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基于质量标志物的苍术等级评价研究认领

作者：

彭新航

学位授予单位：

湖北中医药大学

摘要：

目的：初步确定苍术药材的质量标志物，并建立基于质量标志物的苍术饮片等级评价标准。　　方法：（1）基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术的苍术药材化学成分分析：采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术，对北苍术、茅苍术和关苍术的药材化学成分进行定性分析。并以此为基础，采用PCA和OPLS-DA对不同品种苍术化学轮廓图谱进行差异研究。　　（2）苍术HPLC指纹图谱研究：采用HPLC技术建立三个品种苍术药材的HPLC指纹图谱，同时运用UPLC-Q-TOF-MS/MS法对指纹图谱上主要特征峰进行辨识。　　（3）基于网络药理学技术筛选苍术质量标志物（Q-Marker）：选取北苍术与茅苍术差异性成分、指纹图谱共有特征性成分一共9个化合物作为候选成分，利用Swiss Target Prediction服务器、Pubchem服务器对苍术9个候选成分进行靶点预测，采用Genecards、OMIM数据库寻找慢性胃炎疾病靶点，再通过在线Venn2.1分析工具获得成分和慢性胃炎疾病靶点交集，使用Uniprot数据库将预测出的靶点蛋白名转换为对应的基因名、利用DAVID数据库筛选出重要通路，利用Cytoscape3.6.1软件得到“药材-成分-靶点-通路”网络关系，筛选苍术药材潜在的质量标志物（Q-Marker）。　　（4）苍术三种Q-Marker的含量测定：建立3种Q-Marker的HPLC含量测定方法，分析苍术不同品种、不同产地、不同加工方式、不同生长年限、主根与须根中Q-Marker的含量差异，探究Q-Marker的动态变化规律，考察Q-Marker的可测性。　　（5）基于Q-Marker的苍术饮片等级评价研究：对50批苍术饮片进行质量评价研究，以外观性状、水分、总灰分、酸不溶性灰分、β-桉叶醇、苍术素、苍术酮/苍术素作为等级划分指标，确定苍术饮片等级划分标准。　　结果：（1）一共鉴定出苍术药材中32个化合物，分别属于有机酸类、糖苷类、聚乙烯炔类和倍半萜类等不同类型。识别出苍术正品（北苍术和茅苍术）与关苍术差异成分12个，北苍术与茅苍术差异成分9个，其中TDDA在苍术正品中相对含量较高，在关苍术中相对含量低。而TDEYA、芹烷二烯酮在苍术正品中相对含量低，在关苍术中相对含量较高。　　（2）建立了三个品种苍术药材的指纹图谱，共标定9个主要特征峰，并指认北苍术与茅苍术中5个共有成分：(4E,6E,12E)-tetradecatriene-8,10-diyne-1,3-diol-diacetate（TDDA），(6E,12E)-tetradecad ecatriene-8,10-diyne-1,3-diol-diacetate（TDEYA），β-桉叶醇，苍术素，苍术酮;关苍术中5个共有成分：白术内酯Ⅲ、TDDA、TDEYA、芹烷二烯酮、苍术酮。　　（3）结合网络药理学活性以及Q-Marker理念，得到14个核心靶点和20条通路，初步预测Diacetyl-atractylodiol、TDDA、芹烷二烯酮、β-桉叶醇、苍术酮、TDEYA、3β-acetoxy atractylon、苍术素共8个化合物可作为苍术的候选Q-marker。　　（4）建立了3个Q-Markers的HPLC含量测定方法，三种有效成分在不同品种、不同产地、不同生长年限、不同生长部位以及炮制前后的药材中均可以检测到，且含量较高，不同批次样品中Q-Marker的含量存在着量的差异，符合Q-Marker的可测性和特有性的要求。　　（5）根据外观性状、水分、总灰分、酸不溶性灰分、β-桉叶醇、苍术素、苍术酮/苍术素7项指标测定值的范围将苍术饮片划分为一等、二等品和不合格品，结果表明总共50批苍术饮片，一等品有15批，占比30%，二等品有8批，占比16%，不合格饮片有27批，占比54%。　　结论：本研究基于中药质量标志物理论，整合化学成分-品种差异-指纹图谱-药效成分-含量测定-等级评价，对苍术药材进行了基础性的研究，初步拟定了苍术饮片等级标准，为中药质量评价研究提供了一种思路，为苍术药材的质量评价及临床应用提供了一定的科学依据。

摘要译文

关键词：

苍术; 等级评价; 质量标志物; 指纹图谱

学位年度：

2022

学位类型：

硕士

学科专业：

药物分析学

导师：

聂晶

中图分类号：

R282.71[植物药⑨]

学科分类号：

1005[中医学];100703[生药学];100801[中药资源学]