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菟丝草化学成分与生物活性筛选研究认领

被引量： 4

作者：

戴乐

学位授予单位：

喀什大学

摘要：

寄生植物菟丝草为旋花科植物菟丝子Cuscuta chinensis Lam.的干燥地上部分,多寄生缠绕在豆科、胡麻科等植物上,以带花果的全草入药,具有补肝肾、益精髓等功效,在抗炎、抗氧化、降脂等方面应用广泛,表现出了良好的临床利用前景。菟丝草中含黄酮、生物碱等多种活性成分。目前,在国内外对菟丝子的研究较为深入,而对其全草的化学成分和生物活性研究较为少见。本课题选取新疆地区药用植物菟丝草为研究对象,重点研究全草的化学成分并进行生物活性筛选。主要研究内容如下:第一部分对有关菟丝草植物化学成分、生物活性、寄生特性、质量标准等研究进行了综述分析。菟丝草植物中存在黄酮、甾醇、多糖、木脂素、生物碱、萜类等多种成分,有抗氧化、抗炎、免疫调节、保肝、抗癌、保护神经、降脂等多种作用,关于其质量标准研究目前还是停留在相对较为简单的性状、薄层、显微等简单标准方法;此外,由于菟丝草具寄生性,其化学成分也会受到寄主植物、产地、气候等的直接影响,进而影响其生物活性,因此有必要对其进行生药鉴别,确定基源,确保药材药效发挥安全、稳定。第二部分对不同极性的菟丝草提取物做了抗炎、抗菌、降血脂、降糖等生物活性筛选,并对不同产地的菟丝草药材进行了抗氧化测定。结果表明,菟丝草中存在抗氧化活性成分;菟丝草各部位对15-LOX酶抑制率不太明显,但对COX-2酶有较强的抑制活性,其中石油醚部位活性最强;二氯甲烷部位和乙酸乙酯部位对白色链球菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌存在不同程度的抑制效果,也表现出较强的体外降脂活性;菟丝草各部位对PTP1B的抑制率都比较低,降糖活性不高。第三部分对菟丝草石油醚部位进行了气相色谱-质谱联用（GC-MS）分析,初步鉴定其中的化学成分。经质谱检索软件检索,并核对标准图谱,结果显示从菟丝草石油醚部位鉴定出47种成分,包括烷烃类、脂肪酸类、酯类及甾类等成分,其中γ-谷甾醇（13.85%）,棕榈酸（9.72%）,邻苯二甲酸二丁酯（7.97%）,菜油甾醇（6.88%）等成分含量较高。第四部分中采用硅胶柱色谱、薄层色谱、中压快速制备色谱、高效液相、半制备液相等多种分离手段在菟丝草二氯甲烷及乙酸乙酯部位中分离出32个单体化合物,并结合核磁共振波谱（1DNMR、2DNMR）、高分辨质谱（ESI-MS）、紫外（UV）等波谱色谱技术鉴定了其中30种单体结构,包括10个黄酮类,5个木脂素类,1个生物碱类,8个酚类化合物,3个单萜,1个酰胺类成分,1个甾醇,1个螺环化合物。分别为6-乙氧基-1H-嘧啶-2,4-二酮（CD-1）,对羟基苯甲酸乙酯（CD-2）,莨菪亭（CD-3）,（-）-地芰普内酯（CD-4）,（+）-松脂素（CD-5）,槲皮素（CD-6）,山柰酚（CD-7）,N-反式-阿魏酰酪胺（CD-8）,（+）-丁香脂素（CD-9）,杜仲树脂酚（CD-10）,3,4-脱氢海螺环酮（CD-11）,（+）-松脂素-O-β-D-葡萄吡喃糖苷（CD-14）,单爵麻脂苷（CD-15）,对苯二酚（CD-16）,香草酸（CD-17）,β-胡萝卜苷（CD-18）,2,4,6-三甲基-没食子酸（CD-19）,山柰酚-3-O-β-D-（6″-p-对羟基苯甲酰基）-半乳吡喃糖苷（CD-20）,反式银锻苷（CD-21）,槲皮素-3-O-（6″-阿魏酸）-β-D-吡喃半乳糖苷（CD-22）,山柰酚-3-O-（2′′-O-E-p-香豆酰基）-β-D-吡喃葡萄糖苷（CD-23）,紫云英苷（CD-24）,异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷（CD-25）,长寿花糖苷（CD-26）,山柰酚-3-O-(6″-O-E-阿魏酰基-β-D-吡喃葡萄糖苷（CD-27）,吐叶醇（CD-28）,邻苯二酚（CD-29）,E-对香豆酸（CD-30）,顺式对羟基肉桂酸（CD-31）,金丝桃苷（CD-32）。其中CD-1、CD-3、CD-4、CD-11、CD-15、CD-19、CD-20、CD-21、CD-22、CD-23、CD-26、CD-27、CD-28、CD-29这14个化合物是首次从该植物中分离得到。通过体外酶活性检测来评价分离得到的部分单体化合物的抗炎活性,结果显示化合物CD-22有很好的抗炎活性,对COX-2酶抑制率高达93.86%,测定IC50值为0.32±0.01μM。第五部分建立了十个产地菟丝草药材（S1～S10）的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱,共标定出12个共有色谱峰,采用SPSS 19.0软件等对样品进行相似度分析、主成分分析、聚类分析,鉴别、筛选菟丝草药材的产地来源。相似度结果显示样品S1、S2、S3、S6、S7、S9、S10的相似度高于0.90,而产地S4、S5、S8之间相似度低于0.90。主成分分析和聚类分析结果显示样品分为两类,S1、S2、S3、S6、S7、S9、S10聚为一类,其余产地S4、S5、S8为一类;同时测定了药材中金丝桃苷、紫云英苷、槲皮素3种黄酮类成分的含量。结果显示,不同产地菟丝草中黄酮类成分含量差异明显,精密度、重复性、稳定性RSD均小于3%,平均加标回收率大于95%,为菟丝草的质量标准研究提供了参考依据。

摘要译文

关键词：

菟丝草; 化学成分; 生物活性; 成分分析; 分离纯化

学位年度：

2022

学位类型：

硕士

学科专业：

有机化学

中图分类号：

R284.1[化学分析与鉴定]

学科分类号：

1005[中医学];100803[中药鉴定学];100804[中药化学];100805[中药分析学]

D O I：

10.27746/d.cnki.gkssf.2022.000223