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摘要： 目的:采用Meta分析方法评价益生菌防治化疗相关性腹泻(CID)的安全性、有效性,以及对肠黏膜屏障的保护、修复作用。方法:计算机检索Cochrane Library、Pub Med、Embase、CNKI、VIP、Wan Fang Data,检索时限均为建库至2017年8月31日,全面查找收集益生菌预防和治疗化疗相关性腹泻的随机对照试验(RCTs),提取资料并根据Cochrane工作手册5.0.1版本推荐的"偏倚风险评估"工具对纳入的研究进行偏倚风险评价,采用Stata 12统计软件进行Meta分析。结果:共纳入20个RCTs,包括1 727例患者。Meta分析结果显示,与仅给予常规支持/对症治疗的对照组比较,使用益生菌联合常规支持/对症治疗可以降低CID的总发生率[OR=0.26,95%CI(0.19,0.35),P<0.000 1]和Ⅲ级以上严重CID发生率[OR=0.28,95%CI(0.16,0.52),P<0.000 1],提高治疗CID患者的总有效率[OR=4.25,95%CI(2.78,6.48),P<0.000 1]和显效率[OR=2.16,95%CI(1.60,2.91),P<0.000 1],减少腹泻天数[SMD=-3.57,95%CI(-5.85,-1.29),P=0.002],降低患者血清内毒素[SMD=-0.95,95%CI(-1.21,-0.68),P<0.000 1]、二胺氧化酶[SMD=-1.52,95%CI(-2.73,-0.31),P<0.000 1]、D-乳酸[SMD=-1.92,95%CI(-2.29,-1.55),P<0.000 1]和肿瘤坏死因子-α[SMD=-1.13,95%CI(-1.55,-0.70),P<0.000 1]。结论:化疗前使用益生菌制剂可以有效减少癌症患者CID的发生率;在已发生CID患者的治疗中,辅助使用益生菌制剂可以提高CID治疗的效果,同时可以降低肠黏膜通透性,保护和修复肠黏膜的屏障作用。受纳入研究数量和质量的限制,上述结论尚待更多高质量研究予以验证。
关键词: 益生菌 ；化疗相关性腹泻 ；预防 ；治疗 ；Meta分析
被引量
12
摘要： 目的:系统评价益生菌辅助防治化疗相关性腹泻(CID)的有效性,为临床提供循证参考。方法:计算机检索EMBase、Cochrane图书馆、Pub Med、中国期刊全文数据库、中文科技期刊数据库、万方数据库和中国生物医学文献数据库,收集益生菌辅助防治CID的随机对照试验(RCT),提取资料并根据Cochrane Hand book 5.0推荐的"风险偏倚评估"工具评价质量,采用Rev Man5.2统计软件进行Meta分析。结果:最终纳入10项RCT,共871例患者。Meta分析结果显示,在常规对症治疗的基础上加用益生菌可以显著降低肿瘤患者总腹泻率[OR=0.31,95%CI(0.20,0.49),P<0.001]和Ⅲ~Ⅳ级腹泻率[OR=0.09,95%CI(0.03,0.24),P<0.001],提高总有效率[OR=4.16,95%CI(2.40,7.23),P<0.001]和完全缓解率[OR=2.55,95%CI(1.66,3.90),P<0.001],差异均有统计学意义;但对患者Ⅰ~Ⅱ级腹泻率[OR=0.86,95%CI(0.48,1.56),P=0.62]和部分缓解率[OR=1.00,95%CI(0.67,1.50),P=1.00]影响不大,差异均无统计学意义。结论:化疗前使用益生菌可有效预防肿瘤患者严重CID的发生;在治疗CID中,联用益生菌亦可以提高常规对症治疗的疗效。
关键词: 化疗相关性腹泻 ；益生菌 ；系统评价 ；Meta分析 ；随机对照试验
被引量
11
摘要： 目的：系统评价奥曲肽防治放化疗相关性腹泻的有效性和安全性。方法：采用计算机检索Cochrane Library、美国Clinical Trials数据库、Pub Med、EMBase、Science Direct、中国期刊全文数据库（Chinese Journal Full-text Database,CJFD）、中国生物医学文献数据库（Chinese Bio Medical Literature Database,CBM）和万方数据库,同时结合人工检索,检索时间为建库起至2015年3月。由2位评价员根据纳入/排除标准分别对文献进行筛选,提取文献资料,评价方法学质量。应用Rev Man5.2.5软件进行Meta分析。结果：纳入7项随机对照试验,共包含625例患者。在预防放化疗相关性腹泻方面,奥曲肽与安慰剂的差异无统计学意义[比值比为0.95（95%可信区间：0.65～1.39）;P=0.80]。在治疗放化疗相关性腹泻方面,奥曲肽明显优于洛哌丁胺[比值比为6.53（95%可信区间：3.03～14.09）;P〈0.000 01],说明奥曲肽治疗放化疗腹泻的效果更好。其中,在治疗化疗相关性腹泻[比值比为11.10（95%可信区间：3.52～34.98）;P〈0.000 1]、预防化疗相关性腹泻[比值比为1.15（95%可信区间：0.52～2.55）;P〉0.05]、治疗放疗相关性腹泻[比值比为3.78（95%可信区间：1.28～11.18）;P〈0.05]及预防放疗相关性腹泻[比值比为0.90（95%可信区间：0.58～1.39）;P=0.63]方面,奥曲肽的治疗效应均优于预防效应。奥曲肽的不良反应主要包括恶心、呕吐、注射部位局部疼痛及腹部轻度疼痛等。本次Meta分析纳入的研究均无患者因出现严重不良反应而影响治疗的报道。结论：奥曲肽治疗放化疗相关性腹泻疗效显著,但预防作用并不明显,与化疗还是放疗无关,且安全性较好。
关键词: 奥曲肽 ；药物疗法 ；放射疗法 ；腹泻 ；Meta分析
被引量
10
摘要： 目的 通过对数据的整合、聚类、分析了解2009—2018年国内对于化疗相关性腹泻的研究热点及发展趋势,为以后化疗相关性腹泻的研究提供参考。方法通过检索万方数据库、中国知网获得国内近10年对于化疗相关性研究的文献,运用数目信息共现挖掘(bicomb)系统等对数据进行统计分析和聚类。结果共纳入文献155篇,获取高频词23个,前7名分别为“奥曲肽”、“伊立替康”、“护理”、“结直肠癌”、“益生菌”、“治疗”和“氟尿嘧啶”;得到聚类效果最佳的3个类别,分别是肠道疾病与化疗相关性腹泻的相关性研究、对化疗相关性腹泻的病因探讨及防治、中医治疗化疗相关性腹泻的临床研究。结论国内研究人员对于化疗相关性腹泻的关注度较高,研究多集中在病因和治疗方法的探讨,研究方法包括Meta分析、临床试验和回顾性分析,中医疗法成为化疗相关性腹泻研究的一个热点。
关键词: 化疗相关性腹泻 ；聚类分析 ；计量分析
被引量
8
摘要： 目的系统评价中医外治法防治化疗相关性腹泻(CID)的有效性和安全性,为临床治疗提供循证依据。方法计算机检索Cochrane Library、PubMed、Embase、CNKI、万方、维普数据库2012年1月1日至2022年12月31日关于中医外治法防治CID的随机对照试验。使用NoteExpress软件管理文献,选用Cochrane手册5.4.0推荐的RCT偏倚风险评估方法进行文献质量评价,使用RevMan5.4.1软件进行Meta分析和敏感性分析。结果共纳入24项研究,偏倚风险等级均为B级。Meta分析显示,中医外治组CID治疗有效率高于对照组(RR 1.40,95%CI 1.31~1.51,P<0.00001)。中医外治组CID发生率低于对照组(RR 0.50,95%CI 0.39~0.64,P<0.00001)。敏感性分析结果均显示Meta分析结果稳定。中医外治组和对照组1级、2级、木3级CID发生率对比无差异(1级RR 0.89,95%CI 0.63~1.25,P=0.50;2级RR 0.77,95%CI 0.48~1.24,P=0.28;3级RR 0.84,95%CI 0.39~1.82,P=0.66);中医外治组4级CID发生率低于对照组(RR 0.36,95%CI 0.14~0.93,P=0.03);中医外治组和对照组对CID整体发生程度的影响对比无差异(RR 0.78,95%CI 0.61~1.01,P=0.37)。中医外治组的卡氏(KPS)功能状态评分高于对照组(RR 5.65,95%CI 1.61~9.68,P=0.006)。中医外治组的Karnofsky评分稳定率高于对照组(RR 2.51,95%CI 1.09~5.75,P=0.03)。结论中医外治法可有效防治CID的发生。
关键词: 中医外治法 ；化疗相关性腹泻 ；随机对照试验 ；Meta分析
被引量
4
摘要： 目的:探讨康复新液联合益生菌对化疗相关性腹泻(CID)的防治作用。方法:选择2017年1月—2018年12月行化疗的CID患者84例,随机分为观察组和对照组,每组42例。两组患者均给予含伊立替康方案化疗,化疗期间给予护肝、止吐、胃黏膜保护、维持水电解质平衡和预防感染等对症支持治疗。对照组在上述治疗基础上给予双歧杆菌四联活菌片治疗,观察组则在上述治疗基础上给予双歧杆菌四联活菌片联合康复新液治疗。比较两组患者的腹泻发生情况、CID分级和卡氏(KPS)功能状态评分。结果:观察组腹泻发生率及用药后2级、3级腹泻率明显低于对照组,用药后2周KPS评分明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:康复新液联合益生菌治疗CID临床效果显著,能有效缓解患者的腹泻程度。
关键词: 康复新液 ；益生菌 ；化疗相关性腹泻
被引量
4
摘要： 目的:评价谷氨酰胺预防胃癌及结直肠癌化疗相关性腹泻的效果。方法:计算机检索Cochrane图书馆(1970年1月-2018年3月)、Pubmed(1966年1月-2018年3月)、EMBASE(1966年1月-2018年3月)和中国生物医学文献资料库(1978年1月-2018年3月)、万方医学(1978年1月-2018年3月)中收录的文献资料,查找谷氨酰胺预防胃癌及结直肠癌化疗相关性腹泻的随机对照试验。由2名研究者独立选择试验、提取资料和评估方法学质量,采用Cochrane图书馆提供的Rev Man 5.3软件进行统计学分析。结果:共有6篇文献入选,其中英文文献2篇、中文文献4篇,入选患者总例数为425例。Meta分析结果显示,与对照组相比,使用谷氨酰胺可以预防胃癌及结直肠癌化疗相关性腹泻(RR=0.46,P=0.00),且亚组分析结果显示,与对照组相比口服或静脉注射谷氨酰胺给药方式均可预防化疗相关性腹泻(RR=0.53,P=0.04;RR=0.38,P=0.01)。根据血浆D-乳酸检测结果显示,化疗后谷氨酰胺组的血浆D-乳酸显著低于对照组,差异有统计学意义(RR=-0.34,P=0.00)。结论:谷氨酰胺可以通过保护肠黏膜屏障的完整性起到预防胃癌及结直肠癌患者化疗相关性腹泻的作用。
关键词: 谷氨酰胺 ；化疗 ；腹泻 ；胃癌 ；结直肠癌
被引量
6
摘要： 化疗相关性腹泻（chemotherapy—induced diarrhea，CID）是癌症治疗的常见不良反应，其程度和发生率因癌症类型及化疗方案不同而有所差异，其中以含氟尿嘧啶类药物和依立替康的方案为甚，可引发广泛腹泻、发生率高达50％～80％。CID可导致水电解质丢失、营养不良、脱水等，严重者需住院治疗，所有这些都会引发心血管问题和死亡。
关键词: 化疗相关性腹泻 ；临床现状 ；益生菌 ；diarrhea ；氟尿嘧啶类药物 ；防治 ；常见不良反应 ；癌症类型
被引量
10
摘要： 目的评价益生菌预防放化疗相关性腹泻的效果。方法计算机检索Cochrane图书馆、PubMed、EMbase、中国维普数据库、中国知网数据库、万方数据库等数据库中关于益生菌预防放化疗相关性腹泻的随机对照试验文献,检索时限为各数据库建库至2016年6月,对纳入文献进行质量评价和数据提取,采用Rev Man 5.3软件进行Meta分析,并进行敏感性分析,用漏斗图分析发表偏倚。按照纳入标准和剔除标准,共纳入11篇文献1553例病例进行Meta分析。结果与对照组相比,益生菌减少腹泻总发生率[OR=0.43,95%CI(0.31,0.61),P<0.00001];严重腹泻发生率明显降低[OR=0.27,95%CI(0.13,0.59),P=0.0009]。此外,益生菌减少止泻药物的使用[OR=0.31,95%CI(0.10,0.97),P=0.04]。敏感性分析显示评价结果稳定,漏斗图图形不对称,考虑存在发表性偏倚。结论益生菌预防放化疗相关性腹泻的发生率疗效显著,尤其预防严重放化疗相关性腹泻的发生。由于纳入研究质量差异大,因此有必要进行大样本、多中心、随机、双盲的对照试验,以进一步证实其临床疗效。
关键词: 益生菌 ；放化疗相关性腹泻 ；Meta分析
被引量
2
【会议论文】 •
+1位作者
会议时间： 2013-05-22
摘要： 抗生素相关性腹泻(Antibiotic-associated diarrhea,AAD)是指伴随抗生素使用而发生的无法用其他原因解释的腹泻,发生率约5％～39％。研究发现严重的AAD会导致患者病情加重甚至死亡。随着抗生素的广泛使用,AAD日益受到关注。目前认为AAD的主要机制是抗生素破坏了肠道正常细菌而导致菌群结构失调。益生菌是一类对宿主有益的活性微生物,能够维持人体肠道正常菌群,大量研究发现乳酸菌、双歧杆菌、布拉酵母菌等益生菌有助于AAD的防治。乳酸菌是国际公认的最安全、最具代表性的肠道益生菌,大量RCT研究表明多种乳酸菌具有降低AAD发生风险的作用,最新的Meta分析亦进一步证实乳酸菌无论单独使用还是与其他益生菌联合使用均可有效地防治AAD,但是上述研究多为小样本量试验,亦有部分研究得到相反的结果。另外,由于不同抗生素所导致的肠道菌群谱改变不一样以及乳酸菌的菌种特异性,不同的乳酸菌对AAD的防治效果也不尽一致。近年来,随着研究的不断深入,乳酸菌的不良反应也逐渐被人们所认识,有研究指出在宿主免疫力低下的情况下其可能导致严重的菌血症和败血症。因此,今后尚需要设计更多大样本的RCT以进一步确认益生菌对AAD的防治效果;筛选更多能特异性防治某种抗生素所引起AAD的乳酸菌。此外,在研究乳酸菌健康功效的同时还需要关注其可能带来的不良反应。
关键词: 抗生素相关性腹泻 ；益生菌 ；乳酸菌
【会议论文】 • 郑跃杰
会议名称： 第四届国际人体微生态大会、第十三届中华预防医学会微生态学学术会议、第五届中国医师协会感染科医师大会暨传染病诊治高峰论坛、2013医学前沿论坛暨我国感染病学发展战略研究研讨会
会议时间： 2013-09-12
摘要： 目的:抗菌药物对人体的短期影响,包括引起抗生素相关性腹泻、诱导和筛选耐药菌株和药物本身的毒副作用,已经得到广泛的认识,但在生命早期(婴儿)使用抗菌药物对人体的长期影响远远没有受到关注.方法:综述近年来在婴儿期使用抗菌药物与以后一些疾病发生相关的流行病学调查,包括回顾性研究和出生以后的前瞻性队列研究;综述2篇关于婴儿期使用抗菌药物与以后发生哮喘的META分析;综述近年来抗菌药物对正常菌群和宿主免疫功能的影响的实验室研究结果.结果:大多数回顾性研究和出生以后的前瞻性队列研究表明，1岁以内婴儿使用抗菌药物明显增加以后(5-6岁)患过敏性疾病包括哮喘的风险，但也有阴性结果的报道。2项META分析显示，早期使用抗菌药物是以后患哮喘的高危因素，并且随着使用次数的增加，风险增加。1项研究提示，早期使用抗菌药物可以增加日后儿童患炎症性肠病的风险。关于抗菌药物通过改变肠道菌群，进一步改变机体免疫应答，特别是勃膜免疫反应的实验研究文献近年来增多，日益受到重视，包括许多抗菌药物能够降低肠道对外来侵入菌的定植抗力、降低Toll样受体(TLR2和TLR4)表达、降低再生胰岛衍生蛋白3y(REG3y)表达、降低勤膜T调节性细胞和TH17细胞数量，增加IgE和嗜碱性细胞等。小鼠实验则证实早期使用抗菌药物可以诱导或加重卵白蛋白(OVA)引起的气道过敏性炎症，在使用抗菌药物的同时加用益生菌可以纠正由抗菌药物引起的菌群及免疫异常。结论:生命早期使用抗菌药物可能通过改变机体钻膜免疫应答模式，增加过敏性疾病和慢性肠道炎症性疾病的风险，益生菌药物可能成为将来潜在的纠正这一异常的选择。这在目前广泛使用抗菌药物特别是婴幼儿具有长远的意义。
关键词: 抗菌药物 ；婴幼儿患者 ；免疫功能 ；流行病学调查
摘要： 猪感染致泻性大肠杆菌（Diarrhoeal Escherichia coli,DEC）后会导致猪水肿病（ED）、初生仔猪腹泻（ND）和断奶仔猪腹泻（PWD）,表现为局部或全身炎症症状、严重腹泻,甚至败血症。仔猪腹泻会导致仔猪大量死亡,造成重大经济损失。近年来该病发生趋向于急性型,而临床上药物防治效果却极为不佳。抗生素类药物的广泛使用,使猪源大肠杆菌耐药性增强,耐药种类增多,使大肠杆菌引起的仔猪腹泻的防治工作变得极为困难,严重制约生猪养殖业健康发展。当前大量研究表明,诸多中药及微生态制剂对大肠杆菌病有一定的治疗效果,利用微生物发酵中药具有提高有效成分含量、增强疗效、调节动物肠道菌群等优势。因此研制益生菌发酵中药是防治DEC导致的仔猪腹泻的有效途径之一。本项目在前人的总结和实践基础上,对微生态制剂联合中药的应用进行深度挖掘,开发安全、有效、经济、质量可控的防治猪DEC性腹泻的发酵中药制剂。本项目通过益生菌来发酵复方中药（止泻古方葛根芩连汤合理中汤加减而成）,使用猪源的DEC来建立小鼠腹泻模型,探究发酵复方中药对猪源DEC所致小鼠腹泻的预防及治疗作用效果,为发酵中药防治DEC所致仔猪腹泻的临床应用提供科学数据支持。具体内容及结果如下:1.首先对全球猪致病性大肠杆菌（ETEC、STEC）的流行率进行了Meta分析。在CNKI、Science Direct、Web of Science和Pub Med4个数据库中检索到相关研究626篇,经筛选23篇纳入研究,提取相关风险因素信息后,采用Cochran-Q检验、I2检验和χ2检验计算研究的异质性,单变量回归分析来验证异质性的潜在来源和不同风险因素对猪大肠杆菌病流行率的影响。结果显示,全球猪大肠杆菌病的流行率为13.31%,且2016年后有增加的趋势,主要是由产肠毒素大肠杆菌（ETEC）引发。2.对发酵用益生菌进行筛选。通过对3株乳酸菌、6株芽孢杆菌和6株酵母菌进行酸、胆盐、人工胃肠液的耐受性检测以及产纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶的产酶能力检测来筛选发酵用菌。结果显示,发酵乳杆菌RF1（产纤维素酶）、酿酒酵母N3（产淀粉酶）、枯草芽孢杆菌YK（产淀粉酶和蛋白酶）具有较强的产酶能力和耐受性;地衣芽孢杆菌YD虽然耐受能力较弱,但其产淀粉酶和蛋白酶的能力较强。因此选择RF1、N3、YK和YD作为发酵菌种。3.对益生菌发酵复方中药的发酵条件进行摸索及优化。本研究选用的中药组方是根据治疗腹泻的核心方剂“葛根芩连汤”合“理中汤”加减而成。利用筛选出的益生菌对复方中药进行发酵,以综合发酵后的p H值、每克发酵复方中药的活菌数、每克发酵复方中药的黄酮含量和多糖含量的评分为评价标准,通过单因素试验对氮源添加量、碳源添加量、含水量、接菌量、发酵时间及发酵温度的6个发酵条件进行摸索,并通过正交试验对单因素试验得出的最佳含水量、最佳接菌量、最佳发酵时间和最佳发酵温度进一步优化,得出最佳发酵条件。结果显示,最佳发酵条件是在20%氮源添加量、3%接菌量、40%含水量及35℃条件下发酵2天。4.考察发酵复方中药对猪源DEC所致小鼠腹泻的作用效果。通过给小鼠腹腔注射不同剂量的猪源DEC建立腹泻模型,设立空白组、模型组、氟苯尼考组、未发酵中药组（62.5 mg/m L）、发酵复方中药的高剂量组（125 mg/m L）、中剂量组（62.5 mg/m L）、低剂量组（31.25 mg/m L）,探究不同剂量的发酵复方中药对猪源大肠杆菌所致小鼠腹泻的治疗与预防效果。结果显示,给小鼠注射200μL浓度为1.0×10～8 CFU/m L的DEC后,攻毒小鼠出现明显的腹泻症状,腹泻率100%,死亡率20%,可以成功建立小鼠腹泻模型;高剂量的发酵复方中药给药3天后全部停止腹泻,且死亡率除空白组外最低（死亡1只）;高剂量的发酵复方中药治疗可以显著缓解大肠杆菌引起的小鼠肝脏和脾脏肿大,并且显著降低促炎细胞因子IL-1β、IL-6、IFN-γ和TNF-α的水平,显著提高抗炎细胞因子IL-4和IL-10的水平。因此发酵复方中药对猪源大肠杆菌引发的腹泻具有良好的治疗效果,但预防效果微弱。综上所述,本研究通过Meta分析统计了猪大肠杆菌病在全球的流行率为13.31%;建立并优化了益生菌发酵复方中药的固体发酵体系;成功构建猪源DEC所致腹泻小鼠腹泻模型,并发现发酵复方中药可以有效治疗大肠杆菌引起的小鼠腹泻,可以缓解小鼠大肠杆菌引起的肝脏和脾脏肿大,并通过降低促炎细胞因子（IL-1β、IL-6、IFN-γ和TNF-α）水平和提高抗炎细胞因子（IL-4、IL-10）水平来控制小鼠炎症水平。
关键词: 发酵 ；中药 ；益生菌 ；猪源大肠杆菌 ；腹泻
被引量
5
摘要： 目的:本文运用Meta分析的方法,评价中医药防治化疗相关性腹泻(Chemotherapy-induced diarrhea,CID)优势和有效性,为临床提供更有力的循证医学证据。方法:检索知网、维普、万方、CBM、Pubmed、Embase、Cochrane图书馆数据库建库以来至2019年12月的有关中医药防治化疗相关性腹泻的临床随机对照研究,提取相关资料并使用Cochrane偏倚风险评价工具对纳入文献进行质量评价,使用Review Manager 5.3对提取的相关结局指标数据进行Meta分析。数据结果:预防组共纳入18篇文献,Meta分析结果如下:CID发病率:OR=0.38,95%CI=[0.29,0.48],合并效应量检验Z=7.57,P<0.00001。CID发生时间,合并MD=1.18,95%CI=[-1.02,3.37],合并效应量检验,Z=1.05,P=0.29。CID持续时间,合并MD=-2.63,95%CI=[-3.38,-1.88],合并效应量检验Z=6.90,P<0.00001。治疗组共纳入文献31篇。Meta分析结果具体如下:CID有效率:OR=4.71,95%CI=[3.64,6.10],合并效应Z=11.75,P<0.00001。KPS评分:合并MD=4.40,95%CI=[3.16,5.63],合并效应量Z=6.99,P<0.00001。CID起效时间:合并MD=-0.78,95%CI=[-2.59,1.02],合并效应量检验,Z=0.85,P=0.39。结论:1.中医药可降低CID的发病率,起到预防作用。2.中医药治疗CID疗效显著,同时能改善患者生活质量。3.内治法的效果要优于外治法。
关键词: 中医药 ；化疗相关性腹泻 ；Meta分析
被引量
10
摘要： [研究背景与目的]背景:化疗性肠粘膜炎(CIM)是抗肿瘤治疗过程中常见的以腹泻、炎症为主要表现的药物剂量限制性毒性作用。临床上缺乏行之有效的手段,中医药在抗肿瘤过程中增效减毒。前期Meta分析提示化疗中使用中医药可有效提高化疗性腹泻(CID)的治疗效果和KPS评分,且安全性良好。乌梅丸是《伤寒论》治疗寒热错杂证的经典方,对溃疡性结肠炎、肠易激综合征等引起的炎性性腹泻疗效显著。课题组文献调研发现乌梅丸治疗化疗性肠粘膜炎临床疗效显著,且对化疗性肠粘膜炎具有缓解作用,但是具体作用机制尚不清楚。因此,阐明乌梅丸作用于化疗性肠粘膜炎的机制及环节,为防治化疗性肠粘膜炎提供新的靶点。现代医学越来越多的证据证实肠道菌群及其代谢产物在化疗性肠粘膜炎发病中扮演重要角色。Meta分析提示在化疗之前或期间应用益生菌制剂可以有效预防癌症患者发生化疗性腹泻。此外,联合益生菌治疗化疗性腹泻还可以提高治疗效果,安全性良好。因此,本课题的目的旨在:1.使用网络药理学确定乌梅丸潜在的靶标和作用机制,为后期实验研究提供理论依据。2.从整体动物实验水平上,探索乌梅丸干预化疗性肠粘膜炎的具体作用机制。一方面为乌梅丸的临床应用和二次开发提供理论依据,为临床CIM的新药发现和微生态制剂的开发奠定实验基础,具有可观的临床应用前景和科学意义。[研究方法]1、基于网络药理学探索乌梅丸治疗化疗性肠粘膜炎的作用机制从TCMSP数据库、TCM database@Taiwan和BATMAN数据库获得乌梅丸的相关活性化合物,并通过Uniprot收集了这些化合物的潜在靶标。然后通过GeneCards和OMIM数据库构建CIM靶基因数据库。筛选出交集基因,构建了蛋白互作网络(PPI),并通过拓扑参数筛选hub靶点。并进行GO功能和KEGG通路富集分析。2、乌梅丸对化疗性肠粘膜炎的缓解作用及机制研究本研究选取Balb/C小鼠,予5-Fu(40mg/kg)腹腔注射连续5天建立CIM小鼠模型,乌梅丸连续灌胃10天,通过观察小鼠体重、摄食量、腹泻程度以及结肠长度,HE染色,检测炎症细胞因子(IL-1β、MPO、IL-6、TNF-α)水平和炎症信号通路TLR4/Myd88/NF-κB蛋白的表达,评估乌梅丸对CIM的药效;进一步检测肠道渗漏、黏液层厚度和粘蛋白Mucin-2、紧密连接蛋白(ZO-1、Claudin-1、E-cadherin)的表达以评估乌梅丸对肠粘膜屏障的保护作用;最后使用16s rDNA手段检测乌梅丸对肠道剧菌群组成和丰度的影响,以及使用质谱仪(MS)检测小鼠粪便中短链脂肪酸的含量,评估乌梅丸对肠道菌群代谢产物的影响。最后通过反向粪菌移植实验,将22650mg/kg乌梅丸组小鼠的粪便菌群给5-Fu组小鼠,观察粪菌移植对5-Fu组小鼠肠粘膜验证、肠粘膜屏障和短链脂肪酸的影响。[结果]1、基于网络药理学探索乌梅丸治疗化疗性肠粘膜炎的作用机制筛选出乌梅丸的97种有效成分和205种靶标。DAVID富集分析结果显示,乌梅丸的51个GO项目(FDR<0.01)和20个通路(FDR<0.01).GO富集分析提示,在生物学功能方面,主要涉及细胞凋亡、免疫反应、增殖和炎症反应。在细胞成分(CC)方面,包括细胞外间隙、质膜外侧和细胞外区域;分子功能(MF)方面,主要涉及细胞因子活性、氧结合、生长因子活性和谷胱甘肽结合。KEGG富集分析提示主要信号通路有内分泌抵抗信号通路(hsa01522),HIF-1信号通路(hsa04066),趋化因子信号通路(hsa04062),Ras信号通路(hsa04014)MAPK信号通路(hsa04010),EGFR酪氨酸受体信号通路(hsa01521)、NF-κB信号通路(hsa04064)等,均与炎症、细胞增殖、凋亡相关,与GO富集分析相呼应。此外,WMP的 19 个中枢节点(JUN、IL6、MAPK8、AKT1、MAPK1、VEGFA、PTGS2、MMP9、IL1B、CXCL8、EGF、MYC、CASP3、EGFR、FOS、RELA、STAT1、CCND1 和 ESR1)被认为是治疗的潜在靶点。结合文献研究和网络药理学分析,我们认为NF-κB信号通路可能是乌梅丸作用于化疗性肠粘膜炎的潜在机制,后续将进行验证。2、乌梅丸对化疗性肠粘膜炎的缓解作用及机制研究乌梅丸能够显著逆转5-Fu引起的体重、摄食量降低、结肠缩短和病理损伤,降低5-Fu的腹泻评分和炎症细胞因子(IL-1β、MPO、IL-6、TNF-α)的水平,并进一步逆转TLR4/Myd88/NF-κB信号通路蛋白的高表达,以22650mg/kg乌梅丸组更为明显,从而缓解肠粘膜炎性损伤;进一步研究发现乌梅丸能够逆转5-Fu小鼠的肠道高渗漏,紧密连接蛋白(ZO-1、Claudin-1、E-cadherin)的降低,并增加粘膜层厚度和粘蛋白Mucin-2的分泌,从而保护肠粘膜屏障;最后肠道菌群结果显示,乌梅丸可以升高5-Fu组肠道菌群的组成和丰度,升高乳酸杆菌的丰度,降低拟杆菌的丰度,粪便SCFAs检测发现乌梅丸能够逆转5-Fu引起的SCFAs的降低,升高丁酸的含量。最后,粪菌移植实验结果表明粪菌移植可明显缓解小鼠肠粘膜炎症病理状态,修复肠道屏障损伤,同时促进5-Fu小鼠肠道短链脂肪酸的合成代谢,揭示乌梅丸能够通过改变肠道菌群组成从而影响短链脂肪酸的合成代谢,进而抑制结肠炎症的发生发展。[结论]1、基于网络药理学探索乌梅丸治疗化疗性肠粘膜炎的作用机制本研究为中药乌梅丸治疗CIM的临床应用提供了理论依据。且本研究充分说明了中药具有多化合物、多靶点、多途径的活性方剂的特点,这对中药方剂的药效研究具有重要意义。2、乌梅丸对化疗性肠粘膜炎的缓解作用及机制研究基于实验研究结果,我们发现11325mg/kg和22650mg/kg乌梅丸灌胃小鼠能够缓解5-Fu所诱导的肠粘膜炎症反应,以22650mg/kg乌梅丸的效果更佳。乌梅丸能够改变小鼠肠道菌群丰度和结结构,升高乳酸杆菌的丰度,从而升高SCFAs的合成代谢,修复肠道粘膜屏障,进而发挥对肠粘膜炎症的缓解作用。粪菌移植也证实了肠道菌群可能是乌梅丸治疗化疗性肠粘膜炎的机制。本研究从肠道菌群的角度阐述了乌梅丸治疗CIM的科学内涵,为乌梅丸的临床应用和二次开发提供理论依据。
关键词: 乌梅丸 ；化疗性肠粘膜炎 ；肠道菌群 ；屏障损伤 ；短链脂肪酸 ；粪菌移植
被引量
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摘要： 研究目的:观察加味参苓白术散联合益生菌对大肠癌化疗相关性腹泻的临床疗效和安全性,及对肠道菌群变化的影响,为化疗相关性腹泻的治疗提供新的思路和方法,以期改善大肠癌患者生活质量。研究方法:将符合研究标准并签署相关同意书的大肠癌化疗后出现腹泻的48例患者,随机分为治疗组和对照组,两组在基础治疗的同时,治疗组予口服加味参苓白术散和双歧杆菌三联活菌胶囊,对照组仅服用双歧杆菌三联活菌胶囊,共观察2周,治疗结束后分析比较两组患者中医证候积分、CID分级、肠道菌群数、KPS评分、安全性指标及相关不良反应,运用SPSS26.0版统计学软件进行统计分析得出结论。研究结果:1.中医单项证候:治疗后对两组患者中医单项证候进行比较,治疗组改善大便溏泄、头身困重、食欲不振、神疲乏力这四项证候优于对照组(P<0.05)。2.中医证候总积分:两组患者疗程结束后中医证候总积分较治疗前均有下降,有统计学差异(P<0.05),且治疗组改善中医证候效果更优(P<0.05)。3.中医证候疗效评价:治疗组有效率87.5%,对照组有效率66.7%,有统计学差异(P<0.05),加味参苓白术散联合益生菌治疗大肠癌化疗相关性腹泻中医证候疗效优于益生菌。4.CID分级疗效评价:治疗后第7天比较两组患者化疗相关性腹泻等级,治疗组有效率91.7%,对照组有效率75%,有统计学差异(P<0.05);疗程14天结束后两组有效率相等,有统计学差异(P<0.05);表明治疗组降低化疗相关性腹泻等级优于对照组。5.肠道菌群数:治疗组治疗后乳酸杆菌数、双歧杆菌数高于对照组,大肠杆菌、粪肠球菌数低于对照组,有统计学差异(P<0.05),治疗组调节肠道菌群优于对照组。6.KPS评分:治疗结束后对两组患者Karnofsky评分进行比较,有统计学差异(P<0.05),治疗组评分提高者多于对照组,治疗组改善患者功能状态效果更佳。7.安全性及不良反应:在治疗过程中,两组患者生命体征平稳,相关安全性指标无异常,未见明显不良反应,无毒副作用。研究结论:加味参苓白术散联合益生菌治疗大肠癌化疗相关性腹泻的临床疗效优于单独使用益生菌,可以降低化疗相关性腹泻等级,调节肠道菌群,改善大肠癌患者生活质量,值得推广应用。
关键词: 加味参苓白术散 ；益生菌 ；大肠癌 ；化疗相关性腹泻
被引量
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摘要： 第一章 中医药预防和治疗化疗相关性腹泻Meta分析
目的:系统回顾中医药预防和治疗化疗相关性腹泻（CID）的有效性、安全性及其可能机制,为后续研究调脾安肠方防治伊立替康迟发性腹泻的作用和机制提供理论基础。
方法:计算机检索中国生物医学文献数据库（CBM）、Cochrane对照试验中央注册系统、Pubmed、中国临床试验注册中心、中国知网、维普和万方数据库,查找截至2022年2月的中医药预防和治疗CID的随机对照试验研究（RCT）。采用Cochrane风险偏倚评估工具评价文献质量,一式两份提取试验数据,并评估偏倚的风险。采用Review Manager 5.3软件进行数据分析。
结果:最终纳入1 1项预防CID的RCT,13项治疗CID的RCT。Meta分析结果显示,中医药干预可以降低CID的发生率,缩短患者CID持续时间,提升治疗有效率,缩短治疗时间,提高患者生活质量,降低患者血清炎性因子水平,恢复患者肠道菌群和黏膜屏障稳态,且不会发生中药干预相关的不良反应。
结论:化疗过程中同时给予中医药可有效防治CID,且具有较好的安全性。补气、温阳和滋阴药常用于预防CID,补气、温阳和祛湿药常用于治疗CID。降低患者血清炎症因子水平、恢复患者肠道菌群和黏膜屏障稳态为其可能的作用机制。
第二章 调脾安肠方通过调节CT26荷瘤小鼠肠道菌群结构防治伊立替康迟发性腹泻的机制研究
目的:1.验证调脾安肠方对伊立替康迟发性腹泻的防治作用;2.探讨调脾安肠方对肠道炎症、肠黏膜屏障的影响作用;3.明确调节肠道菌群结构及其毒性代谢产物活性在调脾安肠方防治伊立替康迟发性腹泻中发挥重要作用;4.为临床应用调脾安肠方防治伊立替康迟发性腹泻提供科学证据。
方法:
1.将32只健康BALB/c雌性小鼠随机分为4组:调脾安肠方组;模型对照组;黄连素组;空白对照组。除空白对照组以外的3组制备CT26皮下荷瘤小鼠模型。
2.建立伊立替康迟发性腹泻小鼠模型,观察各组小鼠腹泻发生率、严重程度等疗效指标。
3.观察各组小鼠结肠黏膜病理切片上的组织形态学差异;ELISA法检测结肠组织中炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度;Western Blot法检测结肠紧密连接蛋白ZO-1、Occludin的表达水平。
4.分光光度法检测各组小鼠β-葡萄糖醛酸酶（β-G）活性;16srRNA高通量测序技术检测样本间、组间肠道菌群结构及分布差异。
结果:
1.体重变化趋势:空白对照组体重呈稳定上升趋势,实验第1至5天,其余3组小鼠体重也逐渐上升。第5天注射伊立替康后,调脾安肠方组、模型对照组和黄连素组逐渐出现体重下降,第10天均达到体重最低值,第1 1天体重开始恢复增长。从第8天开始,与模型对照组相比,空白对照组、调脾安肠方组及黄连素组小鼠体重水平持续较高,且差异具有统计学意义（P<0.05）。
2.腹泻发生率及腹泻评分:第5天首次腹腔注射伊立替康后24小时（第6天）,各组开始出现腹泻,表明伊立替康主要导致迟发性腹泻。模型对照组小鼠在第8天全部发生腹泻,而在整个实验过程调脾安肠方组中的2只小鼠及黄连素组的1只小鼠均未发生腹泻,这表明调脾安肠方及黄连素能伊立替康迟发性腹泻起到一定的预防作用,但其差异性不具有统计学意义（P>0.05）。各组腹泻程度在第9天达到峰值,此后逐渐缓解,其中第8-12天,调脾安肠方组及黄连素组的腹泻评分较模型对照组明显偏低（P<0.05）,表明调脾安肠方与黄连素均能降低伊立替康所致迟发性腹泻的严重程度。
3.抑瘤率:5-8天应用伊立替康后,各组肿瘤体积一定程度上有所下降,且作用持续至第11天,第14天各组肿瘤体积均增长。组间比较肿瘤体积并无显著差异（P>0.05）,表明调脾安肠方不具备抑瘤作用。
4.肠黏膜病理:空白对照组为基本正常肠组织;模型对照组肠黏膜损伤明显,可见大量炎细胞浸润、肠黏膜变薄及结构紊乱,肠隐窝变浅;调脾安肠方组主要是少量炎细胞浸润及黏膜息肉样结构形成,未见其它病变;黄连素组主要是多量炎细胞浸润,未见其它病变。总体来说,伊立替康使小鼠结肠组织病变最重,调脾安肠方及黄连素均能减轻伊立替康导致的肠黏膜损伤,其中调脾安肠方的抗炎效果稍优于黄连素。
5.结肠组织中炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β浓度:模型对照组与空白对照组相比,结肠组织中的致炎因子TNF-α、IL-6和IL-1β浓度明显升高（P<0.01）,这表明使用伊立替康可导致或加重炎症反应。调脾安肠方组、黄连素组与模型对照组比较,结肠组织中IL-1β、IL-6和TNF-α含量均显著降低,证明调脾安肠方及黄连素灌胃后小鼠肠道炎症反应得到明显缓解。
6.结肠组织紧密连接蛋白ZO-1、Occludin的表达水平:小鼠结肠组织中紧密连接蛋白ZO-1、Occludin在模型对照组的表达水平较空白对照组显著降低（P<0.01）,显示出伊立替康可以通过下调紧密连接蛋白的表达,使肠上皮细胞间缺少紧密连接,肠道通透性增加,致病菌及内毒素等物质入侵而导致腹泻发生。调脾安肠方相比于模型对照组,Occludin表达增加,差异具有统计学意义（P<0.001）,ZO-1表达亦增加,但差异不具有统计学意义,说明调脾安肠方对于紧密连接蛋白的表达具有一定的上调作用。黄连素组与模型对照组比较,两种紧密连接蛋白的表达水平均变化不明显（P>0.05）。观察各组小鼠结肠组织中Occludin、ZO-1蛋白电泳条带也可发现,空白对照组及调脾安肠方组的紧密连接蛋白表达水平最高,模型对照组表达水平最低。
7.粪便β-G活性:与空白对照组相比较,模型对照组β-G活性明显升高,差异存在统计学意义（P<0.01）,说明给予伊立替康后,小鼠粪便内β-G活性浓度升高。与模型对照组相比较,调脾安肠方组（P<0.001）及黄连素组（P<0.05）β-G活性显著降低,其中调脾安肠方组β-G活性低于黄连素组（P<0.01）,综上说明应用调脾安肠方或黄连素可降低β-G活性,且调脾安肠方的抑制作用更明显。
8.16s rRNA测序结果显示,注射伊立替康会导致小鼠肠道菌群物种丰度、均匀度及多样性下降,而调脾安肠方干预后,迟发性腹泻模型小鼠的肠道菌群在物种丰度、均匀度及多样性均得到逆转,趋近于正常小鼠,且在菌群物种组成上,调脾安肠方组与空白对照组相似,黄连素组与模型对照组相似。空白对照组及调脾安肠方组OTUs数量较多,其次为黄连素组,模型对照组数量最少。从门水平分析,各组拟杆菌门（Bacteroidetes）和厚壁菌门（Firmicutes）丰度均较高,厚壁菌门（Firmicutes）在伊立替康腹泻模型组丰度相对最低,而变形菌门（Proteobacteria）及疣微菌门（Verrucomicrobia）在模型对照组中丰度较高。属水平分析,乳杆菌属（Lactobacillus）在各组均有较高丰度,阿克曼氏菌属（Akkermansia）、拟杆菌属（Bacteroides）在伊立替康干预后丰度降低,调脾安肠方治疗后丰度上调至接近正常水平。各组OTUs相比,调脾安肠方使小鼠厚壁菌门（Firmicutes）、双歧杆菌目（Bifidobacteriales）、拟杆菌目（Bacteroidales）和乳杆菌目（Lactobacillales）菌群数量增加。伊立替康导致丹毒丝菌目（Erysipelotrichales）、梭菌目（Clostridiales）、疣微菌目（Verrucomicrobiales）、伯克氏菌目（Burkholderiales）、红蝽菌目（Coriobacteriales）数量上调。调脾安肠方组的标志物种包括双歧杆菌目（Bifidobacteriales）、双歧杆菌科（Bifidobacteriaceae）、双歧杆菌属（Bifidobacterium）及拟杆菌目（Bacteroidales）的S247科等。模型对照组的标志物种包括肠球菌科（Enterococcaceae）、肠球菌属（Enterococcus）、帕拉普氏菌科（Paraprevotellaceae）、普雷沃氏菌属（Prevotella）等。黄连素组的标志物种包括颤螺菌属（Oscillospira）、副拟杆菌属（Parabacteroides）、粪球菌属（Coprococcus）、瘤胃球菌属（Ruminococcus）和紫单胞菌科（Porphyromonadaceae）等。
结论:综上所述,调脾安肠方通过调节肠道菌群结构,对其毒性代谢产物、肠黏膜屏障及肠道炎症反应产生相应影响,达到防治伊立替康迟发性腹泻的效果。
关键词: 化疗相关性腹泻 ；随机对照试验 ；预防 ；治疗 ；中医药 ；肠道菌群 ；肠道屏障 ；紧密连接蛋白 ；调脾安肠方 ；炎症因子 ；伊立替康迟发性腹泻 ；β-葡萄糖醛酸酶
摘要： 目的 采用临床随机对照研究方法，观察口服合生元在大肠癌化疗患者治疗中，对缓解化疗相关毒副作用以及增强化疗效果的干预作用，并通过粪便16S-rDNA测序检测口服合生元患者的肠道菌群变化情况。 方法 (1)在同济大学附属第十人民医院胃肠外科和肿瘤内科招募术后行XELOX方案(奥沙利铂200mg静滴d1，卡培他滨2500mgbid口服d1-d14)化疗的大肠癌患者，经过严格的纳入和排除标准的筛选后，采用随机化数字表将患者随机分为合生元组和安慰剂组。所有入组患者签署知情同意书，合生元组口服含有4×109CFU/g活菌的合生元粉剂，餐后半小时温水泡开后服用，每日早晚各一包，从术后首次化疗的第一天开始，持续服用2个月。安慰剂组口服不含益生菌的安慰剂，安慰剂包装，颜色，形状及口感与合生元无差异，服用方法及服用时间与合生元组相同。留取患者首次化疗前一天，第二次化疗前一天(3周)，第四次化疗前一天(2个月)的粪便标本，并记录患者治疗前后的腹泻、食欲下降、恶心呕吐等化疗不适反应及感染、骨髓抑制、肿瘤指标、肝肾功能等临床指标，并进行对比分析。 (2)试验留取的所有粪便标本进行16SrDNA扩增测序，提取肠道菌群基因DNA,选择V3-V4区域进行测序，对粪便菌群进行鉴定和生物信息学分析。 结果 (1)合生元组和安慰剂组菌各纳入患者31例，合生元组有1例患者中途因故退出，30例患者接受完整随访，3周后留取粪便标本22人，2月后留取粪便标本21人，干预组患者4例因故退出试验，27例患者接受完整随访，3周后留取粪便患者21人，2月后留取粪便患者13人。与安慰剂组相比，合生元组在化疗相关性腹泻(CID)、食欲下降、恶心呕吐和肝功能损伤四项化疗相关副作用明显减轻(P＜0.05)，而在骨髓抑制，肿瘤标志物，感染指标等其他临床指标方面，两组无明显差异。治疗过程中，患者未出现与合生元相关不良反应。 (2)干预3周后，相比较安慰剂组，合生元组Aggregatibacter、Klebsiella和Megasphaera丰度较高，菌属Actinomyces、ClostridiumXVIII、ClostridiumXlVa、Coprobacillus、Solobacteriu、Erysipelotrichaceae_incertae_sedis和Delftia丰度较低。干预2个月后合生元组Erysipelotrichaceae_incertae_sedis、ClostridiumXlVb、Desulfovibrio、Paraprevotella、Rothia和Streptococcus菌属丰度较低。 结论 合生元在缓解化疗胃肠道粘膜毒副反应，包括腹泻，恶心呕吐，食欲下降方面有良好效果，而在肝肾功能损伤，骨髓抑制，肿瘤标志物，感染指标等其他临床指标方面，合生元无明显改善作用。菌群方面，相比较安慰剂组，合生元组化疗患者在服用合生元3周后及2个月后肠道Erysipelotrichaceae_incertae_sedis和ClostridiumXIV菌属丰度出现下降。
关键词: 大肠癌 ；合生元 ；肠道菌群 ；化疗相关性腹泻
摘要： 研究背景与目的: 化疗相关性腹泻(Chemotherapy-Induced Diarrhea,CID)是抗肿瘤治疗中的常见并发症之一,其发生不仅影响患者的治疗依从性,还对其生活质量和预后构成显著威胁。尤其在接受氟尿嘧啶(5-FU)和伊立替康等化疗药物治疗的患者中,腹泻的发生率较高,严重情况下可引发脱水、电解质紊乱以及免疫功能受损等全身性并发症。这种复杂的病理现象往往需要多方面的干预,但现有的治疗手段如洛哌丁胺、奥曲肽等多以对症处理为主,疗效局限且存在一定副作用。因此,寻找安全有效的新型治疗策略已成为当务之急。 CID的病理机制涉及化疗药物对肠道屏障的直接破坏和菌群平衡的紊乱。以5-FU为例,其通过抑制核酸合成影响快速增殖的细胞,不仅作用于肿瘤细胞,也会损害肠上皮细胞,导致杯状细胞减少、肠隐窝结构变性、肠道屏障功能受损,并伴随菌群失衡。肠道菌群中有益菌的减少与条件致病菌的增殖进一步加剧了肠道炎症和腹泻的发生。由于CID的病理机制复杂,传统的单一对症疗法难以满足临床需求。 近年来,益生菌因其在调节肠道菌群、增强肠道屏障功能及调控免疫反应方面的多重作用,被视为CID的潜在辅助治疗策略。其中,拟杆菌(Bacteroides)作为一类新兴的益生菌,以其独特的生物学特性引起了广泛关注。研究表明,拟杆菌能够调节菌群平衡、修复肠道屏障,并缓解化疗药物引起的肠道损伤。 然而,目前关于拟杆菌在CID中的具体作用机制仍处于探索阶段,特定菌株的安全性与有效性尚未得到系统验证,部分菌株的潜在毒性也对其临床应用构成一定限制。因此,筛选并优化具有良好抗CID活性的拟杆菌菌株具有重要的研究价值。本研究旨在评估拟杆菌在CID治疗中的潜力,重点聚焦于从健康人粪便中分离拟杆菌菌株,并通过动物模型筛选其抗CID活性,同时深入探讨其安全性和作用机制,以期为CID的微生态干预策略提供新的科学依据。 材料与方法: 1.拟杆菌菌株的分离与鉴定:招募健康志愿者收集粪便样本,并在严格的厌氧条件下进行无菌操作。样本经离心过滤后,在拟杆菌选择性培养基上进行分离,挑取单克隆菌落进行富集培养。随后,提取细菌DNA,并通过16S r RNA基因扩增鉴定菌株,确认其分类学地位。 2.拟杆菌菌株抗CID活性筛选:构建化疗相关性腹泻动物模型,通过评估体重下降百分比和腹泻评分,筛选出具有抗CID活性的拟杆菌菌株,以确定其在缓解CID中的潜在作用。 3.Bacteroides eggerthii(B.eggerthii)S13-F8的形态学特征及基因组功能解析:采用扫描电子显微镜(SEM)观察B.eggerthii S13-F8的形态学特征,揭示其细菌形态及表面结构。同时,利用高通量全基因组测序技术解析B.eggerthii S13-F8的基因组组成、基因功能及代谢潜力,并结合多种数据库对基因组进行功能注释,以深入挖掘潜在的功能基因及代谢通路。 4.B.eggerthii S13-F8体内药效学验证:利用小鼠CID模型对B.eggerthii S13-F8的抗CID活性进行验证。通过监测体重变化、腹泻评分、摄食量、血常规检测,以及测量小肠绒毛高度、隐窝深度和结肠组织病理学评分等指标,对其抗CID作用进行系统评估。 5.结肠组织转录组分析:从小鼠结肠组织中提取总RNA,检测质量后构建测序文库,并利用Hi Seq Nova Seq 6000平台进行高通量测序。采用RSEM软件量化基因表达水平,并使用DESeq2分析实验组间的差异表达基因(Differentially expressed genes,DEGs)(筛选标准:p<0.05,|log2FC|≥1)。随后,利用DAVID数据库对DEGs进行功能富集分析,识别显著富集的通路。 6.粪便宏基因组学分析:收集B.eggerthii S13-F8治疗结束后小鼠粪便样本进行宏基因组学分析(α多样性分析(Sobs,Ace,Chao指数)),主坐标分析(PCo A),物种与功能组成分析以及线性判别分析(Lef Se)。 结果: 1.从健康人粪便样本中成功分离并鉴定出8株拟杆菌菌株,分别为Bacteroides ovatus S13-B4、Bacteroides vulgatus S13-D4、Para Bacteroides distasonis S13-F4、Bacteroides dorei S4-A7、Bacteroides xylanisolvens S4-F11、Bacteroides nordii S3-A1、Bacteroides fragilis S12-A5和Bacteroides eggerthii S13-F8。 2.体内研究了6株拟杆菌菌株对5-FU诱导的CID的治疗效果。结果显示,B.eggerthii S13-F8菌株显著缓解了5-FU引起的体重减轻和腹泻。 3.B.eggerthii S13-F8为杆状细菌(长约2μm,宽约0.5μm),其基因组由一个4,202,411 bp的环状染色体和一个100,771 bp的质粒组成,总GC含量为45.18%。基因组包含3,666个蛋白编码基因、12个r RNA基因、64个t RNA基因和50个s RNA基因。基于16S r RNA序列比对,与B.eggerthii的相似性达99.67%。功能注释显示,其基因组富含与代谢、细胞结构及DNA修复相关的基因,并含两个次级代谢产物基因簇。 4.B.eggerthii S13-F8处理组显著缓解了5-FU诱导的小鼠体重下降,改善食欲,并减轻腹泻症状。血液分析显示,与模型组相比,B.eggerthii S13-F8组小鼠的白细胞及淋巴细胞计数显著升高。组织病理学分析进一步证实,B.eggerthii S13-F8处理改善了小鼠肠道组织结构损伤,包括小肠隐窝丢失、绒毛萎缩及炎症细胞浸润,同时恢复了绒毛高度/隐窝深度(V/C)比,并显著降低结肠组织的组织病理评分。B.eggerthii S13-F8组的肠道组织损伤和炎症程度均较模型组显著减轻。 5.结肠组织转录组分析表明,B.eggerthii S13-F8处理组与对照组和模型组存在显著差异。在模型组与对照组之间共识别出4,926个DEGs,而模型组与B.eggerthii S13-F8组之间仅检测到898个DEGs。其中308个DEGs在模型组中上调而在B.eggerthii S13-F8处理组中显著下调,有288个DEGs在模型组中显著下调而在B.eggerthii S13-F8组中显著上调。KEGG富集分析显示,这些基因主要参与细胞周期、IL-17信号通路和炎症相关通路。蛋白互作网络(PPI)分析确定了Cxcl1、Il-1α等五个核心基因,表明B.eggerthii S13-F8可能通过调控免疫炎症反应发挥作用。此外,B.eggerthii S13-F8处理显著下调促炎因子(如IL-1α、Ccl2)、趋化因子(如Cxcl10)及热休克蛋白基因(如Hspd1),恢复了黏蛋白(muc2)、水通道蛋白(Aqp8)及氯离子转运蛋白(Slc26a3)的表达。同时,下调炎症相关的Aurka和Aurkb基因,并上调抗氧化和抗炎基因Selenbp1和Selenbp2,表明其可能通过多靶点调节机制缓解CID。 6.宏基因组测序分析显示,与模型组相比,B.eggerthii S13-F8处理组显著提高了肠道菌群的α多样性和丰富度,并在β多样性上表现出更接近对照组的微生物群特征。Venn分析显示,B.eggerthii S13-F8组与对照组共享更多物种,表明其在恢复菌群多样性方面的作用。B.eggerthii S13-F8处理显著抑制了模型组中病原菌(如Escherichia、Salmonella和Pseudomonas aeruginosa)的丰度,同时促进了有益菌(如Akkermansiaceae和Lactobacillus)的生长。在门水平上,B.eggerthii S13-F8组恢复了Bacteroidota的丰度并显著降低了Pseudomonadota的比例。在科和属水平上,病原菌Enterobacteriaceae和Desulfovibrionaceae的丰度显著下降,而益生菌的比例明显增加。 结论: 1.成功分离并鉴定出8株拟杆菌菌株,其中B.eggerthii S13-F8为后续研究的重点菌株。 2.B.eggerthii S13-F8显著缓解了5-FU引起的小鼠体重减轻和腹泻,表现出良好的治疗效果。 3.B.eggerthii S13-F8基因组含3,666个蛋白编码基因,富含与代谢、细胞结构和DNA修复相关基因,具备较强的环境适应性。 4.B.eggerthii S13-F8显著减缓小鼠体重下降,改善食欲,修复肠道结构损伤,减轻炎症。 5.结肠转录组分析显示,B.eggerthii S13-F8下调了促炎因子,调控免疫和炎症通路,减轻5-FU诱导的腹泻。 6.B.eggerthii S13-F8处理显著改善肠道菌群多样性,抑制病原菌并促进有益菌生长,有助于恢复菌群平衡。
关键词: Bacteroides eggerthii ；益生菌 ；化疗性关性腹泻 ；肠道菌群
摘要： 目的:癌症的治疗主要以手术、放化疗、靶向药物、生物免疫疗法及中医中药等方法为主,其中化疗作为抗癌治疗的一项重要手段,一些肿瘤会得到不同程度的控制,延长病人生命,然而,化疗后出现的血液学毒性,胃肠道毒性,器官毒性损害,脱发,静脉炎以及与化疗相关的疲劳性等副反应,限制了化疗药物的使用,其中有研究表明化疗后出现的一部分的胃肠道毒性与肠道菌群紊乱有关。因此对接受化疗的恶性肿瘤患者肠道菌群的定量分析,有助于从微生态角度了解化疗药物对肠道菌群的影响程度,并为微生态调节剂用于预防、减轻及治疗化疗引起的肠道菌群紊乱、化疗相关性肠炎及化疗相关性腹泻(CID)等副作用提供依据。本研究选取双歧杆菌、大肠杆菌、梭杆菌三种具有代表性菌种,留取接受化疗的恶性肿瘤患者粪便,随机分成两组,一组单纯化疗的对照组,另一组化疗过程中给予双歧杆菌菌调药物的实验组,通过粪便培养对在化疗前后肠道中上述菌群的变化定量分析,以了解化疗患者肠道内双歧杆菌、大肠杆菌、梭杆菌的菌量变化,对照组与实验组比较,了解双歧杆菌、大肠杆菌、梭杆菌的菌量是否有变化,探讨化疗药物是否对肠道微生态造成破环,最终达到可否用微生态调节剂预防或减轻患者化疗过程中各种肠源性副反应的目的,从而保证化疗的顺利进行,提高治疗水平,延长患者生命。方法:1.分组:选择2015年01月-2016年10月解放军第210医院肿瘤科收治的115例Ⅳ期恶性肿瘤化疗患者,其中肺癌38例、胃癌16例、乳腺癌30例、食管癌5例、胰腺癌7例及大肠癌19例,化疗方案为IP、DP、DCF、XT、TXT、FOLFOX、FOLFIRI、XELOX方案,随机分为两组,56例作为实验组,59例对照组。实验组口服双歧三联活菌肠溶胶囊,以上选择对象入组前2周内均无抗生素应用史及除肿瘤外的其他胃肠疾病史,实验组及对照组不少于四周期化疗。2.标本:实验组及对照组取入组后第一周期化疗前、第四周期化疗前、第四周期化疗第7天和14天粪便标本,通过培养基改良和培养鉴定方法对留取的粪便进行肠道菌群定量分析。结果:通过检测四周期化疗过程中患者粪便标本中双歧杆菌、大肠杆菌、梭杆菌三种菌群的数量,我们发现对照组化疗三周期后肠道内双歧杆菌及大肠杆菌明显减少,梭杆菌数量增加;使用微生态制剂的实验组患者肠道菌群无明显变化,临床观察发现实验组腹泻、腹痛、便秘等消化道反应明显减轻,差异有统计学意义。结论:1.化疗药物抑制肠道正常菌群生长,加重肠道菌群失调。2.化疗期间给予益生菌制剂,有助于增强体内肠道菌群平衡,减轻肠道菌群失调程度,减轻消化道反应及肠道黏膜炎症。
关键词: 恶性肿瘤化疗 ；肠道菌群 ；粪便菌群培养
被引量
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摘要： 目的：
分析结直肠癌患者化疗相关性腹泻的临床特征及治疗疗效。
方法：
对入选的2013年1月至2014年1月在浙江大学医学院附属第一医院肿瘤内科经病理证实的60例结直肠癌患者资料进行回顾性分析,收集患者一般情况、体能状况、疾病分期、化疗方案、腹泻情况(开始时间、持续时间、次数、大便性状、实验室检查、伴随症状)、腹泻的治疗及其疗效评价、治疗后不良反应等信息,统计并分析不同化疗方案的腹泻发生率、腹泻发生时间的相关因素、不同治疗方案的腹泻缓解率、腹泻再发率、治疗后不良反应等。
结果：
FOLFIRI方案、FOLFOX方案、卡培他滨所致化疗相关性腹泻的发生率分别为50%、21.05%、19.23%,3-4级腹泻发生率分别为14.29%、7.89%、7.69%。伊立替康所致早发性腹泻发生率达4.55%。化疗相关性腹泻发生时间与患者性别、年龄无关(P>0.05),与患者体能状况有关(P<0.005,r=0.77),体能越差,评分越高,化疗相关性腹泻发生时间越早,而不同化疗方案所致化疗相关性腹泻发生时间也会不同(P<0.005,r=0.88)。化疗相关性腹泻平均发生时间为4.11天。化疗相关性腹泻总的治疗有效率达89.19%,且各组治疗有效率均达80%以上,但各组疗效无明显差异(P>0.05)。而伊利替康所致早发性腹泻予阿托品2.5毫克肌注治疗15分钟后症状缓解,效果明显。不同方法治疗化疗相关性腹泻其总的腹泻再发率为40.54%。其中易蒙停组83.33%,综合治疗组50%,益生菌组35.29%。化疗相关性腹泻治疗后,出现便秘7人次,腹胀1人次,纳差2人次,余无明显不良反应。
结论：
目前临床上对化疗相关性腹泻的治疗尚缺乏统一的规范,再发率偏高,需要更多的大样本多中心临床试验来研究并制定防治策略。
关键词: 结直肠癌 ；化疗 ；相关性 ；腹泻 ；治疗
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