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贵州樱花根腐病致病菌的分离鉴定及拮抗菌防治效果研究认领

被引量： 1

作者：

马潇洋

学位授予单位：

贵州大学

摘要：

近年来,贵州多地陆续发生樱花根腐病,引起大量樱花死亡,造成了巨大经济损失。但由于目前尚不明确该病害病原且缺乏有针对性的防治手段,因此该病害仍呈快速扩展的趋势。以往病害通常利用化学药剂进行防治,但长时间、大量的施用杀菌剂会造成农药的3R(抗性resistance、再增猖獗resurgence和残留residue)问题,化学药剂已不能满足人们对植物病害防治的要求。生物防治因其绿色无污染、长期有效等优点,逐步成为防治方法主流。本研究通过组织分离法分离病原菌,利用柯赫氏法则明确樱花根腐病病原;从野外健康及发病樱花根际土筛选对樱花根腐病病原菌具有防治效果的生防细菌;最后对筛选出来的生防细菌防治樱花根腐病的防治效果和机制进行研究。研究得到的主要结果如下:(1)在贵州省乌当区选择具有典型根腐病症状的樱花植株根系,通过组织分离法对其病原菌进行分离和纯化,通过回接检测分离菌株的致病性。结果组织分离共获得54株真菌,回接试验中4个菌株(YH5,YH15,YH19,YH26)可以造成樱花根腐病。其中菌株YH15的致病性最强,其发病率达到100%,高于其他3株菌株。通过形态学观察,初步确定病原菌为镰刀菌(Fusarium spp.)。通过扩增菌株的ITS和?-tubulin基因序列,对其进行基因序列的比对分析,结果菌株YH5、YH15以及YH19鉴定为尖孢镰刀菌(F.oxysporum),菌株YH26鉴定为茄病镰刀菌(F.solani)。(2)通过稀释涂布法对健康和发病樱花根际土的细菌进行分离,通过对峙法筛选生防菌株。结果共分离得到83株细菌,对峙实验筛选获得5株具有抑菌活性较强的生防细菌,对应菌株和抑菌率分别如下:SF1-2(75.19%)、SF1-15(43.67%)、SF1-16(41.61%)、SF2-3(44.19%)、SF3-16(46.77%);通过形态学和分子学鉴定5株生防细菌结果为:SF1-2为绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis),SF2-3为假单胞菌(Pseudomonas sp.),SF1-15和SF1-16为粘着剑菌(Ensifer adhaerens),SF3-16为贪铜菌(Cupriavidus sp.),其中绿针假单胞菌(P.chlororaphis)抑菌率为75.19%,抑制率最高。通过盆栽试验检测生防细菌SF1-2对樱花根腐病的防治效果发现,回接病原菌YH15的樱花根腐病发病率为70%,病情指数为50%,而同时回接菌株YH15和菌株SF1-2的樱花根腐病发病率为30%,病情指数仅为7.5%,相对防治效果达到了85%。(3)菌株SF1-2对樱花根腐病的防治机制的研究表明:菌株SF1-2可以通过产生代谢产物对病原菌产生抑制,菌株SF1-2非挥发性代谢产物对菌株YH15的抑菌率为16.33%。分析其非挥发性代谢产物,得到其22种组成成分,结合以往文献报道分析菌株SF1-2可以产生吡咯类物质,其可能在抑制病原菌过程中发挥了重要作用;此外,菌株SF1-2可以作用于病原菌YH15的菌丝,使菌丝形成溶解和断裂。菌株SF1-2在提高樱花根腐病防治效果的过程中对植物的生理生化、土壤理化性质和土壤微生物菌落影响的结果如下:菌株SF1-2可以提高樱花根系可溶性糖含量、降低MDA含量,此外菌株SF1-2处理可以增加根系活力;菌株SF1-2可以显著提高全氮含量;菌株SF1-2处理显著降低了土壤脲酶含量;与病原菌单独处理相比,菌株SF1-2处理改变了根际土中真菌数量和物种组成,也改变了细菌数量。具体如下,与病原菌单独处理相比,SF1-2处理上调了毛孢子菌属(Trichosporon spp.)、Paraphaeosphaeria、Pleurotheciella的数量,降低了尾柄孢壳属(Cercophora spp.)、丛赤壳属(Nectria spp.)、枝孢菌属(Cladosporium spp.)、孔球孢属(Gilmaniella spp.)、玛利亚霉属(Mariannaea spp.)、Paracremonium、不动杆菌属(Acinetobacter spp.)、Chryseolinea、副球菌属(Paracoccus spp.)和黄杆菌属(Flavobacterium spp.)数量。

摘要译文

关键词：

樱花; 根腐病; 生物防治; 防治机制

学位年度：

2023

学位类型：

硕士

学科专业：

林业

导师：

于存

中图分类号：

S436.8[观赏园艺类病虫害]

学科分类号：

090203[观赏园艺学];090401[植物病理学];090402[昆虫学]

D O I：

10.27047/d.cnki.ggudu.2023.003113