放线菌新种Nonomuraea glycinis分离鉴定及次级代谢产物研究-文献详情-维普官网

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放线菌新种Nonomuraea glycinis分离鉴定及次级代谢产物研究认领

作者：

李志蕾

学位授予单位：

东北农业大学

摘要：

近年来，生物活性化合物对人体和植物的健康有较多益处，在医药领域中有着很高的需求。微生物可以单独或与植物结合合成这些化合物和一些酶。植物组织中的微生物，也被称为内生微生物，其产生了一系列的化合物。内生放线菌能够产生具有生物活性的次级代谢产物，它是一种具有广泛应用前景的生物技术资源。内生链霉菌产生了一些对多重耐药菌有效的新型抗生素，由内生菌产生的抗菌剂是环保的，其对人体不具有毒性，但对病原体具有较高的毒性。多样性高的内生放线菌以及其对各种环境胁迫的强适应能力似乎是新次生代谢产物尚未开发的来源。寄生在宿主植物内部的内生放线菌由于其产生大量次生代谢物的能力而受到人们的广泛重视。　　本次实验选取黑豆的根部作为研究对象，用三种分离培养基通过多次分离，纯化，从植物根内共分离出221株放线菌，合并后为60种放线菌。将菌株用ISP3培养基进行培养，逐一观察菌落的形态特征，发现菌株NEAU-BB2C19T具有较为特殊的形态，于是将其进行16SrRNA基因序列对比，发现其为一株潜在的新种放线菌，于是对该菌株进行了系统性的分类学鉴定。本实验使用实验室提供的10种供试真菌和3种供试病原细菌作为靶标菌株，秀丽隐杆线虫作为供试线虫，将60株放线菌分别进行菌株单点及液体发酵后，进行抗菌活性及杀线虫活性实验，筛选出了一些具有良好抗菌或杀线虫的菌株，其中菌株2C24的生物活性在抗真菌、细菌和线虫方面均作用效果显著，遂将其进行大量发酵以分离鉴定生物活性物质。具体结果如下:　　(1)野野村氏菌属是放线菌属中的稀有放线菌，在16S rRNA对比分析后，将其通过Mega6.06软件构建系统发育树，发现了该菌的最高相似性菌为N.guangzhouensis NEAU-ZJ3T(98.75％)，将菌株进行生理生化特征，化学分类学特征，以及分子学特征等实验分析后，表明NEAU-BB2C19T属于野野村氏放线菌属并与此菌属内其他菌株的各项特征都具有明显差异，由此认为菌株NEAU-BB2C19T是野野村氏放线菌属的一个新种，命名为Nonomuraeaglycinis，其典型菌株为NEAU-BB2C19T(=CGMCC4.7430T=DSM104838T)。　　(2)将60株放线菌进行抗10种病原真菌生长的单点实验后，发现有13株放线菌对一种以上病原真菌具有活性;将放线菌进行发酵后，有8株菌的发酵液对秀丽隐杆线虫有10％以上的杀伤作用;放线菌发酵液的上清及菌体浸提液中有17株菌对一种以上的病原细菌有抑制作用。　　(3)通过抗菌活性以及杀线虫活性检测后发现，菌株2C24具有较好的生物学活性，将菌株用发酵罐进行大量发酵，利用化学相关方法对其进行分离和纯化，现代光谱学对其结构进行分析鉴定后，得到的化合物为安沙霉素大环内酯类Hygrocins D，麦芽酚和维生素K3。

摘要译文

关键词：

植物内生放线菌; 多相分类学鉴定; 次级代谢产物

学位年度：

2018

学位类型：

硕士

学科专业：

生物学;微生物学

导师：

向文胜

中图分类号：

Q939.132;Q939.13[放线菌目⑨]

学科分类号：

071003[微生物学]