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藿香内生真菌分离纯化及其次级代谢产物乙酸乙酯部位生物活性研究认领

被引量： 1

作者：

张明婉

学位授予单位：

兰州理工大学

摘要：

近年来的研究发现,药用植物内生真菌是获得新的天然产物及开发新药的潜在资源,具有重要的研究和开发价值,已成为植物微生物学、植物医学、植物育种学、中药学及药用植物学等多种学科的研究重点。甘肃省药用植物分布广泛、资源丰富、种类繁多。关于各种药用植物化学成分的相关研究很多,但药用植物内生真菌的相关研究报道鲜少,因此,本论文以甘肃省道地药材藿香作为研究材料,对藿香内生真菌、及其次级代谢产物的抗氧化活性和化学成分等方面进行研究,研究内容及结果如下:1.藿香内生真菌的分离纯化:采用组织切块法,从药用植物藿香（Agastache rugosa）的根和叶中共分离得到11株内生真菌,其中根中获得5株,分别是HXG-1HXG-5,叶中获得6株,分别为HXY-2HXY-7,根据其形态及显微观察进行初步鉴定,分别属于青霉属（Penicillium sp.）、单端孢霉属（Didymopsis sp.）、链格孢属（Alternaria sp.）、瘤座霉属（Tubercularia sp.）和匐柄霉属（Stemphylium sp.）5个属,其中,匐柄霉属（Stemphylium sp.）为优势菌属。2.抗氧化活性评价:对来自藿香根和叶内生真菌的44份样品以及本实验室现有的藿香花部位内生真菌的52份样品、兰州百合根和鳞茎部位内生真菌的32份样品,对以上128份样品用TLC-DPPH法进行抗氧化活性评价。阳性对照的斑点设定为100%,结果显示:在藿香根和叶部位的内生真菌的44份样品中共有7份呈现明显的抗氧化活性,其中Y-2A的抗氧化活性最强,将其抗氧化斑点灰度值百分比为124.67%,其抗氧化活性强于阳性药Vc,其他6份分别为Y-6A75.51%、Y-5A 26.59%、G-1A 20.21%、Y-5C 17.30%、Y-3A 11.77%和G-4A 11.66%;藿香花部位内生真菌的52份样品中共有9份具有明显抗氧化活性,其中H-9A的抗氧化活性最强,其灰度值百分比为70.15%,其余8份分别是H-13A 48.84%、H-7A 46.45%、H-12A 40.04%、H-11A 31.08%、H-4A 18.84%、H-9B 16.94%、H-7B 15.24%、H-7C 9.21%;兰州百合根和茎部位内生真菌的32份样品中,有6份样品表现出抗氧化活性,活性最高的为BHJ-1A,其灰度值百分比为18.13%,其余分别为BHJ-1-1A 16.71%、BHG-9A 13.63%、BHJ-2A 11.04%、BHJ-5B 7.37%、BHG-5A 6.68%。（A-乙酸乙酯部位,B-正丁醇部位,C-乙醇部位）3.化学成分研究:对抗氧化活性最强的菌株HXY-2进行大量发酵,分离菌丝体和发酵液,并用乙酸乙酯对发酵液进行萃取,得乙酸乙酯提取物。上述样品经过硅胶柱层析、凝胶柱层析、TLC薄层层析等多种色谱方法,从内生真菌HXY-2次级代谢产物乙酸乙酯提取物中得到一个单体化合物,通过单体化合物的理化性质以及核磁共振氢谱、核磁共振碳谱、质谱等现代波谱学手段对其结构进行鉴定,化合物的鉴定仍在继续,由于时间关系剩余部位的分离、化合物结构鉴定和单体化合物生物活性测定将在后续工作中进行。4.菌种鉴定:通过形态学特征结合分子生物学方法,对抗氧化活性最优的菌株HXY-2进行鉴定,该菌株鉴定为链格孢属（Alternaria sp.）真菌。

摘要译文

关键词：

藿香; 内生真菌; 抗氧化活性; 生物自显影; 化学成分

学位年度：

2019

学位类型：

硕士

学科专业：

制药工程（专业学位）

导师：

马建苹

中图分类号：

R915[药物生物学]

学科分类号：

070306[化学生物学];100603[中西医结合药学];100705[微生物与生物技术药物学]