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益智复方汤活性物质基础研究认领

被引量： 3

作者：

孙连娜

学位授予单位：

第二军医大学

摘要：

益智复方汤主要是由何首乌、红参、淫羊藿3味药材按一定比例合煎而得，为临床验方，具有益肾助阳，补气安神，益智养精之功效。本课题采用小鼠Y型电迷宫法，应用东莨菪碱学习记忆障碍模型，对益智复方汤防治老年性痴呆活性部位进行了跟踪筛选，合并利用硅胶、大孔树脂、sephadexLH20、聚酰胺、反相硅胶柱层析、中压柱及HPLC分离手段，从益智复方汤二氯甲烷萃取后水液大孔树脂10％、30％、50％、70％部分中分离得到31个单体化合物（6-21，24-38），应用理化常数测定和光谱(UV，IR，MS，1H-NMR，13C-NMR，2D-NMR)分析技术鉴定了其中30个化合物，主要为蒽醌类、二苯乙烯苷类、人参皂苷类、黄酮类成分，其中1个新化合物，命名为淫羊藿苷A（icariin A，34），其余化合物均为首次从益智复方汤中分得；此外尚从益智复方汤二氯甲烷萃取部位首次分离得到7个单体化合物（1-5，22，23）；化合物结构分别为：大黄素（emodin，1）、大黄素甲醚（physcion，2）、大黄酚（chrysophanol，3）、β-谷甾醇（β-sitosterol，4）、胡萝卜苷（β-sitosterol-3-O-β-D-glucopyranoside，5）、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷（physcion-8-O-β-D-glucopyranoside，6）、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷（emodin-8-β-D-glucopyranoside，7）、2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷（2，3，5，4′-tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glucopyranoside，8）、人参皂苷Rb1（ginsenoside Rb1，9）、人参皂苷Rb2（ginsenoside Rb2，10）、人参皂苷Rb3（ginsenoside Rb3，11）、人参皂苷Rc（ginsenoside Rc，12）、人参皂苷Rd（ginsenoside Rd，13）、人参皂苷Re（ginsenoside Re，14）、人参皂苷Rf（ginsenoside Rf，15）、人参皂苷Rg1（ginsenoside Rg1，16）、人参皂苷Rg2（ginsenoside Rg2，17）、人参皂苷Rg3（ginsenoside Rg3，18）、20（R）-人参皂苷Rg3(20（R）-ginsenoside Rg3，19)、人参皂苷Rh1（ginsenoside Rh1，20）、人参皂苷Rh2（ginsenoside Rh2，21）、原人参三醇（panaxatriol，22）、原人参二醇（panaxadiol，23）、淫羊藿苷（icariin，24）、淫羊藿次苷Ⅰ（icariside Ⅰ，25）、淫羊藿次苷Ⅱ（icariside Ⅱ，26）、芦丁（rutin，27）、朝藿定C（epimedin C，28）、朝藿定B（epimedin B，29）、朝藿定A（epimedin A，30）、箭藿苷A（sagittatoside A，31）、箭藿苷B（sagittatoside B，32）、2″-O-α-L-鼠李吡喃糖基淫羊藿次苷Ⅱ（2″-O-α-L-rhamnosyl-icariside Ⅱ，33）、淫羊藿苷A （icariin A，34）、α-D-葡萄糖（α-D-glucose，35）、对甲氧基肉桂醛（p-methoxylcinnamic aldehyde，36）。新化合物34结构为5-羟基-4′-甲氧基-6′，6″-二甲基吡喃环（2″，3″：7，8）-黄摘要第二军医大学酮一3一。一a一L一鼠李糖（l*2）一a·L·鼠李糖普(5一hydroxy一4几methoxy一6，， 6，，一dimethylPyrano（2，，，3”:7，8）一flavone一3一O一a一L一tharnnoPyranosyl（l、2）一a一L一rhamnoPyranoside)。通过促智活性跟踪筛选并结合HPLC一DAD一MS监测，确定益智复方汤水煎后经大孔吸附树脂70%乙醇洗脱部位为活性部位，其中主要的活性成分为来源于何首乌中的二苯乙烯类，红参中的人参皂昔类，淫羊蕾中的黄酮类化合物，具有较强的防治老年性痴呆的活性。利用HPLC一DAD一MS技术对益智复方汤中有效成分进行了定性定量分析，应用Diamonsil C18，10林，250‘4.smm色谱柱，选择乙睛:水:甲酸系统梯度洗脱，对30 余种成分进行了定性定量分析，各待分析化学成分分离度较好，具有较高的精密度和准确度。运用该色谱条件监测单味药材以及合煎药材在煎煮过程中各成分的动态变化，考察益智复方汤煎煮过程中化学动力学特征。结果显示，益智复方汤煎煮过程中各成分种类无明显差异，未发现有新成分产生，仅表现为各成分间量的相对变化。活性成分二苯乙烯普类随着水煎煮的时间推移，含量略有降低，但其过热后异构化的产物含量升高，根据DAD一MS提供的信息我们推测了该异构化产物的结构;红参和淫羊蕾药材单煎时，随着时间推移，次昔含量稍有增加;红参和淫羊蕃两种药材合煎及三种药材合煎与各单味药材单煎相比人参皂昔类和淫羊蕾黄酮类成分间发生明显水解转化人参皂昔中二醇型皂昔微量成分Rg3含量显著升高，人参三醇型皂昔RgZ、助l含量也呈上升趋势，推测淫羊蕾黄酮提供的弱酸环境加速了人参皂昔间的转化，淫羊蕾黄酮在煎煮过程中随时间延长箭蕾普A、箭蕾昔B、鼠李糖基淫羊蕾次昔n、淫羊蕾次昔n煎煮后含量呈上升趋势。总的来说，人参皂昔和黄酮昔表现为四糖和三糖昔含量降低，双糖和单糖昔含量增加，说明在合煎后多糖昔更易水解。淫羊蕾黄酮和人参皂昔在加热煎煮过程中具体如何转化，能否定量转化，转化规律是什么，这些转化的发生与药效间的联系规律，尚需进一步研究。何首乌中二苯乙烯普类化合物含量在何首乌药材单煎与合煎中没有显著改变，合煎时对红参中人参皂普和淫羊蕾黄酮类成分也无明显影响，在实验过程中我们也证实二苯乙烯昔类成分过热易转化，故在制备工艺中我们选用了渗涟法，以避免加热煎煮带来的损失;红参和淫羊蕾药材二者合煎与益

摘要译文

关键词：

益智复方汤; 活性成分; 二苯乙烯苷; 人参皂苷; 黄酮苷; 促智活性; HPLC-DAD-MS; 制备工艺

学位年度：

2004

学位类型：

博士

学科专业：

生药学

导师：

张汉明陈万生徐江平

中图分类号：

R284.1[化学分析与鉴定]

学科分类号：

1005[中医学];100803[中药鉴定学];100804[中药化学];100805[中药分析学]

D O I：

10.7666/d.y657684