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糖类、氨基酸的毛细管电泳分离研究认领

被引量： 4

作者：

盛筱

学位授予单位：

曲阜师范大学

摘要：

毛细管电泳（CE）又称高效毛细管电泳（HPCE）或毛细管电分离法（CESM）,是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力、依据样品各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的高效、高选择性的新型液相分离分析技术。该方法具有高效、快速、自动化程度高、试剂消耗少、环境污染小等优点,在十几年的时间中,特别是在最近几年,受到分离分析科学家的极大关注,已成为生物化学和分析化学中最受瞩目,发展最快的分离分析新技术之一。糖是自然界和生物体中广泛存在的物质。长期以来人们认为糖的主要功能是提供能量,而新兴的糖生物化学研究发现糖类物质除了提供能量外还有其它多方面的生物活性与功能。氨基酸是在生物体内构成蛋白质分子的基本单位,与生物的生命活动有着密切的关系,它在抗体内具有特殊的生理功能,是生物体内不可缺少的营养成分之一。氨基酸、糖类是生命有机体的重要组成部分,研究其毛细管电泳分离对生物、医药、食品、卫生等领域都具有重要意义。在糖类和氨基酸的研究领域,由于这些生物分子没有或者仅有微弱的紫外吸收,直接紫外检测满足不了低含量组分测定的要求,化学衍生化法应运而生。目前广为应用的糖类衍生试剂主要有酰肼类、氨基吡啶类、苯胺类等,氨基酸衍生化试剂主要有邻苯二甲醛（OPA）、9-芴甲氧羰基氯（FMOC-Cl）和5-二甲氨基萘-1-磺酰氯（DNS-Cl）等,但是这些衍生试剂本身的一些特性决定了其应用的局限性。为此,本文采用实验室自行合成的新型衍生化试剂,改变被测化合物的特性,进行了糖类物质和氨基酸的毛细管电泳分离,结果令人满意。论文分三章: 第一章简单介绍了毛细管电泳的发展及其在药物分析、生物分子分离、基因工程研究、临床医学等各方面的应用,详细介绍了其在糖类、氨基酸分离方面的应用,并对毛细管电泳分离被分析物的策略及其相关的基础知识进行了阐述。第二章新型衍生试剂1-萘基-3-甲基-5-吡唑啉酮（NMP）用于单糖的毛细管电泳分离,分为四部分。 2.1研究了毛细管区带电泳模式下单糖NMP衍生物的分离情况。考察并优化了单糖NMP衍生物的分离条件,在18min内实现了九种单糖衍生物的基线分离,并在此基础上进行了白刺和蜂花粉实际样品的测定,获得的结果令人满意。 2.2以1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）作为柱前衍生试剂,在毛细管区带电泳模式下,考察并优化了单糖衍生物的分离条件,实现了九种单糖衍生物的基线分离。 2.3对毛细管区带电泳模式下单糖NMP衍生物和PMP衍生物的分离进行了比较与总结。通过比较两种试剂的异同及两种试剂衍生单糖分离效果的异同得出结论:NMP衍生单糖在毛细管电泳分离中具有更高的检测灵敏度。 2.4研究了胶束电动毛细管色谱模式下单糖NMP衍生物的分离情况。考察并优化了单糖NMP衍生物的分离条件,在10分钟内实现了八种单糖衍生物的基线分离。分离快速、简单,结果令人满意。第三章 2-（11H-苯[a]咔唑）乙基氯甲酸酯（BCEC-Cl）作为柱前衍生试剂用于氨基酸的毛细管电泳分离,分为两部分。 3.1以2-（11H-苯[a]咔唑）乙基氯甲酸酯（BCEC-Cl）作为柱前衍生试剂,在甲酰胺为溶剂,醋酸-醋酸铵为缓冲体系,毛细管柱长58.5 cm（有效长度50 cm）,18℃,30 kV,压力进样12s,279 nm二极管阵列检测（DAD）条件下,采用非水毛细管电泳模式考察并优化了氨基酸衍生物的分离条件,在不加任何添加剂的情况下实现了16种氨基酸的基线分离。 3.2以2-（11H-苯[a]咔唑）乙基氯甲酸酯（BCEC-Cl）作为柱前衍生试剂,在β-环糊精（β-CD）作为手性拆分试剂,Tris-H3PO4为缓冲体系,十二烷基硫酸钠（SDS）为表面活性剂,毛细管柱长58.5 cm（有效长度50 cm）,20℃,20 kV,压力进样10s,279 nm二极管阵列检测（DAD）条件下,采用胶束电动毛细管色谱模式考察并优化了氨基酸对映体的分离条件,实现了15种氨基酸的手性拆分。

摘要译文

关键词：

毛细管电泳; 糖类; 氨基酸; 1-萘基-3-甲基-5-吡唑啉酮(NMP)

学位年度：

2008

学位类型：

硕士

学科专业：

有机化学

导师：

尤进茂

中图分类号：

O629[天然化合物]

学科分类号：

070303[有机化学];070306[化学生物学];081704[应用化学]

D O I：

10.7666/d.Y1301619