肉苁蓉苯乙醇苷对APP/PS1双转基因AD模型小鼠神经保护作用及其机制研究-文献详情-维普官网

文献检索

任意字段

文献信息

任意字段
主题词
篇关摘
篇名
关键词
摘要
作者
第一作者
作者单位
刊名
中图分类号
学科分类号
DOI
基金

智能检索

高级检索

检索历史

肉苁蓉苯乙醇苷对APP/PS1双转基因AD模型小鼠神经保护作用及其机制研究认领

被引量： 2

作者：

居博伟

学位授予单位：

新疆医科大学

摘要：

目的:1.研究肉苁蓉苯乙醇苷对APP/PS1双转基因AD模型小鼠行为和学习记忆能力的影响。2.考察肉苁蓉苯乙醇苷对AD模型小鼠Aβ聚集的影响。3.探讨肉苁蓉苯乙醇苷经胰岛素信号转导通路拮抗AD的作用机制。4.优化构建基于Aβ假说和氧化应激假说的2种AD体外细胞模型,验证肉苁蓉苯乙醇苷对其损伤的保护作用。方法:1.采用APP/PS1双转基因小鼠及同窝野生型C57小鼠为在体实验研究平台,将转基因小鼠随机分为正常组,模型组,多奈哌齐组（剂量为0.65 mg/kg）,肉苁蓉苯乙醇总苷高、中、低剂量组（剂量分别为250、125、62.5 mg/kg）,肉苁蓉毛蕊花糖苷剂量组（125 mg/kg）,每组10只,于6月龄时对小鼠分别实施灌胃治疗,连续给药3个月,模型组和正常组给予等体积双蒸水。运用纸巾筑巢法、Morris水迷宫法和跳台法检测模型小鼠行为和学习记忆能力,评价肉苁蓉苯乙醇苷对AD模型小鼠认知功能的影响。2.采用HE染色法观察脑部海马病变,免疫组化法和Western-blot法检测关键靶标Aβ1-42和Aβ1-40蛋白表达,推断肉苁蓉苯乙醇苷对APP/PS1双转基因小鼠Aβ的影响。3.运用免疫组化法和Western-blot法,考察肉苁蓉苯乙醇苷对胰岛素信号通路中InR、IRS-1、IGF-1R、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT等上下游相关蛋白表达水平的影响,从而评价其对胰岛素信号通路的调节作用。4.以PC12细胞为模型载体,选择神经毒性最强的Aβ1-42蛋白片段和最具代表性的H2O2作为诱导因素优化构建2种AD离体实验研究模型,采用MTT法测定细胞存活率,酶标法测定LDH渗漏率,TBA法测定MDA含量,考察肉苁蓉苯乙醇苷对模型损伤的保护作用。结果:1.筑巢实验结果表明,与模型组相比,肉苁蓉苯乙醇苷给药组随剂量的增加,小鼠筑巢分数显著提高。Morris水迷宫结果显示,与模型组相比,肉苁蓉苯乙醇苷干预组小鼠逃避潜伏期明显缩短,目标象限滞留时间明显增加（p<0.05）,小鼠游泳轨迹则多呈直线型或趋向型,小鼠穿越平台次数明显增加（p<0.05）。跳台实验结果发现,与模型组相比,肉苁蓉苯乙醇苷给药组小鼠跳台错误次数显著降低（p<0.05）。2.肉苁蓉苯乙醇苷能够改善APP/PS1双转基因小鼠海马神经元的损伤;免疫组化结果表明,与模型组相比,多奈哌齐组、肉苁蓉苯乙醇总苷各剂量组和毛蕊花糖苷干预组小鼠海马CA1区Aβ1-42、Aβ1-40阳性细胞数显著减少（p<0.05）;Western-blot法结果表明,各蛋白表达结果与免疫组化结果相符。3.免疫组化结果表明,与模型组相比,多奈哌齐组、肉苁蓉苯乙醇苷干预组小鼠海马CA1区InR、IRS-1、IGF-1R阳性细胞数显著减少（p<0.05）。Western-blot结果表明,与模型组相比,多奈哌齐组、肉苁蓉苯乙醇苷干预组小鼠海马CA1区InR、IRS-1、IGF-1R蛋白表达量明显下调（p<0.05）,PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达量明显上调（p<0.05）。4.Aβ1-42损伤模型最佳损伤条件为0.5μM造模浓度损伤48 h,H2O2损伤模型最佳损伤条件为以PBS为溶媒、25μM造模浓度损伤24 h;与模型组相比,肉苁蓉苯乙醇苷干预组可使细胞存活率明显升高,LDH渗漏率减少,MDA含量降低（p<0.05）。结论:1.肉苁蓉苯乙醇苷能够明显改善APP/PS1双转基因模型小鼠的认知功能障碍。2.肉苁蓉苯乙醇苷通过减少模型小鼠海马中Aβ1-42、Aβ1-40的生成,从而影响Aβ级联反应以保护神经元,发挥拮抗AD的作用。3.肉苁蓉苯乙醇苷通过调控通路上游及下游关键靶点,改善胰岛素信号通路转导障碍,调节脑能量代谢,最终发挥神经保护作用。本研究从细胞分子水平、整体动物层面探讨了肉苁蓉苯乙醇苷抗AD具体作用机制,为开发以苯乙醇苷为母核结构的肉苁蓉抗AD新药奠定研究基础。4.2种AD离体实验模型各有优劣,肉苁蓉苯乙醇苷表现出明显的损伤保护作用,印证β-淀粉样蛋白和氧化应激两大经典AD学说的同时,表现出潜在的抗AD活性。

摘要译文

关键词：

肉苁蓉苯乙醇苷; APP/PS1双转基因小鼠; AD; Aβ; 胰岛素信号通路

学位年度：

2017

学位类型：

硕士

学科专业：

药学（专业学位）

导师：

杨建华

中图分类号：

R285.5[中药实验药理]

学科分类号：

100505[临床中药学];100805[中药分析学];100806[中药药理学];100808[临床中药学]

D O I：

10.27433/d.cnki.gxyku.2017.000036