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角果木内生真菌分离、鉴定及其生物活性次生代谢产物研究认领

被引量： 1

作者：

古海刚

学位授予单位：

塔里木大学

摘要：

人们已经从内生真菌中分离到各种各样的生物活性化合物和独特的化学结构,它们在农业、医药和工业中具有较高的开发潜力。海洋微生物作为一个重要的组成部分,海洋真菌代谢产物的多样性越来越被人们认可和接受。红树林真菌作为第二个最大的海洋真菌生态群,人们已经意识到,它们在红树林适应性方面具有非常重要的作用,且在新产品的筛选中他们也被认为是很有前途的来源。目前为止,有关中国红树植物角果木(Ceriops tagal)内生真菌的研究还鲜有报道。本研究以角果木为材料,从其根、叶、枝中共分离得到95株内生真菌,并对所分离得到的内生真菌进行初步形态学鉴定和抗菌活性筛选。对其中活性比较强的J3和J62菌株,在次生代谢产物的分离鉴定与活性筛选等方面做了较为系统的研究。对中国红树植物角果木中分离得到95株内生真菌,依据其显微特征和菌落形态,将其中94株真菌归为半知菌类,即产孢的28株鉴定为13个属,其中青霉属(Penicilliumsp.)、镰孢霉属(Fusarium sp.)和枝顶孢霉属(Acremonium sp.)为优势属,剩下未产孢的66株真菌暂归为无孢菌群,还有1株属于担子菌纲。结果表明,中国红树植物角果木树叶的真菌在种群、数量及其组成方面与根、枝相比存在较大差异,此结果表明角果木内生真菌对其宿主植物具有一定的组织专一性。对95株角果木内生真菌进行了抗菌活性和抗肿瘤筛选。结果显示,有7株具有抗金黄色葡萄球菌的活性,3株具有抗MASR的活性,有8株内生真菌至少对一种指示瘤株具有细胞毒活性,6株内生真菌对烟草青枯病原菌有抑制作用。这表明角果木内生真菌是寻找有价值的生物活性成分的潜在资源,其生物活性成分值得进一步研究。采用多种柱色谱技术对化合物进行分离纯化,通过理化性质及现代波谱技术(MS, IR, UV,1D-和2D-NMR等)鉴定化合物的结构,经MTT法进行体外细胞毒活性筛选及滤纸片法进行抗菌活性测试。从角果木叶片内生真菌J3发酵液中共分离得到11个化合物,分别是：2a-hydroxylxylaranol B (1),4β-hydroxylxylaranol B (2),1,3,5-trihydroxy-4-methoxy-xanthone(3), dihydropenicillic acid (4),1-methyl emodin (5),3,4-seco-sonderianol (6), cyclo(L-prolinyl-L-tyrosine)(7),2'-deoxythymidine (8),(3S,20S)-20-(propylamino-methyl)-pregn-7-en-3-ol (9), quinoline (10), uracil(11)。从内生真菌J62发酵液中共分离鉴定了10个化合物,分别为similin B (12), trans-cinnamicacid (13),3,4-dimethoxybenzyl alcohol (14),2-[(3,4-dimethoxyphenyl)methyl]-4,5-dimethoxy-benzen-emethanol (15), coibanol C(16), uridine(17),5,8-epidioxy-5a,8a-ergosta-6,22E-dien-3b-ol(18), stigmasta-7,22-diene-3b,5a,6a-triol (19), hymatoxin C (20)知crispin A (21).其中,化合物1和2为新的愈创木烷型倍半萜,化合物9为新天然产物；所有化合物均为首次从该角果木内生真菌中分离得到。采用MTT法测定化合物的细胞毒活性,结果显示化合物3,6,7,12和14对人慢性髓原白血病细胞K562显示有生长抑制活性,化合物6对人肝癌细胞BEL-7402、人胃癌细胞SGC-7901和人慢性髓原白血病细胞K562三种指示瘤株均有细胞毒活性。采用滤纸片琼脂扩散法测定化合物的抗菌活性,结果显示化合物3,4,5,6,13,14和20具有抗金黄色葡萄球菌活性,化合物7,13和14具有抗白色念珠菌的活性。

摘要译文

关键词：

角果木; 内生真菌; 次生代谢产物; 结构鉴定; 抗菌活性

学位年度：

2013

学位类型：

硕士

学科专业：

生物化学与分子生物学

导师：

白红进

中图分类号：

Q946[植物生物化学]

学科分类号：

071002[植物学]