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瑶药藤黄檀化学成分及生物活性研究认领

作者：

李小梅

学位授予单位：

广西大学

摘要：

黄檀属（Dalbergia）植物属豆科,主要分布于热带和亚热带地区,其植物资源丰富,全球约有317种,其中,我国有降香黄檀、海南黄檀、藤黄檀等28个品种及1个变种。国内外学者对黄檀属植物的物质基础研究结果表明,黄檀属植物中含有黄酮类、萜类、苯并呋喃类及酚类等丰富的化学成分,并且具有镇痛、抗炎、抗菌、抗氧化、止泻、脑保护等药理作用。藤黄檀（Dalbergia hancei Benth）,豆科（Leguminosae）黄檀属（Dalbergia）藤本植物,根、茎入药,能舒筋活络,有理气止痛、破积之效,在广西民间称为“痛必灵”,可用于风湿腰痛、关节痛,腰肌劳损、久伤积痛等疾病的治疗,但国内外鲜有关于藤黄檀的化学成分及药理活性方面的报道。为了更加有效地开发和利用藤黄檀植物资源,本研究将藤黄檀树皮作为实验材料,系统开展其化学成分的分离、结构鉴定以及生物活性方面的研究,研究结果可以为藤黄檀植物的药效物质基础研究和开发利用提供理论依据。主要研究内容、方法及结论如下: 1、藤黄檀化学成分分离及结构鉴定。称取干燥的藤黄檀树皮5.1Kg,用80%甲醇溶液于室温下浸提5次,每次25 L,每次3天,将滤液减压浓缩得粗提物,依次用石油醚、乙酸乙酯对粗提物萃取3次,得到各萃取物:石油醚萃取物（35.0 g）、乙酸乙酯萃取物（96.5 g）和水层部分（958.8 g）。采用Sephadex LH-20、Diaion HP20SS、MCI gel CHP 20P、Toyopearl HW-40F、Chromatorex C18、硅胶等柱层析方法,对水层和乙酸乙酯层部分进行化学成分的分离和纯化,并通过旋光,NMR,HR-MS等多种技术鉴定出13个黄酮类化合物,包括12个异黄酮类化合物和1个黄烷醇类化合物。12个异黄酮类化合物分别为:5-hydroxy-6,7-dimethoxy-4′-O-[β-D-apiofuran-osyl-（1→5）-β-D-apiofuranosyl-（1→6）-β-D-glucopyranosyl]isoflavone（DHB-1）、5-hydroxy-7-methoxy-4′-O-[β-D-apiofuranosyl-（1→5）-β-D-apiofu-ranosyl-（1→6）-β-D-glucopyranosyl]isoflavone（DHB-2）、5-hydroxy-6,7-dime-thoxy-4′-O-（6-O-D-apio-β-D-furanosyl-β-D-glucopyranosyl）isoflavone（DHB-3）、5-hydroxy-6,7-dimethoxy-4′-O-β-D-glucopyranosyl isoflavone（DHB-4）、prunetin-4′-O-apiosyl-（l→6）-glucoside（DHB-5）、樱黄素4′-O-β-D-葡萄糖甙（DHB-6）、8-C-β-D-glucopyranosyl genistein（DHB-7）、8-C-葡萄糖基-7-甲氧基-4′,5-二羟基异黄酮（DHB-9）、prunetin（DHB-10）、5,3′,4′-trihydroxy-7-methoxy isoflavone（DHB-11）、irisolidone（DHB-12）、genistein-8-C-（6 acetyl）-β-D-glucopyranoside（DHB-13）。黄烷醇类化合物为:表儿茶素（DHB-8）。以上所有化合物均为首次从藤黄檀植物中分离得到,其中化合物DHB-1、DHB-2为新化合物,化合物DHB-13的碳氢数据在本研究中为首次报道。 2、藤黄檀总黄酮提取工艺研究。以芦丁为对照品,作其标准曲线:Y=11.379X-0.003（R2=0.9992）,基于此,探究了浸渍法、超声提取法、回流提取法三种不同提取方法对藤黄檀树皮粉末中总黄酮的提取情况。结果表明,超声提取法最优,总黄酮得率可达13.6%,其次是回流提取法,为12.7%,浸渍法对总黄酮的提取效果最差,总黄酮得率仅为10.0%。并进一步采用了单因素实验,探究了超声提取方式下料液比、乙醇浓度、提取时间对藤黄檀中总黄酮得率的影响,得到最佳提取条件:料液比为1:35（g/mL）,乙醇浓度为70%;提取时间为1.5 h。 3、单体化合物的生物活性研究。以氨苄青霉素为阳性对照,采用滤纸片法测试了部分化合物在6 mg/m L浓度下,对大肠杆菌、金色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和尖孢镰刀菌的抑制作用。抗菌定性实验结果表明,化合物DHB-4仅对大肠杆菌有较弱的抑制作用,化合物DHB-10对除金色葡萄球菌之外的三种菌均表现出较弱的抑制活性,其余化合物几乎没有抑制活性。体外酶活性抑制方面,分别以曲酸和阿卡波糖为阳性对照,测试了部分化合物对酪氨酸酶及α-葡萄糖苷酶的抑制作用,实验结果表明,所测化合物均对两种酶显示出较弱的抑制作用。

摘要译文

关键词：

藤黄檀; 化学成分; 生物活性; 黄酮; 提取

学位年度：

2022

学位类型：

硕士

学科专业：

生物医学工程

导师：

杨克迪黄永林

中图分类号：

R29[中国少数民族医学]

学科分类号：

030402[中华民族学];100516[民族医学];100809[民族药学]

D O I：

10.27034/d.cnki.ggxiu.2022.002713