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茯苓性不亲和模式的初步研究认领

被引量： 15

作者：

孟虎

学位授予单位：

华中农业大学

摘要：

茯苓[Wolfiporia cocos (Schwein.) Ryvarden&Gilb.]是我国传统的药材之一,属于多孔菌科(Polyporaceae)茯苓属(Wolfiporia),以其干燥的菌核入药,在中药炮制中配伍率极高。茯苓基础研究严重滞后,茯苓性模式及生活史目前仍无定论,致使茯苓育种仍停留于从野生或驯化菌株中进行选择的水平,同质化现象严重,生产上常因菌种退化造成重大的经济损失。究其原因,一是茯苓子实体形成极具偶然性,易受菌株特性和培养条件的影响；二是茯苓菌丝细胞多核且无锁状联合,不同核相的菌丝在形态上基本相似,无法从形态上加以区分,也缺少有效的检测技术手段。本人在实验室条件下对茯苓菌丝体进行了子实体诱导试验,对形成的子实体进行了超微结构观察,在此基础上,以栽培菌株L的1l株原生质体再生菌株及多个单孢菌株为材料,通过系列配对和结实试验,对茯苓的性模式进行了探讨。在茯苓子实体诱导试验中,通过适宜温湿度条件下的长时间培养、光照诱导及通过转接处理的损失诱导的方法诱导茯苓子实体的形成。结果表明,武汉地区在4、5月份的时间段室温(温度范围20℃.30℃)培养茯苓子实体,子实体的形成随机性较强,形成几率较低；采用光照诱导法,黑暗培养一段时间后,再进行光暗交替培养,可提高茯苓子实体形成率；损伤诱导法可控性较强,菌株L经30d以上的黑暗培养,再将其转入新的培养基中进行光暗交替培养,子实体形成的几率较高。在茯苓子实体超微结构观察试验中,进行了冷冻切片、扫描电子显微镜和透射电子显微镜观察。结果显示,茯苓子实体外表面由担子层覆盖,内部为致密的菌髓,菌髓细胞均含有]-2个大囊泡,存在二叉分支结构。担子由菌丝顶端细胞形成,顶端细胞无色透明,紧密排列,菌丝排列与担子层近垂直。其担子果为裸果型,子实层为两侧型,绝大多数担子上着生4个担孢子,有极少数担子上着生3个担孢子。担孢子着生处有缢缩,担孢子发育不同步。在配对试验及结实试验中,以茯苓菌株L、菌株L的ll株原生质体再生菌株及52个菌株L的单孢分离菌株为试验材料,进行了菌株L原生质体再生菌株与菌株L单孢菌株之间的对峙培养试验、单孢菌株与其亲本菌株L的对峙培养试验、单孢菌株间的配对试验、以及表现为可和谐生长的单孢配对交接处菌丝体与菌株L及两个亲本单孢菌株的对峙培养试验。综合分析以上单孢配对和体细胞不亲和反应类型,选取B18和B20这2个典型可配对成功的菌株作为测试菌株,对50个单孢菌株的交配型进行了鉴定,结果表明,茯苓单孢菌株有2种不同交配型因子,经x2验证,2种不同交配型因子单孢菌株数量比例符合1：1。进一步以单孢菌株及单孢配对交接处菌丝体为材料,进行了子实体诱导试验,结果表明,52个单孢菌株在3个月内均未形成子实体,而从推测发生融合了的部分单孢配对菌丝体上诱导出了子实体。由此推测茯苓的性模式为二极性异宗结合菌。

摘要译文

关键词：

茯苓; 子实体诱导; 超微结构观察; 配对试验; 二极性异宗结合

学位年度：

2012

学位类型：

硕士

学科专业：

特种植物育种与栽培

导师：

边银丙

中图分类号：

S567.32;S567.3[菌类⑨]

学科分类号：

0901[作物学];100810[分子生药学]

D O I：

10.7666/d.Y2162095