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经典名方除湿胃苓汤的制备工艺及物质基础研究认领

作者：

任俊璇

学位授予单位：

中国医药工业研究总院

摘要：

除湿胃苓汤(Chushi Weiling Decoction,CWD)出自清代吴谦所著《医宗金鉴》,为国家中医药管理局在2018年4月13日发布的首批100个经典名方之一,全方由苍术、厚朴、陈皮、甘草、泽泻、茯苓、猪苓、肉桂、白术、栀子、木通、防风、滑石、灯心草共14味药材组成。除湿胃苓汤主要用于临床上对湿疹、带状疱疹的治疗,应用广泛,疗效显著。而目前,有关除湿胃苓汤的文献仅见于临床疗效,在其化学物质基础和作用机制方面的研究未见报道。有鉴于此,本课题在考证了除湿胃苓汤的方剂组成、制法的基础上,对除湿胃苓汤的制备方法进行了考察,初步确定了除湿胃苓汤的处方工艺,制备了15批物质基准。并利用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)和气相色谱-质谱(GC-MS)技术,对其化学成分进行分析,以阐明其物质基础。基于此物质基础研究,本课题进一步利用网络药理学相关数据库和富集分析方法,对除湿胃苓汤治疗湿疹、带状疱疹的机制进行分析,对除湿胃苓汤可能作用的靶点通路进行初步探索。本研究具体内容如下: 1、经典名方的关键信息考证及制备工艺研究根据国家中医药管理局办公室制定的《古代经典名方目录(第一批)》、《古代经典名方关键信息考证原则》和《古代经典名方关键信息表(7首方剂)》,基于文献调研,考据了除湿胃苓汤的方剂组成、药材基源及产地、炮制及煎煮工艺。通过进行煎煮、干燥等工艺考察,以出膏率和主要成分绿原酸、甘草苷、桂皮醛、橙皮苷和藏红花酸的含量为指标,初步确定了除湿胃苓汤的处方工艺。 2、基于UPLC-Q-TOF-MS和GC-MS对除湿胃苓汤化学成分表征的研究通过文献调研,构建了包含全方14味药材的1813个化合物的除湿胃苓汤化合物信息库。基于UPLC-Q-TOF-MS和GC-MS技术,从除湿胃苓汤全方中共表征出化合物286个,其中使用UPLC-Q-TOF-MS表征了194个化合物,使用GC-MS表征了92个化合物;包括萜类93个、黄酮类37个、甾类11个、生物碱类8个、苯丙素及芳香族衍生物类29个、有机酸类16个、酮、醛、醇、酯类60个、其他类32个。并对其中的萜类、黄酮类、苯丙素类、酚酸酯类及生物碱类化合物的质谱裂解情况进行了分类分析。通过全方与单味药材成分、化合物信息库和TCMSP等数据库进行对比,将化合物进行了药材归属:其中苍术30个,姜厚朴52个,陈皮25个,甘草35个,泽泻19个,茯苓37个,猪苓14个,肉桂42个,白术19个,栀子31个,木通26个,防风28个,灯心草2个。 3、基于网络药理学的除湿胃苓汤治疗湿疹和带状疱疹的作用机制研究首先,通过TCMSP、ETCM等数据库收集除湿胃苓汤各药材的性味归经和活性成分。然后,通过OMIM、Genecard等数据库收集湿疹和带状疱疹的疾病相关靶点;使用靶点预测工具Swiss Target Prediction预测活性分子的潜力靶点,与疾病靶点导入Venny 2.1.0平台进行交集去重。再分别使用蛋白互作分析平台STRING 11.0和网络可视化分析软件Cystoscope 3.9.1完成共有基因PPI网络构建、PPI类型及分布分析、核心成分筛选和核心靶点筛选。最后利用Metascape数据库和Reactome分析工具进行通路富集分析,并采用David数据库、Omic Share云平台和KEGG PATHWAY Database获得有关信号通路和生物功能的注释信息。并借助AUTODOCK软件,完成分子对接,验证分析结果。结果表明,除湿胃苓汤中143种有效成分主要通过362个靶点来治疗湿疹和带状疱疹,排名靠前的靶基因为CYP19A1、AR、HMGCR、ESR1、PTGS2、ALOX5、SHBG、NOS2、ADORA3和NR3C1等。通路富集分析显示,除湿胃苓汤可能对C型凝集素受体信号通路、人巨细胞病毒感染、IL-17信号通路等生物学通路起到调节作用。分子对接结果显示核心活性成分oxypaeoniflorin(58)、kaempferol(178)、geniposide(94)、hesperidin(168)与核心靶点间的结合能力较好,验证了网络药理学分析结果。由此推测:除湿胃苓汤可能通过(1)抗炎、抗病毒和介导免疫反应;(2)调节类固醇代谢等途径来发挥对湿疹和带状疱疹的治疗作用。本研究在文献调研基础上初步确定了除湿胃苓汤的处方工艺,通过利用UPLC-Q-TOF-MS和GC-MS技术,表征了除湿胃苓汤的化学成分并进行了药材归属,同时,利用网络药理学和分子对接方法,对该方治疗湿疹和带状疱疹的有关机制进行了探究,为除湿胃苓汤的质量控制、临床开发应用研究奠定了基础。

摘要译文

关键词：

除湿胃苓汤; UPLC-Q-TOF-MS; GC-MS; 化学物质基础; 网络药理学

学位年度：

2024

学位类型：

硕士

学科专业：

生药学

导师：

欧阳丹薇

中图分类号：

R283.6[剂型]

学科分类号：

1005[中医学];100801[中药资源学];100807[中药药剂学]

D O I：

10.27886/d.cnki.gyygy.2024.000012