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三种傣药植物的化学成分研究及逆流色谱技术在傣药研究中的应用认领

作者：

范青飞

学位授予单位：

中国科学院大学

摘要：

傣医药学是中国四大民族医药学（藏、蒙古、维吾尔、傣）体系之一，也是我国古老的传统医药之一。傣族居住地区，大都属热带、亚热带地区，其中西双版纳处于太平洋东亚季风和印度洋西南季风暖湿气流的交汇地带。由于地理位置潮湿，容易受各种疾病困扰，傣族人民在长期与疾病作斗争的过程中积累了丰富的传统医药经验。目前，傣药相对于其他民族药发展较缓，多集中于药方的整理，傣药不能广泛应用或进行现代化药物开发利用的技术瓶颈，就是其药效化学成分不清楚和药理作用机制不明确。因此，加强傣药的系统研究，阐明其药效化学成分和药理作用机制是傣医药发展不得不首先要解决的科学问题。傣药化学成分一般比较复杂，目前研究发现多数活性成分往往具有含量低、结构复杂，易挥发或变性失活等特点，大大限制了其进一步的研究和开发。逆流色谱以其特有的色谱特点，如具有温和的分离环境，可有效避免样品的不可逆吸附，活性丧失以及变性等问题。　　本论文分为二部分:一、应用经典植物化学方法对三种傣药白钩藤(Uncariasessilifructus)，伸筋草(Lycopodiumjaponicum)和麻欠(Zanthoxylummyriacanthumvar.pubescens)的化学成分进行研究;二、逆流色谱分技术在傣药研究中的应用。本研究将为傣药白钩藤，伸筋草和麻欠治疗相关疾病的应用奠定物质理论基础，也为应用逆流色谱技术加快民族药研究进行有益的探索和尝试。　　取得的主要研究结果有:　　1)从傣药白钩藤藤茎中分离到31个化合物，包括2个新化合物。其中三萜类化合物有19个，包括11个乌苏烷型三萜(1-11)，8个有齐墩果烷类三萜(12-19)，3个甾体(20-22)，7个酚类(24-30)，2个苯丙素(23，24)和1个脂肪酸类化合物(31)。活性筛选表明，白钩藤总提物无抗炎活性表现。当浓度达50μM时，化合物19，21，24和26表现出较好的抗炎活性。其他化合物表现出微弱的抗炎活性。化合物19在50μM时有细胞毒性，将其浓度降低至12.5μM（此时已无细胞毒性），其抗炎活性也随之大幅度降低，其之前良好的抗炎活性可能由其细胞毒性引起。进一步筛选发现化合物6和21对滑膜细胞炎症因子IL-6的产生有一定的抑制作用，但低于对照地塞米松，进而没有进行下一步的动物实验。　　2)从伸筋草乙醇提取物中分离鉴定了15个化合物，包括1个甾醇(20)，1个三萜(43)，2个二萜(41，42)，4个生物碱(37-40)，5个黄酮(32-36)和1个酚类化合物(44)。活性筛选表明，伸筋草总提物有微弱的抗炎活性表现。当浓度达25μg/mL时，化合物32，34和35表现出较好的抗炎活性，但化合物34在25μg/mL时有较强细胞毒性，其之前良好的抗炎活性可能由其细胞毒性引起。进一步筛选发现化合物32对滑膜炎细胞的炎症因子IL-6有很好的抑制作用。　　3)从麻欠树皮乙醇提取物中分离鉴定了26个化合物，包括1个新化合物和1个新的天然产物。其中生物碱10个(46-55)，苯丙素15个(56-70)，萜类化合物1个(20)。本种首次分到的化合物有23个。　　4)建立了液-液精制萃取，逆流色谱和LC-MS联用分析测定14种甾醇类激素的方法，该方法成功应用于黄荆中的痕量类固醇激素化合物黄体酮和雌三醇的检测。该技术可应用于植物界已知或未知的甾醇类成分的探索，具有很高的应用价值。建立了高效逆流色谱技术和NO生成抑制活性筛选技术联用的方法，快速从狗花椒的树皮中分离到3个目标活性化合物，分别是fargesin(5mg),epieudesmin(4mg)和(-)-pluviatylol-4''-O-γ,γ-dimethylallylether(5mg)。联合应用高效逆流色谱技术和大孔树脂柱色谱技术从狐尾葛中成功靶向分离出3个化合物，分别是大豆苷(3mg)，染料木素(4mg)和(-)-tuberosin-3-O-β-D-glucopyranoside(4mg)。以上逆流色谱技术的应用，为加快民族药研究，特别是傣药研究，提供了一定的指导意义。

摘要译文

关键词：

傣药; 白钩藤; 伸筋草; 麻欠; 抗炎活性; 逆流色谱

学位年度：

2021

学位类型：

博士

学科专业：

植物学

导师：

宋启示

中图分类号：

R29[中国少数民族医学];S57;R96[药理学]

学科分类号：

030402[中华民族学];100516[民族医学];100809[民族药学];100109[医学药理学];100603[中西医结合药学];100706[药理学]