文献检索结果-维普官网

二次检索

在结果中检索

在结果中去除

暂无数据

共 4 条结果，以下是1 - 4条

1 / 1

全选已选:0 清除

批量下载

批量引用

相关度时效性被引量

1. 认领

【期刊论文】 • 龚晓红 ¹王富珍 ²吴疆 ¹刘立荣 ¹ +7位作者 • 《中国计划免疫》 • 2007年第4期 316 - 318，共3页

机构： [1] 北京市疾病预防控制中心[2] 中国疾病预防控制中心免疫规划中心[3] 北京市朝阳区疾病预防控制中心 +5个机构

摘要：目的评价不同种类国产基因重组乙型肝炎(乙肝)疫苗在不同人群中的免疫原性。方法采用血清流行病学调查方法,对不同种类国产基因重组乙肝疫苗的免疫原性进行评价。结果大学生接种不同种类国产基因重组乙肝疫苗后,乙肝病毒表面抗体阳性率为91.60%～98.72%,平均95.50%。大连汉信生物制药有限公司生产的重组乙肝疫苗(汉逊酵母)(大连疫苗)的抗体阳性率高于深圳康泰生物制品有限公司生产的重组乙肝疫苗(酵母)(康泰疫苗),四种疫苗[大连疫苗、康泰疫苗、北京天坛生物制品有限公司生产的重组乙肝疫苗(酵母)(天坛疫苗)、华北制药集团金坦生物制药有限公司生产的重组乙肝疫苗(中国仓鼠卵巢细胞)(华北疫苗)]免疫后,抗体几何平均浓度(GMC)差异有显著的统计学意义(F=36.54,P<0.05),即华北疫苗和大连疫苗免疫后抗体GMC均高于天坛疫苗和康泰疫苗,并且华北疫苗免疫后抗体GMC还高于大连疫苗。儿童乙肝疫苗加强免疫后抗体阳转率为96.60%～100.00%,平均98.31%,且加强免疫后抗体GMC差异无显著的统计学意义。结论不同种类国产基因重组乙肝疫苗应用在不同人群均能获得较好的免疫原性。成人在大剂量乙肝疫苗全程接种后,能获得较高的抗体阳转率和GMC。完成乙肝疫苗基础免疫、但抗体消失的儿童,小剂量加强免疫1针后也能获得较高的抗体阳转率和GMC,儿童体内存在良好的免疫记忆反应,一般不需要加强接种。

摘要译文

关键词: 基因重组乙型肝炎疫苗 ；免疫原性

引用

被引量 28

2. 认领

【期刊论文】 • 梁争论 ¹李河民 ²荆庆 ²李艳平 ² +12位作者 • 《医学研究通讯》 • 2001年第8期 8 - 10，共3页

机构： [1] 北京医科大学[2] 中国药品生物制品检定所

摘要：为了解不同类型乙肝疫苗免疫学特性,提供选择生产路线的依据,对基因工程乙型肝炎疫苗的免疫原性和免疫效果进行了研究。实验结果表明:不同来源乙肝抗原结构不同,诱导的细胞免疫和体液免疫水平也有所不同。无糖基化的酿酒酵母抗原诱导Th1细胞反应能力强于其它种类糖基化抗原,对CHO疫苗进行去糖基化后,细胞免疫水平增强,与单克隆抗体反应的表位密度发生改变。在严格控制抗原量、孕妇的HBeAg水平和检测试剂等条件下,对518名免疫14批乙肝疫苗的新生儿进行母婴传播阻断研究,同时对2291名免疫21批乙肝疫苗的小学生进行1～7年的免疫观察,证明国产乙肝酵母疫苗母婴传播阻断保护率达到80.56％～92.59％,与国外酵母疫苗相同,5μg国产酵母疫苗虽然剂量小,诱导的抗体较低,但保护效果高于其他糖基化疫苗,与血源疫苗30μg相当,说明可能细胞免疫起主要作用。国产酵母疫苗抗体阳转率在免后5年时与Merck疫苗水平相当,但低于10μg Amgen和血源疫苗。建议尽早加强免疫。乙肝疫苗免疫失败与 HBV S抗原变异、孕妇 HBV DNA含量高等因素有关。

摘要译文

关键词: 基因工程疫苗；免疫原性 ；免疫效果；乙型肝炎 ；乙肝疫苗

智能阅读

PDF下载

引用

被引量 6

3. 认领

【学位/博士】 • 倪红霞 • 第二军医大学 • 导师：曹广文 ; 许国章 • 2013年

摘要：乙肝病毒(HBV)慢性感染是我国主要公共卫生问题。在HBV流行区，慢性乙肝主要由于母婴传播引起。婴儿期感染HBV90%发展成慢性感染，最终约25%又进展为肝硬化和肝细胞癌。1992年开始我国将乙肝疫苗接种纳入计划免疫管理。由于疫苗免疫的普及和降低婴幼儿HBV暴露等干预措施的实施，人群HBsAg阳性率明显下降。我国目前在新生儿中推行的乙肝免疫方案为：新生儿出生后24小时内尽早接种乙型肝炎疫苗，按照0、1、6月程序全程需接种3针；对HBsAg阴性母亲的新生儿可用5μg或10μg酵母或10μg中国仓鼠卵母细胞(CHO)乙型肝炎疫苗免疫；对HBsAg阳性母亲的新生儿，在出生后24小时内尽早接种乙型肝炎高效价免疫球蛋白(HBIG)，剂量不小于100IU，同时接种10μg重组酵母或20μg CHO乙型肝炎疫苗，在1个月和6个月时再各接种1剂乙型肝炎疫苗，可显著提高母婴传播阻断的效果。与大多数国家不同，多年来我国只生产5μg(啤酒酵母)重组乙肝疫苗，我国大部分地区还一直使用低剂量的5μg重组酵母乙肝疫苗，国际上对低剂量疫苗的免疫保护效果较为争议。近年来我国有自主研发的高剂量重组乙肝疫苗上市，局部地区已在所有新生儿中推广使用，但对新剂型疫苗的总体免疫保护效果还缺乏科学的现场考核。现有资料表明，即使是接种高剂量乙肝疫苗或联合接种HBIG，仍有5%左右的HBsAg阳性母亲的新生儿感染HBV。HBV母婴传播途径主要为产前传播(即宫内感染)、产时传播和产后传播，一般认为主动和被动免疫措施对HBV产时传播和产后传播的阻断效果较满意，但对宫内已发生感染的婴儿效果较差。宫内传播是当前乙肝病毒母婴传播的最主要途径，但我们对宫内传播及乙肝疫苗免疫阻断失败的原因和内在机制仍不十分清楚。报道较多的危险因素是母亲HBeAg阳性和HBV DNA高滴度。此外，还可能与疫苗的免疫原性、机体对疫苗的反应性、遗传易感性和病毒变异等多种因素相关。在控制乙肝病毒母婴传播方面还有很多科学问题未得到确切答案。本课题从乙肝病毒宫内传播、病毒变异、新生儿接种不同剂量乙肝疫苗的免疫保护效果三个角度进行研究，为进一步控制乙肝病毒母婴传播提供科学依据。第一部分乙肝病毒宫内感染是母婴传播的主要途径，可能是导致高风险新生儿(母亲HBsAg阳性)出生后乙肝疫苗免疫阻断失败，从而发生HBV慢性感染的主要原因。在上海浦东区的医院产科，对入院生产的HBsAg阳性产妇进行问卷调查，同时采集产妇静脉血及新生儿脐静脉血，并预期随访至儿童完成乙肝疫苗基础免疫(7月龄)后，采集的血标本检测乙肝血清学标志物和HBV DNA定量，并检测母子乙肝病毒全基因序列，明确HBV宫内传播发生率及相关危险因素。对362对入院分娩的HBsAg阳性产妇及其新生儿调查显示，新生儿HBV感染率为8.0%。 HBsAg+/HBeAg+双阳性母亲的新生儿， HBV感染率为20.3%；HBsAg+/HBeAg-单阳性母亲的新生儿，HBV感染率为2.0%，差异有统计学意义(2=36.104, P=0.000)。分析显示，母亲HBV DNA水平与新生儿HBV感染率有剂量反应关系，当母亲HBV DNA大于106copies/mL时，新生儿HBV感染率为23.3%，显著高于母亲HBV DNA小于106copies/mL者的1.9%，差异有统计学意义(2=45.670，P=0.000)。母亲HBeAg与HBV DNA106copies/mL的Kappa一致性为0.864，两指标间存在较强相关性。单因素分析显示，母亲HBeAg阳性新生儿的HBV感染风险OR为12.2(4.5-32.9)，母亲HBV DNA高水平(106copies/mL)新生儿的HBV感染风险OR为15.4(5.7-41.7)，不同分娩方式与新生儿HBV感染无相关性(P=0.246)。小样本量随访结果显示，完成乙肝疫苗基础免疫后，3例宫内感染新生儿，1例免疫阻断失败(HBsAg阳性)；1例对疫苗无应答(抗-HBs阴性)。而39例非宫内感染新生儿均免疫成功。提示HBV宫内感染是疫苗免疫失败的重要原因。 23对发生HBV宫内感染母婴的乙肝病毒全基因序列分析显示，各母子对病毒全基因序列同源性在99.4%-100%，15对母子(65.2%)病毒序列完全一致。按不同基因型分别与B2和C2野生型乙肝病毒株序列进行比较，母亲感染的B和C基因型突变株与野生株乙肝病毒均可通过宫内传播，未发现有宫内传播优势的特异突变位点。第二部分对我国获批准用于新生儿免疫的两种重组乙型肝炎疫苗，10μg/0.5mL剂型重组(汉逊酵母)乙肝疫苗和5μg/0.5mL剂型重组(啤酒酵母)乙肝疫苗，在2760名新生儿基础免疫中应用的免疫原性及保护效果进行社区为基础的观察研究。 HBsAg阴性母亲所生的(低风险)新生儿分别按0-1-6程序全程接种5μg重组乙肝疫苗(A组，共1299例)和10μg重组乙肝疫苗(B组，共1122例)，及HBsAg阳性母亲所生的(高风险)新生儿按0-1-6程序全程接种10μg重组乙肝疫苗，并在出生时自愿联合接种HBIG(C组，339名)，在乙肝疫苗全程免疫后1-2个月，3组的抗-HBs阳转率分别为99.61%，99.73%和97.34%，抗-HBs抗体的几何平均浓度(GMC)分别为714.79mIU/mL，2422.47mIU/mL和1271.77mIU/mL。两种剂量重组乙肝疫苗在低风险新生儿中使用的抗-HBs抗体阳转率相当，但接种10μg重组疫苗较5μg重组疫苗的抗-HBs抗体应答水平高。随访观察至免后2年，3组抗-HBs阳性率出现差异(2=40.470，P=0.000)，分别为72.98%(A组)，85.90%(B组)和79.54%(C组)。3组抗-HBs抗体水平在免疫后1-2月达到高峰，此后均以指数水平快速下降，免后2年3组抗-HBs抗体的几何平均滴度均在50mIU/mL以下。 339例母亲HBsAg阳性的新生儿，其中89.4%(303/339)选择10μg乙肝疫苗联合HBIG接种；全程免疫后1-2个月共有7名儿童HBsAg阳性，乙肝疫苗母婴阻断失败率为2.06%；免疫失败儿童均为HBeAg阳性母亲所生，母亲HBsAg+/HBeAg+双阳性新生儿的免疫失败率为6.67%；母亲HBsAg+/HBeAg-单阳新生儿均未发生免疫失败；两组差异有统计学意义(Fisher’s P=0.000)。母亲HBsAg阳性新生儿乙肝疫苗免疫阻断失败危险因素的单因素分析显示，产妇孕期晚期进行HBIG干预是疫苗免疫失败的危险因素(P=0.013)；母亲HBsAg阳性新生儿单独接种10μg乙肝疫苗的免疫失败率是2.79%，10μg乙肝疫苗联合HBIG接种者的免疫失败率是1.98%，差异无统计学意义（Fisher’s P=0.548），而母亲HBsAg阳性新生儿采用10μg乙肝疫苗联合HBIG接种的抗-HBs抗体GMC为1184.09IU/mL，低于单独接种10μg疫苗者的2331.72mIU/mL，差异有统计学意义(2=6.779，P=0.010)。接种5μg疫苗的低风险儿童，在免疫后2年的抗-HBc阳性率为2.85%，高于接种10μg疫苗组的0.98%(P=0.008)；母亲HBsAg阳性的儿童，免后2年抗-HBc阳转率为4.54%，HBeAg阳性母亲的儿童抗-HBc阳转率更高，提示突破感染与暴露机会和疫苗保护能力均有关。分析6名乙肝疫苗免疫失败儿童及其母亲的的乙肝病毒基因全序列，显示基因型B和C乙肝病毒均可由母婴传播，母子全基因序列同源性为99.38-100%。第三部分对15岁以下HBsAg持续阳性的母子进行问卷调查，同时采集母子配对血清，检测乙肝两对半和HBV DNA定量，用nested-PCR方法分段扩增乙肝病毒全基因序列，直接测序失败样本经TA克隆后再测序，MEGA5.0软件进行序列同源性、基因型和突变分析。 59对7月龄至15岁经母婴传播的乙肝病毒慢性感染儿童与母亲，其中B基因型26对(44.0%)，C基因型33对(56.0%)，母子病毒全基因序列同源性在96.1～100%之间，平均为99.4%。儿童“”抗原决定簇突变率为33.8%，母亲为22.0%，儿童G145R免疫逃逸突变发生率为5.1%，母亲为0%，差异均无统计学意义(P>0.05)。 preS区缺失突变仅在HBV慢性感染母亲中发现，发生率为13.5%(8/59)，儿童中未检测到此类缺失突变(P=0.001)。位于BCP区与肝癌和肝硬化相关的突变在母婴中发生率均较低，未发现母婴传播优势。母亲和儿童均可检测到BCP/PreC/Core区的缺失突变，但突变未出现在配对母子中。综上所述，母亲HBeAg阳性和HBV DNA高水平(106copies/mL)是乙肝病毒母婴传播的危险因素；野生型和突变型乙肝病毒均可通过母婴垂直传播，未观察到突变病毒株有母婴传播优势；我国目前推荐的乙肝免疫方案能有效保护新生儿，阻断乙肝病毒母婴传播；乙肝疫苗普种后出生的HBV慢性感染儿童，以G145R突变为代表的免疫逃逸突变发生率很低，尚未构成公共卫生问题。

摘要译文

关键词: 乙型肝炎病毒；母婴传播；宫内传播；病毒变异；重组乙肝疫苗

引用

被引量 18

4. 认领

【学位/硕士】 • 杨振西 • 安徽大学 • 导师：陈昭烈 • 2013年

摘要： 乙型肝炎是一种严重的全球性疾病,易引发肝硬化和肝癌。目前国内外尚无显著有效的乙肝治疗方法,主要采用预防为主、治疗为辅的方针。自从1981年第一代乙肝疫苗问世至今,乙型肝炎的蔓延得到有效地控制,全球肝癌的发生率下降了75%。目前全球广泛使用的是利用基因工程技术在酵母和哺乳动物细胞中表达的乙肝病毒表面抗原S蛋白(HBsAg)疫苗,接种疫苗后约有10-15%的人群无应答或者低应答,且一般不能诱导细胞免疫应答。研制能克服现有乙肝疫苗缺陷的新型乙肝疫苗已成为一项迫切的研究课题。研究表明,在主蛋白抗原S的基础上增加额外的HBV表面抗原能够增强免疫原性,含前S蛋白的重组乙型肝炎疫苗是第三代乙肝疫苗研发的重点,有望替代现在广泛使用的基因工程疫苗。本研究的研究思路是将乙肝病毒S抗原基因和preS1抗原表位(21-47位氨基酸)基因组合形成融合基因,在CHO细胞中实现S/preS1的稳定高效表达。本研究采用转录水平调控为主、转录后调控为辅的表达载体设计思想,将S/preS1基因插入含有克服位置效应、细胞内源性强启动子及mRNA运输及稳定性调控元件的真核细胞表达载体,成功构建表达乙肝病毒S抗原和preS1抗原表位(21-47位氨基酸)融合蛋白(S/preS1)的真核表达载体HMRCHEF53u/Neo-S/preS1。通过脂质体介导表达载体转染CHO-S细胞,经有限稀释克隆筛选,在96孔板内获得单克隆细胞27株,ELISA检测表明均为阳性单克隆。将单克隆细胞经过24孔板、6孔板传入T25细胞方瓶,再次ELISA检测获得13株较高S/preS1表达水平的单克隆细胞系。对13株细胞系进行无血清悬浮批次培养,最终获得了体外生长性状好、S/preS1表达效率高的重组细胞系10G6。RT-PCR结果显示S/preS1基因在重组CHO细胞中得到表达,Western blot印迹分析证实10G6细胞表达的S/preS1同时保留S和preS1的天然免疫原性。以活细胞密度、S/preS1累计表达量、葡萄糖消耗量及乳酸积累量为观察指标,本研究考察了10G6细胞的生长表达特性及稳定性。有血清培养时10G6细胞的最高活细胞密度达到0.67×105cells/mL,S/preS1累积表达水平达到1.82μg/mL培养终止时葡萄糖剩余4.73mM,乳酸累积量为9.85mM。通过计算得到10G6细胞的比生长速率μ和S/preS1表达速率qS/preS1分别为0.2d-1和1.23μg/106cells/d。无血清培养时10G6细胞的最高活细胞密度达到5.4×106cells/mL, S/preS1累积表达水平达到3.99μg/mL,培养终止时葡萄糖完全消耗,乳酸累积量为8.8mM。通过计算得到10G6细胞的比生长速率μ和S/preS1表达速率qS/preS1分别为1.54d-’和0.88μg/106cells/d。结果表明,10G6细胞在无血清培养时的比生长速率μ高于有血清培养,S/preS1表达速率qS/preS1接近低于有血清培养。由于10G6细胞在无血清培养的活细胞密度明显高于有血清培养,相应地S/preS1累积量也明显高于的在10G6细胞在在有血清培养的水平。在为期约2月的连续15批次无血清培养中,各批次10G6细胞的活细胞密度基本保持在4×106cells/mL以上、活力维持在90%以上,反映10G6细胞表达稳定性的S/preS1值基本稳定在1-1.25mg/L水平,表明10G6细胞在无血清培养中具有良好的细胞生长和稳定的产物表达性状,符合生物技术药物规模化生产细胞系的质量要求。流加培养是当前重组蛋白生产的主流培养模式,流加培养根据细胞对营养物质的不断消耗和需求,在培养过程中流加浓缩的营养液,有效地减缓乃至消除营养限制因素,从而延长细胞培养时间,提高细胞培养密度及细胞表达产物浓度。本研究以活细胞密度、细胞活力和S/preS1表达水平为观察指标,分别考察了包括细胞接种密度、流加培养基选择、流加起始时间、培养温度等重要工艺参数,建立了以CHO CD EfficientFeedTM B为流加培养基、接种密度为3×105cells/mL、流加起始时间为2-3d、每48h按10%培养体积补充流加培养基、累计流加3次(30%培养体积)、起始培养温度为37℃、培养6d后温度下调至32℃、培养持续时间17-20d为主要工艺参数的10G6细胞无血清流加培养工艺。采用所建立的10G6细胞无血清流加培养工艺,不同批次10G6细胞流加培养的活细胞密度达到7-10×106cells/ml、S/preS1的累积浓度达到17-20mg/L,较之于10G6细胞的在温度设置为37℃的无血清培养工艺,10G6细胞无血清流加培养工艺的活细胞密度和S/preS1表达水平约分别提高60%和360%。

摘要译文

关键词: 乙肝病毒表面抗原；PreS1抗原表位；CHO细胞；表达；流加培养

引用

被引量 1