目的:洋甘菊(Matricaria chamomilla L)精油是一组提取自洋甘菊花花朵的挥发性成分。洋甘菊自古以来就被世界各国应用入药,但对德国洋甘菊及罗马洋甘菊的对比研究较少,并且洋甘菊精油易挥发的不稳定性限制其部分应用。本文拟分析德国洋甘菊及罗马洋甘菊精油的化学成分,检测其体外抑菌、促细胞增殖迁徙及体外美白、抗过敏活性,并将其制备成微乳后混入水凝胶基质,制成洋甘菊精油微乳水凝胶,并对其进行质量评价。
方法:采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分析并比较德国洋甘菊精油和罗马洋甘菊精油化学组成。采用抑菌圈法,测定并比较两种洋甘菊精油对金黄葡萄球菌、铜绿假单胞菌和表皮葡萄球菌的抑制活性。采用MTT实验,测定并比较两种洋甘菊精油对人脐静脉血管内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)和人皮肤成纤维细胞(Human Skin Fibroblast,HSF)增殖的影响。采用划痕实验,测定并比较两种洋甘菊精油对HUVEC和HSF细胞迁移的影响。检测两种洋甘菊精油对酪氨酸酶的抑制作用,评价并比较两种精油的体外美白活性。用相转变法制备洋甘菊精油微乳,表面活性剂选用吐温40,吐温60和吐温80,助表面活性剂选用无水乙醇,甘油和丙醇,油相选用花生油,肉豆蔻酸异丙酯(IPM)和橄榄油,用伪三相图法确定微乳最优处方组成。并对其形态、粒径、微乳类型及p H等进行质量评价。以泊洛沙姆为凝胶材料,甲基纤维素为黏度调节剂,制备水凝胶基质,并将洋甘菊精油微乳混入制备成洋甘菊精油微乳水凝胶,测定其成胶温度,肉眼观察其外观形态并在透射电镜下观察微观形态,测定其溶胀度和p H。
结果:德国洋甘菊精油中共检测到36种化合物,成分包含单萜类(23%)、倍半萜类(63%)及其衍生物。罗马洋甘菊精油中共检测到75种化学成分,主要化学成分是酯类,醛类和酮类。化学组成的不同决定了其药理活性有所不同。两种精油均能显著抑制透明质酸酶和酪氨酸酶的活性,具有较好的抗过敏活性和美白效果。这一作用使洋甘菊精油可用于美白舒敏化妆品的制备。其中,罗马洋甘菊精油的作用优于德国洋甘菊精油。同时,两种精油均能抑制金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和绿脓杆菌,提高HUVEC和HSF的活力,促进HUVEC和HSF细胞的迁移,以上活性均有利于抑制伤口感染和促进伤口愈合,可用于开发成促进伤口愈合的制剂。其中,德国洋甘菊精油的作用优于罗马洋甘菊精油。为提高洋甘菊精油应用效果,将其制备成洋甘菊精油微乳,筛选出的洋甘菊微乳的最佳制备工艺条件为:油相选用肉豆蔻酸异丙酯(IPM),丙醇为助表面活性剂,吐温-80为表面活性剂,Km=3:1。制备的洋甘菊精油微乳在透射电镜下呈光滑的圆形,分布较均匀,粒径为239.77±3.31 nm,PDI为0.094±0.020。微乳为水包油(O/W)型,呈弱酸性。水凝胶基质以泊洛沙姆-407、泊洛沙姆-188和甲基纤维素的质量比为4:1:4制备而成,将洋甘菊微乳混入制备成洋甘菊精油微乳水凝胶。测定成胶温度为37℃,扫描电镜下呈致密的多孔网络结构,孔隙尺寸较小,符合水凝胶的微观结构特点。其溶胀度高,保湿性能好,p H值为6.30左右,且60h内其p H无明显变化,提示CEO微乳水凝胶稳定性良好。
结论:洋甘菊精油组成复杂,具有抗过敏、美白、抑菌活性和促进伤口愈合的作用,且德国洋甘菊精油和罗马洋甘菊精油在成分组成和活性上均有差异。将洋甘菊精油制备成微乳再制备成微乳水凝胶,质量合格,稳定性好,可为洋甘菊精油的体外应用提供重要参考,其体外递送研究有待一步开展。 摘要译文