垫状卷柏(Selaginella Pulvinata)为卷柏科(Selagin ellaceae)卷柏属(Selaginella)植物中的一种,具有降血糖、抗病毒、抗肿瘤、止血和免疫调节的作用,我国民间常用其治疗高血糖、癌症等疾病。翻白草(Potentilla Disclor Bunge)是蔷薇科(Rosaceae)委陵菜属(Potentill)多年生草本植物,其性平,味甘、微苦。具有止血止痢、清热解毒、消肿的功效。现代医学研究显示翻白草有止泻、降血糖、抗肿瘤的作用。卷柏中的selaginellin类化合物是目前仅在卷柏属植物中发现的新型炔酚骨架类化合物,但该类化合物结构相近较难分离。翻白草中含鞣质较多,难以将其除去,因而影响分离。本课题将传统分离手段与LC-MS和制备高效液相色谱技术结合,以期从卷柏和翻白草中快速高效制备目标化合物,为其药理活性研究和中药现代化发展奠定基础。将垫状卷柏用95%乙醇提取,经有机溶剂萃取、硅胶柱层析、大孔树脂分离,利用质谱引导的pHPLC技术制备目标组分,得到4个双黄酮类化合物(SP01-SP04)和7个炔酚类化合物(SP05-SP11),通过核磁共振、质谱等波谱分析鉴定分别为:扁柏双黄酮(hinokiflavone, SPO1)、异柳杉双黄酮(isocryptomerin, SP02)、苏铁双黄酮(sotetsuflavone, SP03)、穗花杉双黄酮(amento flavone, SP04)、selaginellin (SP05)、 selaginpulvilin A (SP06)、selaginpulvilin B (SP07). selaginellin O (SP08)、selaginellin E (SP09)、selaginellin A (SP10)、selaginellin B (SP11)。对干燥的翻白草全草进行化学成分研究,用聚酰胺柱层析、硅胶柱层析、重结晶、制备高效液相色谱等方法分离纯化得到6个化合物(PD01-PD06),通过核磁共振、质谱等波谱分析方法解析,鉴定6个化合物分别为:kaempfero1-3-0-(6"-O-E-p-coumaroyl)-β-D-glucopyranoside (PD01)、芹菜素(apigenin, PD02)、山楂酸(maslinic acid, PD03)、3'-甲氧基鞣花酸-4-0-β-D-葡萄糖苷(3'-O-methylellagic acid-4-O-β-D-glucopyranoside, PD04)、β-胡萝卜苷(β-daucosterol, PD05)、芹菜素-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷(apigenin-7-O-β-D-glucuronoside, PD06),其中化合物PD04是首次从翻白草中分离得到。采用MTT法对分离得到的化合物SP01-SP11进行体外抗人非小细胞肺癌细胞(NSCLC) H322增殖活性筛选,结果表明除化合物SP04和SP07外其余化合物均对人非小细胞肺癌细胞H322有抑制活性,其中化合物SP03和SP10抑制作用较强,IC50值分别为16.70μmol/L和9.54 μmol/L。 摘要译文
垫状卷柏; 翻白草; 双黄酮; 炔酚; 制备高效液相色谱
1005[中医学];100803[中药鉴定学];100804[中药化学];100805[中药分析学]