茯苓Wolfiporia cocos(Schw.)Ryv.&Gilbn.是一种高等担子菌,一般腐生或寄生在松科植物赤松Ginkgo biloba Linn.和马尾松Pinus massoniana Lamb.根部,其地下生长的菌核(sclerotium)是一种传统中药,具有较好的营养价值和药用价值。
以11个不同来源的茯苓菌株为材料,研究了茯苓菌丝体、子实体及担孢子的形态特征及适宜的生长、发育条件。结果表明,茯苓菌丝体为少分枝、有隔膜、无锁状联合的多核菌丝,菌丝核数目不定,一般为6~30个,同一细胞中的核往往表现为两两较为靠近。茯苓担孢子核相以双核为主,双核孢子,单核孢子和无核孢子分别占87.2%,4.7%和8.1%。在28℃条件下,茯苓菌丝体在PDPA培养基上生长最为迅速,茯苓菌丝的适宜生长条件还包括良好的通气状况。
武汉市5~7月份中,实验室温度26℃左右,空气相对湿度75%左右,茯苓菌核组织分离所得的菌丝转管24d后就能开始形成子实体,同其他阶段相比,此阶段形成子实体的试管数量最多,形成子实体所需时间也最短。26℃条件下孢子萌发率最高,为47.2%。担孢子萌发形成的菌丝较为浓密,呈白色短绒状,气生菌丝不明显,生长缓慢。单孢萌发菌丝形成的菌落形态差异明显,菌丝生长速度、气生菌丝浓密程度均有明显差异。
研究了3种不同荧光染料对茯苓菌丝体的适宜染色条件,结果表明,Hoechest33258浓度为50μg/ml~75μg/ml,染色时间为4min~6min时能够得到最佳的成像结果,DAPI浓度为4μg/ml,染色时间为4min左右时能够得到最佳的成像结果,Fluorescent Brightener 28的染色能力很强,浓度为到1μg/ml,染色时间为1min时,即能观察到比较清晰的物像。两种核染料(Hoechest 33258和Fluorescent Brightener28)对茯苓担孢子的适宜染色条件同对菌丝体的适宜染色条件相同。茯苓菌丝体的适宜双重染色条件为,75μg/ml的Hoechst 33258染色4min,再用2μg/ml的Fluorescent Brightener 28染色1min。上述适宜荧光染色条件对猪苓菌丝体和单孢子染色同样适用。 摘要译文
荧光染色; 原生质体; 性模式; 次级同宗结合; 锁状联合