13C-NMR)进行物质鉴定结构,分别为:山奈酚、熊果苷、红景天苷和红景天素。探讨了四个单体的抗氧化性、抗肿瘤活性和抗衰老活性,结果显示单体的抗氧化性都较强,其中山奈酚的效果好于阳性对照,熊果苷效果和阳性对照相当,顺序为山奈酚>熊果苷>红景天素>红景天苷;抗肿瘤活性中,低浓度时单体的效果和红景天整体的效果一致,对癌细胞无杀害作用,高浓度时,红景天素表现出较强的抗肝癌和抗肺癌细胞能力,较强于红景天整体;在抗光老化衰老实验中,单体都表现出较强的光老化修复能力,其中山奈酚和熊果苷的能力好于阳性对照,红景天苷和红景天素的修复能力稍弱于阳性对照,整体的效果都很强,值得深入研究。最后以单体作用于受损伤的HSF细胞为研究对象,测量细胞上清液中的炎症细胞因子,进一步确定细胞光老化衰老的机制。结果显示:模型组和空白组相比,一定量的UVB照射确实会引起炎症细胞因子增多,模型组细胞上清液中IL-6和TNF-α的含量显著多于空白组;与模型组相比,药物组细胞上清液中的IL-6和TNF-α随着浓度的增大而逐渐减少,说明单体确实能减少炎症细胞因子IL-6和TNF-α的释放,这可能是单体起抗光老化衰老的作用的第一步。通过减少炎症细胞因子的释放量来阻碍其基因蛋白的表达而起到抗衰老作用.
关键词: 红景天 ；分离 ；纯化 ；抗肿瘤 ；抗氧化 ；抗衰老
被引量
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摘要： 人参叶为五加科人参属植物人参（Panax ginseng C.A.Mey.）的干燥叶,具有补气、益肺、祛暑、生津的功效。人参叶中有效成分与珍贵中药材人参根茎相似,也是人参皂苷。人参皂苷具有延缓衰老、抗肿瘤、抗氧化、保护神经系统等药理作用,广为国内外医药领域所关注。
人参叶不仅作为药材自1995版中国药典开始被历届中国药典所收载,也是卫生部2002年发布的114种“可用于保健食品的物品名单”内的品种,人参叶可用于生产保健食品及中药新药,而且与人参相比,具有价格低廉,资源丰富的优点。自上世纪七十年代起,人们从人参叶中已经分离并鉴定出近百种人参皂苷,直到目前仍有新的人参皂苷从人参叶中被发现。但是关于人参叶中高极性微量人参皂苷的研究至今仍鲜见报道,这可能与高极性微量人参皂苷分离难度较大有关。本文研究了人参叶中的高极性微量人参皂苷,包括提取分离、结构鉴定、含量测定以及生物活性等研究内容,可以有效填补该方面的研究空缺,丰富人参皂苷的种类和数目。本文的创新性在于分离出了人参叶中高极性的新化合物、新天然产物和首分化合物并探讨了它们的生物活性,为后续相关研究提供了物质基础。
首先,本文对干燥人参叶进行了提取分离,从人参叶乙醇提取物中得到7种皂苷类化合物,并利用波谱学手段和理化性质分析鉴定了其化学结构。其中1个为新化合物,1个为新天然产物,1个为首分化合物,其余4个皆为已知化合物。新化合物为3-O-[β-D-吡喃葡萄糖基-（1→2）-β-D-吡喃葡萄糖基]-20-O-[β-D-吡喃木糖基-（1→2）-β-D-吡喃葡萄糖基-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖基]-达玛-24-烯-3β,12β,20S-三醇（rs-x）,命名为人参皂苷Ra10;新的天然产物为6-O-β-D-吡喃葡萄糖基-20-O-β-D-吡喃葡萄糖基-达玛-25-烯-3β,6α,12β,20S,24ξ-五醇（ZB5）;首次从人参叶种分离得到的化合物为6-O-[α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）-β-D-吡喃葡萄糖基]-20-O-β-D-吡喃葡萄糖基-达玛-25-烯-24-酮-3β,6α,12β,20S-四醇（ZB3）;其余已知化合物分别为6-O-[α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）-β-D-吡喃葡萄糖基]-20-O-β-D-吡喃葡萄糖基-达玛-25-烯-3β,6α,12β,20S,24ξ-五醇（ZB1）、珠子参皂苷F6（ZB2）、越南人参皂苷R15（ZB6）和人参皂苷Ia（RF-X）。
其次,在上述化学成分研究的基础上,本文建立了人参叶中珠子参皂苷F6的固相萃取-高效液相色谱仪（SPE-HPLC）的含量测定方法。首先,本文确定了最优的提取条件和SPE条件:即以80%乙醇溶液为提取溶剂,以25倍液料比（V/W,g/m L）加热回流提取2次,提取时间分别为2 h、1 h。用5 g的LK1300S大孔吸附树脂填装SPE小柱,以30 m L 0.2%Na OH溶液淋洗,水洗至中性,再以45 m L85%乙醇溶液解吸。随后,本文进行了方法学考察,结果表明,珠子参皂苷F6的色谱峰面积（S）和进样量（m）,在进样质量为0.403～20.147μg范围内,呈现出良好的线性关系,具有良好的精密度、重复性、稳定性和加样回收率,能够对人参叶中的珠子参皂苷F6的含量进行准确测定。含量测定结果表明,珠子参皂苷F6在人参叶中的含量为0.412 mg·g-1。
最后,本文对分离得到的微量人参皂苷（ZB1、ZB2、ZB3、ZB5、ZB6、RF-X）以及几种常见人参皂苷（人参皂苷Rg1、Rb1、F1、F2、Rd、Re）作为对比,研究了酪氨酸酶活性抑制作用和DPPH自由基清除作用,以检测其美白功效和抗氧化活性。结果表明,人参叶中的微量人参皂苷具有一定的抑制酪氨酸酶活性和清除DPPH自由基活性。通过构效关系分析,可推测人参皂苷的母核结构可能对其抑制酪氨酸酶酶活性有一定的影响,而人参皂苷元侧链上的羰基和羟基的存在可能会提高其抗氧化性。
综上所述,本文从人参叶中共分离鉴定了7种高极性微量人参皂苷类成分,其中包括1个新化合物,1个新天然产物,1个首次从人参叶中分得的化合物;同时建立了人参叶中微量人参皂苷的含量测定方法;首次考察了几种微量人参皂苷的美白活性和抗氧化活性。本文的研究成果不仅丰富了人参叶中人参皂苷类化学成分的种类,而且也为完善人参叶质量标准及拓展人参叶新的医药用途提供了新的研究成果。
关键词: 人参叶 ；人参皂苷 ；结构鉴定 ；含量测定 ；美白活性 ；抗氧化活性
被引量
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摘要： Withania coagulans(Stocks)Dunal(印度凝乳植物、印度人参或巴基斯坦药草)是南亚常用的药用植物,具有多种应用,如净化血液、消除肌肉萎缩、预防儿童发育迟缓、管理失眠和疲惫以及治疗肝功能衰竭和糖尿病等,同时该植物也用于乳制品的凝乳工艺。随着越来越多的生物活性证据支持其治疗价值,W.coagulans受到了极大关注。目前已对W.coagulans不同部位的化学成分进行了研究,并且已经鉴定出不同的的生物活性化合物,例如甾体内酯withanolides。传统用法和现代研究显示,W.coagulans具有抗氧化、抗炎症、免疫调节、抗菌、抗癌、抗糖尿病、抗高血脂、神经保护、心脏保护、肾保护、保肝、生殖系统调节等不同活性。为进一步探讨W.coagulans对糖尿病、高脂血症、氧化应激、肝脏定向障碍和肾脏损伤的药理学意义,本文首先制备了W.coagulans果实的三种提取物,即常温乙醇提取物、热乙醇提取物和热水提取物,并分析了其总酚类和类黄酮含量。然后通过DPPH方法分析证明了其抗氧化活性,其中热乙醇提取物在三种提取物中抗氧化活性最显着。为了探讨其抗糖尿病、降血脂、保肝和护肾特性,本文进一步测定了W.coagulans提取物对大鼠体重、空腹血糖水平、血脂、肝功能(丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、碱性磷酸酶、总蛋白、总胆红素、白蛋白和球蛋白)和肾功能(肌酐、尿素和血尿素氮)等指标的影响,发现具有较好的保护作用。本文还观察到W.coagulans提取物能在健康范围内维持大鼠体重。为了分析数据,使用了SPSS,p值<0.05被视为显着值。此外,还检测了与使用W.coagulans相关的潜在安全问题。综上所述,W.coagulans果实常温乙醇提取物、热乙醇提取物和热水提取物在糖尿病、降血脂等方面都具有治疗潜力,其中热乙醇提取物效果最好。
关键词: Withania coagulans ；甾体内酯 ；茄内酯 ；糖尿病 ；高脂血症
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