植物乳杆菌6Y-15抗肿瘤活性成分筛选及促凋亡机制研究-文献详情-维普官网

文献检索

任意字段

文献信息

任意字段
主题词
篇关摘
篇名
关键词
摘要
作者
第一作者
作者单位
刊名
中图分类号
学科分类号
DOI
基金

智能检索

高级检索

检索历史

植物乳杆菌6Y-15抗肿瘤活性成分筛选及促凋亡机制研究认领

作者：

赵虎

学位授予单位：

贵州大学

摘要：

目前,癌症是全球死亡的主要原因传统的癌症治疗主要是手术切除、放疗和药物治疗,然而,这三种方法可能在治疗过程诸多不良反应。许多研究正试图使用不同的策略设计或找寻针对各种癌症的新治疗剂,从自然界中挖掘药物仍然是抗癌治疗的前沿方法。乳酸菌(Lactic acid bacteria,LAB)能够产生各种功能以及活性化合物,通常具有低细胞毒性,并且只产生少许副作用,具有广阔的抗癌潜力,因此,它们似乎是合成抗癌剂的良好替代品。本论文对植物乳杆菌6Y-15产生的抗肿瘤活性化合物进行初步分离以及探寻其对肿瘤细胞促凋亡机制,取得下列主要研究结果: 1.检测6Y-15植物乳杆菌发酵液的抗肿瘤活性对6Y-15发酵液采用CCK-8法检测其抗肿瘤活性,结果表明其具有较强的体外抗肿瘤活性,对HT-29细胞抑制率达到82.1%,检测发酵液中抗肿瘤活性物质合成量与发酵时间的关系,结果显示,在该菌发酵第6 d时,抗肿瘤活性物质合成量达到最高。对6Y-15发酵液中的抑癌物质进行溶解性的检测,结果表明,该菌的活性物质在能够溶于几种极性不同的有机溶剂,如乙酸乙酯,正丁醇等,且在乙酸乙酯中的溶解性最好。 2.抗肿瘤活性成分粗分以及鉴定通过硅胶柱层析初步分离抗抗肿瘤活性成分,得到32份分馏组分,并检测各组分抗肿瘤活性,其中编号14的分馏组分拥有极高抗癌活性,抑制活性为93.56%。通过LC-MS对该组分进行化学成份的分析,得到15种化学物质,大多为酸性物质。 3.抗肿瘤活性机制分析结果对该分离组分进行抗肿瘤作用进行研究,进行细胞形态学观察、AO/EB双染色、Hoechst 33258染色实验,结果表明了6Y-15抗肿瘤活性化合物能够诱导HT-29细胞凋亡。随后对凋亡机制进行探究,通过JC-1检测,发现线粒体膜电位下降,推测发酵液中的活性物质可能通过内源性凋亡通路促HT-29细胞凋亡,因此采用Western blot检测内源性通路相关蛋白:Bcl-2、Bax、Caspase 3、Cleaved-Caspase 3。结果表明随着抗肿瘤活性化合物浓度的增加,Bcl-2表达量下降,Bax表达量升高,Caspase 3被激活,Cleaved-Caspase 3表达升高。综上,抗肿瘤活性化合物通过上调Bax/Bcl-2的比值,导致线粒体膜电位下降,最终激活Caspase-3从而诱导HT-29细胞凋亡。

摘要译文

关键词：

植物乳杆菌; 抗肿瘤活性; 提取物; 细胞凋亡

学位年度：

2024

学位类型：

硕士

学科专业：

生物学

导师：

王嘉福

中图分类号：

R914[药物化学]

学科分类号：

100603[中西医结合药学];100701[药物化学];100705[微生物与生物技术药物学]

D O I：

10.27047/d.cnki.ggudu.2024.001789