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摘要： 佩兰(Eupatorium fortunei Turcz.)和海南砂仁(Amomum longiligulare T.L. Wu.)分别系菊科(Compositae)泽兰属(EupatoriumL.)和姜科(Zingiberaceae)豆蔻属(Amomum L.)。本课题对佩兰和海南砂仁的提取物进行了化学成分研究。研究过程中运用多种分离手段,如正相硅胶柱层析、凝胶Sephadex LH-20、MCI树脂、制备型HPLC等,并对分离得到的化合物通过各种波谱数据进行结构解析,总共分离鉴定了20个单体化合物。化合物主要结构类型涉及百里酚类、倍半萜类、甾体类、酚酸类、二苯庚烷类和黄酮醇类。
通过对佩兰的化学成分研究,分离鉴定了6个化合物,分别为9-hydroxythymol (PL1)、8,9-dihydroxythymol (PL2)、8-hydroxythymol (PL3)、clovane-2β,9α-diol (PL4)、caryolane-1β,9β-diol (PL5) stigmasta-7,22-dien-3a-ol (PL6),均为已知化合物,其中PL3为首次从该植物中分离得到。
通过对海南砂仁的化学成分研究,分离鉴定了14个化合物,分别为4-(4-hydroxyphenyl)-2-butanone (SR1)、4-methoxybenzoic acid(SR2)、3,5-diacetoxy-1,7-bis(3,4-dihydroxyphenyl)heptane (SR3)、1,7-bis(4-hydroxyphenyl)-5-hepten-3-one (SR4)1,7-bis(4-hydroxyphenyl)-3-heptanone (SR5)3-hydroxy-1,7-bis(4-hydroxyphenyl)heptane (SR6)1-(3,4-dihydroxyphenyl)-7-(4-hydroxyphenyl)-5-hepten-3-one (SR7)、3,5-dihydroxy-1-(3,4-dihydroxyphenyl)-7-(4-hydroxyphenyl)heptane (SR8)3,5-dihydroxy-1-(3,4-dihydroxyphenyl)-7-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl) heptane (SR9)1,5-epoxy-1-(3,4-dihydroxyphenyl)-7-(4-hydroxyphenyl)heptane (SR10)、3,5,7-trihydroxy-4'-methoxyflavone (SR11)、3,5-dihydroxy-7,4'-dimethoxyflavone (SR12)、3,5,3'-trihydroxy-7,4'-dimethoxy flavone (SR13)、sitosterol (SR14)。 SR1-SR14均为首次从该植物中分离得到。
采用DPPH法对分离得到的化合物SR3-SR13进行了清除自由基DPPH的抗氧化活性测试,结果显示：二苯庚烷类化合物抗氧化活性比黄酮醇类化合物强,具邻苯二酚和烷羟基结构的二苯庚烷类化合物抗氧化活性最强,只具邻苯二酚或烷羟基结构的抗氧化活性次之,无邻苯二酚和烷羟基结构的抗氧化活性最弱,因此,邻苯二酚和烷羟基有可能是二苯庚烷类化合物抗氧化活性的有效结构基团。
综上所述,本研究通过对佩兰和海南砂仁化学成分的系统研究,分离鉴定了20个化合物,进一步丰富了佩兰和海南砂仁药用的化学物质基础,并通过DPPH法测试了二苯庚烷类和黄酮醇类的抗氧化活性,为其活性作用的进一步研究与开发提供更多科学依据。
关键词: 佩兰 ；海南砂仁 ；化学成分 ；抗氧化
被引量
13
摘要： 本研究采用组织块法分离内生真菌并对优势菌株进行DNA序列分析,接着采用福林一酚法测定乙酸乙酯萃取的内生菌发酵液总多酚含量,然后采用DPPH自由基清除法测定其抗氧化活性,最后采用气相色谱—质谱联用(GC-MS)对筛选出高活性的萃取物进行化学成分定性定量分析。结果表明,在分离得到的175株海南省油茶内生真菌中优势菌属中有蓝莓枝枯病菌(Neofusicoccum parvum),拟茎点霉属(Phomopsis sp.),桔青霉(Penicillium citrinum),拟盘多毛抱属(Pestalotiopsis disseminate),炭疽菌属(Colletotrichum gloeosporioides),座囊菌纲(Dothideomycetes sp.),硬孔菌属(Rigidoporus vinctus),裂褶菌(Schizophyllum commune),子囊菌(Ascomycota sp.),哈茨木霉(Trichoderma harzianum),白腐菌(Cerrena sp.)。菌株S02、S03、S04、S8、L9和L12的总酚含量(粗提物浓度800μg/mL)分别为11.66 mg GAE/g、11.21 mg GAE/g、12.96 mg GAE/g、8.16 mg GAE/g、11.19 mg GAE/g、13.38 mg GAE/g;菌株S03、S04、S8、L9具有极佳的抗氧化性,在粗提物浓度800μg/mL时清除率分别为88.19%、90.72%、87.34%、90.40%。GC-MS分析菌株S02、S03、S04、S8、L9、L12的发酵产物分别鉴定出22种、16种、29种、20种、28种、25种成分。因此,海南油茶内生真菌的发酵产物中富含生物活性化合物,有望作为医药品、化妆品、保健品的原料,具有较高的研究开发价值。
关键词: 油茶内生真菌 ；福林-酚法 ；总多酚 ；抗氧化活性 ；气相色谱与质谱联用
被引量
8
摘要： 砂仁为姜科植物阳春砂Amomum villosum、绿壳砂Amomumvillosum Var.xanthiondes和海南砂Amomum longiligulare的干燥成熟果实。砂仁作为著名的“四大南药”之一,同时也是一种“药食同源”的食材,在我国主产于广东省、云南省和海南省等地。近年来,随着“健康中国”战略的深入实施,砂仁因其显著的药用价值而逐渐受到越来越多公众的青睐。同时,对其化学成分、药理作用和鉴别方法的研究也得到了学者的广泛关注。砂仁的化学成分相当复杂,主要成分包括乙酸龙脑酯、樟脑和龙脑等挥发性成分,及多糖、多酚和矿质元素等非挥发性成分;砂仁的药理作用广泛,包括胃肠保护、降脂减肥、降血糖、降尿酸、抗氧化、抗炎、抗菌和镇痛等;砂仁的鉴别技术包括显微技术鉴别、分子生物学技术鉴别和电化学指纹图谱鉴别等至关重要,关系到砂仁的品质控制、使用安全性和有效性。然而,近年来较全面地归纳总结砂仁的研究鲜有报道,这限制了砂仁的深入研究和高值化开发利用。文章系统地综述了砂仁的化学成分、药理活性及鉴别的研究进展,并提出了砂仁未来的研究展望。
关键词: 砂仁 ；化学成分 ；药理活性 ；鉴别 ；开发利用
被引量
13
摘要： 目的研究海南砂仁超临界CO_2萃取物中的化学成分。方法采用超临界CO2流体萃取法提取海南砂仁挥发油,并通过气相色谱-质谱联用技术对其成分进行测定,结合计算机检索技术对分离的化合物进行鉴定,同时采用峰而积归一化法确定各成分的相对百分含量。结果从海南砂仁油中共分离出38个组分,鉴定了其中的35种成分,所鉴定的成分占总挥发油成分的95.55%,其中相对百分含量较高的有2-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-3,7-二甲氧基-4H-苯并吡喃-4-酮(17.38%)、顺-9-十八碳烯醛(7.21%)、2-十一碳烯-10-十一碳炔酸酯(6.79%)、E,E,Z-1,3,12-十九碳三烯-5,14-二醇(5.97%)等。结论从海南砂仁萃取物中分离鉴定了35种成分,它们的含量占超临界萃取成分总面积的95.55%。
关键词: 海南砂仁 ；超临界萃取 ；化学成分 ；气相色谱-质谱
被引量
6
摘要： 血竭为名贵中药材。现代药理学研究证明，血竭具有抗氧化、抗细菌、抗炎、活血止血等多种生理活性。血竭主要分布于非洲、澳大利亚和亚洲热带地区，在我国主要分布在云南、广西、海南等地。我国国家标准fWS3—082（z一016）一99（z）1中将百合科龙血树属植物剑叶龙血树Dracaenacochinchinensis（Lour．）S．C．Chen提取的树脂定名为“龙血竭”。龙血竭的化学成分以酚类化合物为特征，酚类成分也是其主要的生理活性成分。迄今已从龙血竭中分离检测出130多种化合物。现将近年来龙血竭化学成分的研究概述如下，旨在为龙血竭新药的研究和开发提供参考。
关键词: 化学成分 ；龙血竭 ；生理活性成分 ；酚类化合物 ；龙血树属植物 ；名贵中药材 ；现代药理学 ；剑叶龙血树
被引量
61
摘要： 目的研究海南臭黄荆叶的挥发油成分及其抗氧化活性。方法分别采用水蒸气蒸馏法、索氏提取法、超声提取法提取挥发油,用峰面积归一法测定样品中各化学成分的质量分数,并用气相色谱-质谱法对其进行鉴定。采用流动注射化学发光法研究了该植物3种提取法获得挥发油的抗氧化抑制率。结果用GC-MS法分析,水蒸气蒸馏法获得的挥发油分离鉴定出48种成分、索氏提取法45种成分、超声提取法38种成分,其中共有成分13种。在抗氧化活性实验中,发现在相同条件下,挥发油的抗氧化活性大小依次为为索氏提取法、超声提取法、水蒸气提取法。结论 3种样品采集方法,获得的海南臭黄荆挥发油成分存在差异,但也有共同特征。相比传统的水蒸气提取法,索氏提取法和超声提取法获得的挥发油得率更高,相应的抗氧化活性也更强。
关键词: 海南臭黄荆 ；挥发油 ；GC-MS ；抗氧化活性
被引量
4
摘要： 为了合理有效的开发和利用热带药用资源海南砂仁,本文通过查阅文献,总结了海南砂仁在化学成分和药理作用方面的研究进展,为探寻其物质基础提供一定的理论依据。海南砂仁的化学成分主要包括挥发油、二苯庚烷和黄酮类化合物,在抗消化性溃疡方面具有良好疗效,此外还具有抗氧化、镇痛等药理活性。本文简要探讨了不同学者所研究的挥发油类成分具有差异的原因。通过总结其药理活性,发现其各个药理活性可能是其抗消化性溃疡的基础。
关键词: 海南砂仁 ；化学成分 ；药理活性
被引量
19
摘要： 目的:对海南砂仁的5个分离部位进行抗氧化活性研究,以明确其抗氧化活性部位。方法:采用系统溶剂法对海南砂仁乙醇提取物进行萃取,依次获得石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取部位;采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和羟基自由基(OH-)清除能力测定法,对5个部位进行体外抗氧化活性评价。结果:海南砂仁5个部位均表现出不同的抗氧化能力,以乙酸乙酯和二氯甲烷部位抗氧化能力最强。两种方法测得的抗氧化活性结果趋势一致,且抗氧化能力与药物浓度呈正相关。结论:海南砂仁不同提取部位抗氧化活性差异可能与其所含抗氧化成分的种类和结构有关。
关键词: 海南砂仁 ；提取部位 ；抗氧化活性 ；1,1-二苯基-2-三硝基苯肼 ；羟基自由基清除
被引量
33
摘要： 黄槿为《全国中草药汇编》收载的两种半红树植物之一,具有清热解毒的功效,在海南黎族聚集地区作为药物使用。有关黄槿的化学成分研究起始于20世纪60年代,至今从中分离得到了大量的三萜、黄酮、倍半萜和酰胺类化合物,其中木栓烷型三萜和高度氧化的倍半萜类成分是该药用植物的特征性成分。药理研究主要集中在抗炎、抗肿瘤和抗氧化活性。现就该植物的化学成分和药理活性研究进展进行综述,为其进一步开发提供科学依据。
关键词: 黄槿 ；半红树 ；三萜 ；黄酮 ；倍半萜 ；抗炎 ；抗肿瘤
被引量
8
摘要： 目的研究海南特有植物三叉刺Trifidacanthus unifoliolatus茎提取物中的化学成分。方法通过硅胶柱色谱,对该植物茎的醋酸乙酯部位中成分进行分离和纯化;利用质谱及核磁等谱学方法确定所分离化合物的结构;并利用ORAC法测定化合物的抗氧化活性。结果分离得到7个黄酮类化合物.分别为dalbergioidin(I)、isofer- reirin(Ⅱ)、染料木素(Ⅲ)、2′-methoxyl-genistein(Ⅳ)、芹菜素(Ⅴ)、山柰酚(Ⅵ)和香橙素(Ⅶ);所有化合物都具有一定的抗氧化活性。结论所有化合物都为首次从该植物中分离得到,其抗氧化活性因结构不同而有差异。
关键词: 三叉刺 ；豆科 ；黄酮 ；抗氧化活性
被引量
6
摘要： 目的:研究海南砂仁的脂溶性成分。方法:利用溶剂分步萃取,得到各萃取部位;采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对其石油醚部位的成分进行测定,并与标准图谱对照,确定化合物成分,经色谱峰面积归一化法确定各成分的相对百分含量。结果:从海南砂仁石油醚萃取部位中共分离出76个组分,鉴定了其中的56种成分,所鉴定的成分占总脂溶性成分的68.81%,其中相对质量分数较高的成分有对苯二酚(7.74%)、Z,E-2,13-十八碳二烯-1-醇(6.86%)、E,E-2,13-十八碳二烯-1-醇(5.44%)、4-十一烷基苯酚(3.71%)、(Z)-9-十八碳烯醛(3.65%)、顺式-异油酸(3.39%)及(E,E)-大牻牛儿-3,7(11),9-三烯-6-酮(3.05%)等。结论:本研究首次对海南砂仁的石油醚部位的化学成分进行了分析,该研究为海南砂仁的进一步开发和利用提供了基础研究数据。
关键词: 海南砂仁 ；脂溶性成分 ；气相色谱-质谱 ；海南
被引量
7
【会议论文】 • 王斌贵
会议时间： 2014-10-27
摘要： 系统研究海洋植物来源的内生真菌化学成分多样性,丰富海洋来源天然产物的化学结构,发现结构新颖、活性较好的天然产物,为海洋内生真菌及其次级代谢产物的有效利用提供科学依据。方法:选择红树林和海藻样品进行内生真菌的分离,建立海洋真菌菌种库。以菌丝体生物量、代谢产物量等指标以及薄层色谱分析技术、高效液相色谱分析、活性测试等综合评价筛选,选择来源于海南红树林植物白骨壤的一株内生真菌Penicillum brocae MA-192以及来源于青岛汇泉湾海藻中的一株内生真菌Paecilomyces variotii EN-291进行规模发酵。综合运用各种色谱学方法(正相硅胶柱层析、反相硅胶柱层析、凝胶Sephadex LH-20柱层析、制备薄层层析pTLC,制备高效液相色谱pHPLC等)和各种现代波谱技术(UV、IR、ESI-MS、1D-NMR、2D-NMR等)分离、鉴定其次级代谢产物并进行生物活性的评价。结果:从Penicillum brocae MA-192发酵产物中共分离鉴定28个单体化合物,其中11个新化合物,结构类型包括1个新的二羟基苯酸内酯及其5个少见的开环衍生物,3个异戊烯基生物碱类化合物,2个含硫二酮哌嗪类化合物。从Paecilomyces variotii EN-291发酵产物中共分离鉴定29个单体化合物,其中8个新化合物,包括1个结构新颖的氧杂环生物碱类化合物及其2个衍生物,2个吲哚二酮哌嗪类化合物,2个羟基丁酸内酯类化合物。对分离得到的新化合物进行生物活性的测试,发现部分化合物具有较好的抗细菌、抗真菌、抗肿瘤、抗氧化和卤虫致死等生物活性。结论:本文选取海洋内生真菌为研究对象,对不同来源的两株内生真菌进行了系统的次生代谢产物的研究,丰富了海洋天然产物的化合物结构,同时进行了多种活性测试,为海洋微生物资源的有效利用提供了一定的科学依据。
关键词: 海洋内生真菌 ；次级代谢产物 ；生物活性
会议时间： 2011-08-10
摘要： 海南青梅是龙脑香科青梅属植物。通过查阅文献发现,国内外学者对青梅属植物的化学成分进行了研究,主要得到白藜芦醇低聚物,三萜类化合物以及异香豆素类化合物等化合物。白藜芦醇和它的低聚物由于具有较好的抗人免疫缺陷病毒(HIV)、抗肿瘤、抗氧化和抗菌消等生物活性而引起关注。目前只有本课题组对青梅根的化学成分研究进行过报道,我们对该植物的茎进行了后续研究。从青梅茎氯仿和乙酸乙酯部位中分离得到了11个化合物,根
关键词: 化学成分研究 ；二甲氧基 ；化合物
【会议论文】 •
会议名称： 广西药学会2015年学术年会
会议时间： 2015-10-03
摘要： 红蓝草(Peristrophe roxburghiana)为爵床科红丝线草属植物,别名红丝线草、山蓝、红丝线、青丝线、四川草.其性味甘、淡、凉,具有清肺泻火、消肿解毒、止血、止咳、化痰、降低血压、降低血脂、抗氧化、增强免疫力等功效,民间多用于治疗毒蛇咬伤、中暑、扁桃体炎、伤风、气喘、小儿惊风、散瘀止血、肺结核咯血、肺炎、糖尿病等,主要分布在云南、海南、广西、广东、贵州、江西等地.近年来,国内外学者对红蓝草的化学成分和药理活性进行的研究甚少,有关化学成分方面,有报道从该植物中分离并鉴定了5种化合物,分别为biflorideA(1),N trans cinnamoyltyramine(2),liquiritigenin(3),Ntrans pcoumaroyloctopamine(4),1OβD glucopyranosyl2N2'hydroxypalmitoyl sphinga4trans8trans dienine(5).本实验通过对红蓝草的化学成分进行预试验,初步确定了红蓝草可能存在的化学成分,为进一步研究红蓝草以及其深入开发利用提供理论依据.
关键词: 红蓝草 ；化学成分 ；分离工艺 ；药理活性 ；资源开发
会议时间： 2011-12-28
摘要： 黄槿为《全国中草药汇编》收载的两种半红树植物之一,具有清热解毒的功效,在海南黎族聚集地区作为药物使用。有关黄槿的化学成分研究起始于上世纪六十年代,至今从中分离得到了大量的三萜、黄酮、倍半萜和酰胺类化合物,其中木栓烷型三萜和高度氧化的倍半萜类成分是该药用植物的特征性成分。药理方面也进行了研究,主要集中在抗炎、抗肿瘤和抗氧化活性。本文就该植物的化学成分和药理活性研究进展进行综述,为其进一步开发提供科学依据。
关键词: 黄槿 ；半红树 ；化学成分 ；药理活性
被引量
1
摘要： 红树是我国海岸湿地中的一种重要植物,以其生境独特、物种多样、生态功能明显及社会效益良好等特点,在生态保护、药理活性应用等多个方面已显示出其巨大的开发利用潜力。近年来众多的研究主要关注在提取分离红树植物的化学成分及其表征其生物活性,对红树植物的蛋白质组学或DNA的研究却鲜有。木榄(Bruguiera gymnorhiza（L.）Lam.)为海南分布较广泛的一种药用红树植物,具有抗炎、抗癌、抗肿瘤、抗氧化和抗菌等多种药理活性,被广泛应用于新药的研发。从中药现代化需要系统研究植物药理机制的角度,鉴于木榄中也可能存在具有某些药理活性的蛋白,因此有必要对其中的植物蛋白质进行鉴定分析,并确定木榄中的DNA序列。另外,由于红树植物特殊生长环境的特点,容易受到多种重金属的胁迫以发挥其对生态环境的保护作用,但其中起关键作用的植物蛋白有哪些?重金属与DNA的作用机制是什么?依然是两个函待解决的关键科学问题。本论文的研究将海南药用红树植物木榄作为研究对象,进行植物蛋白指纹图谱的建立及其主要功能蛋白的鉴定分析;研究重金属Pb2+、Cd2+胁迫下木榄叶的差异蛋白质组学;确证Pb2+、Cd2+与木榄DNA的作用机制。研究结果不仅从生物大分子的角度并结合其中的小分子化学成分,协同阐释药用植物的物质基础,有利于更好地实现木榄的中药现代化;而且通过确定Pb2+、Cd2+与木榄DNA的作用机制,可以更好地从分子层面阐释木榄具有保护生态作用的机制。本论文的主要内容分5个章节:（1）对红树植物的性质、应用价值、非生物胁迫等方面进行了综述;并结合本论文的研究意义,简要介绍了蛋白质组学的原理、方法应用及差异蛋白质组学,介绍了蛋白质组学的主要应用技术;并介绍了重金属离子与木榄叶DNA的相互作用。（2）采用优化条件下的酚抽提法,结合双向电泳,获得海南幼苗期和成熟期木榄叶的蛋白指纹图谱,并通过分析软件Image Master TM 2D Platinum 7.0筛选出高表达蛋白,再利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）鉴定高表达蛋白的酶水解产物。结果表明:成熟木榄叶有60个高表达的蛋白,包括差向异构酶、DNA连接酶、核酮糖二磷酸羧化酶等,其中已确定42个木榄叶蛋白质;木榄叶幼苗中有55个高表达的蛋白,包括天冬氨酸氨基甲酰转移酶、热休克蛋白、核酮糖二磷酸羧化酶等,其中已确定了34个木榄叶蛋白质。（3）采用双向电泳及生物质谱技术,对重金属Pb2+和Cd2+胁迫下不同时期的木榄叶差异表达的蛋白进行分离提取及鉴定分析。结果表明:成熟木榄叶重金属Pb2+和Cd2+胁迫的差异蛋白分别有4个和6个,木榄叶幼苗中Pb2+、Cd2+胁迫的差异蛋白分别有14个和5个。（4）利用生物信息学技术,通过蛋白质在线数据库及分析平台,对正常木榄叶蛋白及Pb2+、Cd2+胁迫下不同时期的木榄叶差异蛋白进行理化性质分析、多序列比对分析及功能的初步探索。结果表明:木榄叶的蛋白质大部分属于不稳定蛋白类型,涉及木榄叶生长、发育、遗传及植物抗逆等多种功能;Pb2+和Cd2+胁迫下不同时期的木榄叶差异蛋白均与植物生长、遗传及高效光合作用等植物功能有关,绝大部分都属于稳定的蛋白类型,且四种差异蛋白与其同源蛋白的多序列相似性较好。（5）对提取的木榄叶DNA进行定性及定量分析,并通过紫外光谱及荧光光谱确定了重金属离子Pb2+、Cd2+分别与木榄叶DNA的相互作用机制。结果表明:Pb2+、Cd2+可引起木榄叶DNA在210 nm处特征吸收峰的红移和明显的增色效应,并致使波长为319nm处的荧光强度逐渐增大。热力学计算结果表明,氢键和范德华力为Pb2+与DNA的主要作用类型,而疏水作用力为Cd2+与DNA的主要作用类型。初步判定二者以沟槽结合的模式与木榄叶DNA相互作用。
关键词: 木榄叶 ；重金属离子 ；差异蛋白 ；DNA ；作用机制
摘要： 黄檀属（Dalbergia）植物属豆科,主要分布于热带和亚热带地区,其植物资源丰富,全球约有317种,其中,我国有降香黄檀、海南黄檀、藤黄檀等28个品种及1个变种。国内外学者对黄檀属植物的物质基础研究结果表明,黄檀属植物中含有黄酮类、萜类、苯并呋喃类及酚类等丰富的化学成分,并且具有镇痛、抗炎、抗菌、抗氧化、止泻、脑保护等药理作用。 藤黄檀（Dalbergia hancei Benth）,豆科（Leguminosae）黄檀属（Dalbergia）藤本植物,根、茎入药,能舒筋活络,有理气止痛、破积之效,在广西民间称为“痛必灵”,可用于风湿腰痛、关节痛,腰肌劳损、久伤积痛等疾病的治疗,但国内外鲜有关于藤黄檀的化学成分及药理活性方面的报道。为了更加有效地开发和利用藤黄檀植物资源,本研究将藤黄檀树皮作为实验材料,系统开展其化学成分的分离、结构鉴定以及生物活性方面的研究,研究结果可以为藤黄檀植物的药效物质基础研究和开发利用提供理论依据。主要研究内容、方法及结论如下: 1、藤黄檀化学成分分离及结构鉴定。称取干燥的藤黄檀树皮5.1Kg,用80%甲醇溶液于室温下浸提5次,每次25 L,每次3天,将滤液减压浓缩得粗提物,依次用石油醚、乙酸乙酯对粗提物萃取3次,得到各萃取物:石油醚萃取物（35.0 g）、乙酸乙酯萃取物（96.5 g）和水层部分（958.8 g）。采用Sephadex LH-20、Diaion HP20SS、MCI gel CHP 20P、Toyopearl HW-40F、Chromatorex C18、硅胶等柱层析方法,对水层和乙酸乙酯层部分进行化学成分的分离和纯化,并通过旋光,NMR,HR-MS等多种技术鉴定出13个黄酮类化合物,包括12个异黄酮类化合物和1个黄烷醇类化合物。12个异黄酮类化合物分别为:5-hydroxy-6,7-dimethoxy-4′-O-[β-D-apiofuran-osyl-（1→5）-β-D-apiofuranosyl-（1→6）-β-D-glucopyranosyl]isoflavone（DHB-1）、5-hydroxy-7-methoxy-4′-O-[β-D-apiofuranosyl-（1→5）-β-D-apiofu-ranosyl-（1→6）-β-D-glucopyranosyl]isoflavone（DHB-2）、5-hydroxy-6,7-dime-thoxy-4′-O-（6-O-D-apio-β-D-furanosyl-β-D-glucopyranosyl）isoflavone（DHB-3）、5-hydroxy-6,7-dimethoxy-4′-O-β-D-glucopyranosyl isoflavone（DHB-4）、prunetin-4′-O-apiosyl-（l→6）-glucoside（DHB-5）、樱黄素4′-O-β-D-葡萄糖甙（DHB-6）、8-C-β-D-glucopyranosyl genistein（DHB-7）、8-C-葡萄糖基-7-甲氧基-4′,5-二羟基异黄酮（DHB-9）、prunetin（DHB-10）、5,3′,4′-trihydroxy-7-methoxy isoflavone（DHB-11）、irisolidone（DHB-12）、genistein-8-C-（6 acetyl）-β-D-glucopyranoside（DHB-13）。黄烷醇类化合物为:表儿茶素（DHB-8）。以上所有化合物均为首次从藤黄檀植物中分离得到,其中化合物DHB-1、DHB-2为新化合物,化合物DHB-13的碳氢数据在本研究中为首次报道。 2、藤黄檀总黄酮提取工艺研究。以芦丁为对照品,作其标准曲线:Y=11.379X-0.003（R2=0.9992）,基于此,探究了浸渍法、超声提取法、回流提取法三种不同提取方法对藤黄檀树皮粉末中总黄酮的提取情况。结果表明,超声提取法最优,总黄酮得率可达13.6%,其次是回流提取法,为12.7%,浸渍法对总黄酮的提取效果最差,总黄酮得率仅为10.0%。并进一步采用了单因素实验,探究了超声提取方式下料液比、乙醇浓度、提取时间对藤黄檀中总黄酮得率的影响,得到最佳提取条件:料液比为1:35（g/mL）,乙醇浓度为70%;提取时间为1.5 h。 3、单体化合物的生物活性研究。以氨苄青霉素为阳性对照,采用滤纸片法测试了部分化合物在6 mg/m L浓度下,对大肠杆菌、金色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和尖孢镰刀菌的抑制作用。抗菌定性实验结果表明,化合物DHB-4仅对大肠杆菌有较弱的抑制作用,化合物DHB-10对除金色葡萄球菌之外的三种菌均表现出较弱的抑制活性,其余化合物几乎没有抑制活性。体外酶活性抑制方面,分别以曲酸和阿卡波糖为阳性对照,测试了部分化合物对酪氨酸酶及α-葡萄糖苷酶的抑制作用,实验结果表明,所测化合物均对两种酶显示出较弱的抑制作用。
关键词: 藤黄檀 ；化学成分 ；生物活性 ；黄酮 ；提取
摘要： 中药青果为橄榄科（Burseraceae）橄榄属（Canarium）植物橄榄（Canarium album Rauesch.）的果实,主要分布在福建、广东、广西、海南、台湾及云南等南方省区,它与用于生产橄榄油的油橄榄（Olea europaea L.）是两种不同科属的植物。橄榄鲜果清香爽口,生津回甘,且药用价值高,为我国传统中药。据《本草纲目》记载,青果性平,味甘、涩、酸,具有清热利咽、生津解毒之功效,用于咽喉肿痛、咳嗽、烦渴、鱼蟹中毒等。本论文对青果70%乙醇提取物采用不同极性有机溶剂进行萃取,对萃取部分进行体外抗氧化、抗炎和抑制α-葡萄糖苷酶的活性筛选。活性结果表明,氯仿层和乙酸乙酯层的抗氧化、抗炎和抑制α-葡萄糖苷酶活性较强,因此选择氯仿层和乙酸乙酯层两个活性部位作为进一步研究对象。利用硅胶开放柱色谱、ODS MPLC、Sephadex LH-20柱色谱以及p HPLC等各种色谱手段对活性部分进行分离纯化,共得到53个化合物,并通过理化性质和波谱技术等方法,鉴定了它们的化学结构,分别为:（7R,8S）-3-hydroxyl-4-methoxyl-balanophonin（1）,（7R,8S）-3-methoxyl-4-hydroxyl-balanophonin（2）,（7S,8R）-threo-balanophonin（3）,（7S,8R）-threo-1'-[3'-hydroxy-7-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-8-hydroxymethyl-7,8-dihydrobenzofuran]acrylaldehyd（4*）,curcasinlignan C（5）,（7S,8R）-threo-lycocernuaside B（6）,（7R,8S）-erythro-3-methoxy-4-hydroxy-7-methoxy-8-O-（2'-methoxy-4'-aldehyde-phenyl）-phenylpropanol（7*）,（7S,8R）-erythro-guaiacylglycerol-β-coniferyl aldehyde ether（8）,threo-1-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-1-methoxy-2-{4-[1-formyl-（E）-vinyl]-2-methoxyphenoxy}-3-propanol（9）,（7R,8R）-threo-guaiacylethoxyglycerol-β-O-4'-coniferyl aldehyde ether（10）,（7R,8R）-erythro-guaiacylethoxyglycerol-β-O-4′-guaiacyl aldehyde ether（11）,（7R,8S）-erythro-guaiacylethoxyglycerol-β-O-4′-coniferyl aldehyde ether（12）,（7R,8S）-threo-guaiacylethoxy glycerol-β-O-4′-guaiacyl aldehyde ether（13）,（7R,8S）-erythro-7,8-bis（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-9-acetyl-7,9-propanediol（14）,p-hydroxyphenylferulate（15）,evofolin-B（16）,vladinol-D（17）,（+）-pinoresinol（18）,（7S）-3-methoxy-4-hydroxy-7-hydromethyl-phenylacetic acid-8-O-（3'-methoxy-4'-hydroxy）phenyl ester（19*）,（+）-erythro-7-O-ethylguaiacylglycerol（20）,（7S,8R）-threo-3-methoxy-4-hydroxy-7-methoxy-8-O-（2'-methoxy-4'-aldehyde-phenyl）-p h en yl p ro p ano l（21*）,feru l al d eh yd e（2 2）,ci nn ami c aci d（2 3）,4-hydroxycinnamic acid methyl ester（24）,β-hydroxypropiovanillone（25）,dihydroconiferyl alcohol（26）,1,6-diethyl citrate（27）,3-hydroxy-3-carboxyethyl-1-methoxy-5-ethoxy-citric acid ester（28*）,3-hydroxy-3-carboxymethyl-1,5-diethoxy-citric acid ester（29*）,3-carboxyethyl-3-hydroxyglutaric acid 1,5-dimethyl ester（30）,1,5-diethyl citrate（31）,tris-ethyl aminocitrate（32）,1-ethoxy-6-methoxy-citrate（33）,triethyl citrate （34）,trimethyl citrate（35）,vanillic acid（36）,methyl vanillate（37）,methylgallate（38）,3,4-dihydroxybenzoic acid（39）,4-hydroxybenzaldehyde（40）,4'-hydroxy-3'-methoxy-phenol-β-D-[6-O-（4''-hydroxy-3'',5''-dimethoxybenzoate）]glucopyranoside（41）,3-（8-pentadecenyl）phenol（42）,3-(（8E,11E）-pentadeca-8,11,14-pentadecatrien-1-yl)phenol（43）,pyroglutamic acid ethyl ester（44）,1,1,2-ethanetricarboxylic acid-1-hydroxy-1,1-diethyleste r（4 5）,mucicacid dimethyl ester（4 6）,5-hydroxymethylfuran-2-carbaldehyde（47）,cirsiumaldehyde（48）,β-sitosterol（49）,methyl linoleate（50）,methyl myristate（51）,2-hydroxybutanedioic acid dimethylester（52）,palmitic acid（53）。在分离鉴定的53个化合物中,1-26是苯丙素类化合物,27-35是柠檬酸酯类化合物,36-43是单环酚类化合物,50-53是脂肪酸类化合物,其中有6个为新化合物（4、7、19、21、28、29）。在化学成分研究的基础上,对部分单体化合物进行了体外抗氧化、抗炎和抑制α-葡萄糖苷酶的活性测试。与维生素C（IC50=34.69±1.70μM）相比,化合物7、10、16、18和26具有显著的DPPH自由基清除活性。化合物3、4、9、22具有显著的抗炎活性,且明显强于阳性药米诺环素(IC50=9.44±2.88μM)。与阿卡波糖(IC50=189.40±3.13μM)相比,化合物17具有较强的抑制α-葡萄糖苷酶活性。本研究初步阐明了中药青果的抗炎、抗氧化及降糖的活性物质,为其临床应用及进一步开发奠定了坚实基础。
关键词: 青果 ；活性成分 ；苯丙素类 ；抗炎 ；抑制α-葡萄糖苷酶 ；抗氧化活性
被引量
8
摘要： 平卧菊三七Gynura procumbens(Lour.)Merr,又称平卧菊三七,为菊科菊三七属的一年生草本植物,在我国江西、广东、海南及贵州等地有广泛种植。平卧菊三七含有黄酮类、萜类、脂肪酸类及酚类等化学成分,有着丰富的生物活性如抗肿瘤、抗炎及抗氧化活性等。近年来国内外对平卧菊三七的研究集中在其叶的化学成分及生物活性,而关于平卧菊三七花的化学成分及生物活性却未见报道。本文以平卧菊三七花为原料,系统的研究了平卧菊三七花的化学成分及主要成分含量,评价了其抗氧化活性及抗炎活性,并对其抗炎活性作用机制及物质基础进行了深入研究,为深度开发平卧菊三七资源提供了理论依据。主要研究方法及结果如下:综合运用了各种柱层析分离方法,对平卧菊三七花提取物及乙酸乙酯萃取部位进行了系统的分离纯化,经波谱解析(1H-NMR,13C-NMR等)并对照相关参考文献后,共分离鉴定得到 13 个化合物,分别为 n-Hexacos-5,8,11-trienoic acid(1)、β-sitosterol(2)、Aurantiamide acetate(3)、Cis-9-Octadecenoic acid(4)、(Z)-undec-4-ene(5)、Dodecyl(Z)-9-hexadecenoate(6)、Neochlorogenic acid(7)、Chlorogenic acid(8)、Cryptochlorogenic acid(9)、isochlorogenic acid B(10)、4,5-di-O-caffeoylquinic acid n-butyl ester(11)、isochlorogenic acidA(12)和 isochlorogenic acid C(13)。所有化合物均为首次从平卧菊三七花中分离得到,其中,化合物1,3,4,5,6和11均为首次从平卧菊三七中分离得到。分别利用硝酸铝法和福林酚法对平卧菊三七花提取物(Gynura procumbens flower extract,GPFE)中的总黄酮及总酚含量进行了测定,结果表明,其总黄酮含量为119.245 mg RE/g提取物;总酚含量为45.563 mg GAE/g提取物。此外,建立了一种HPLC法同时测定GPFE中的五种咖啡酰奎宁酸类化合物,结果表明:GPFE中绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C及新绿原酸的含量分别为5.046,8.386,5.716,5.899,1.181 mg/g。对GPFE的抗氧化及抗炎活性进行了研究与初步评价。对GPFE进行了 ABTS+·与DPPH·的清除能力及Fe3+还原能力活性评价,结果表明:GPFE具有较好的Fe3+还原能力,也具有较强的ABTS+·及DPPH·的清除能力,其对ABTS+·及DPPH·的半数清除率IC50分别为0.180 mg/mL和0.158 mg/mL。建立脂多糖(LPS)刺激RAW264.7小鼠巨噬细胞产生炎症模型,通过Griess法测定了 GPFE对LPS刺激的RAW264.7细胞NO分泌的影响,通过MTT法评估了 GPFE对RAW264.7细胞存活率的影响,结果表明:12.5～100 μg/mL浓度范围内的GPFE均显著降低了 NO含量,且无任何细胞毒性,表明其具有较强的抗炎活性。综合运用ELASA、RT-qPCR、免疫荧光和Western blot等方法进一步研究了 GPFE的具体抗炎作用机制。结果表明:GPFE可以显著降低NO、TNF-α、IL-1β、PGE2及IL-6等炎症因子的释放;在基因水平上,GPFE显著抑制了 iNOS、COX-2、TNF-α、IL-1β及IL-6mRNA的转录;在蛋白水平上,GPFE显著抑制了 iNOS和COX-2蛋白的表达;此外,GPFE还可通过下调MAPK通路并抑制NF-κB p65的核转位来减轻炎症。对GPFE中分离得到的13个化合物进行了抗炎活性的初步筛选及评价,结果表明:n-Hexacos-5,8,11-trienoic acid,β-sitosterol 和 Aurantiamide acetate 均显著降低了NO的释放且无细胞毒性,表现出较好的抗炎活性,推测其可能是GPFE发挥抗炎作用的主要物质。
关键词: 平卧菊三七 ；化学成分 ；含量测定 ；抗氧化活性 ；抗炎活性
摘要： 砂仁,为姜科Zingiberaceae植物阳春砂Amomum villosum Lour、绿壳砂Amomum villosum Lour.var.xanthioides T.L.Wuet Senjen或海南砂Amomum longiligulare T.L.Wu的干燥果实。根据产地不同可分为三种,产于中国广东省的阳春砂,产于西双版纳、云南的绿壳砂、海南砂。其中阳春砂是广东省阳春市的道地药材,是粤八味中重要中药材之一,同时也是我国四大南药之一。砂仁中富含多种活性成分,包括黄酮类、多糖、挥发油及萜类等化学成分,具有抗氧化、抗癌、抑菌、降血糖等生物活性。我国砂仁资源十分丰富,作为药食同源的中药材,砂仁具有较高的药用价值和食用价值,研究这些药效活性成分,对新药开发和保健食品具有重要意义。近年来,利用砂仁中挥发油、多糖、黄酮等功效成分研发有关药物成为研究热点,但是砂仁中黄酮类化合物的提取得率不高,抗氧化,抗癌等药理作用研究不深入。本论文以砂仁为原料,确定砂仁中黄酮类化合物的提取工艺条件及其稳定性,研究了砂仁黄酮类的抑菌和体外抗氧化以及抗癌活性。主要研究结果如下:（1）超声微波协同提取法提取砂仁总黄酮的最佳条件:在单因素试验的基础上通过响应面试验优化提取的工艺条件,确定超声微波协同法提取砂仁总黄酮的微波功率、乙醇浓度、提取时间、料液比的最佳提取工艺参数为:300 W、50%、30 min、1:29（g:m L）,在此条件下所得砂仁总黄酮得率为45.87±0.12 mg/g,经纯化后砂仁总黄酮含量提高至85.54±0.78 mg/g,纯度提高了1.8倍。（2）砂仁黄酮类化合物的稳定性研究:从光照、温度、p H、氧化还原剂、食品添加剂、金属离子六个方面,考察了砂仁总黄酮的稳定性,结果显示,砂仁黄酮类化合物在温度25℃-70℃,p H 5-7之间,避光条件下较为稳定,氧化还原剂和部分金属阳离子会使砂仁总黄酮稳定性下降,0.2%及以上的壳聚糖和0.15%的CMC能够维持砂仁总黄酮的稳定性。因此,砂仁总黄酮的保存条件应为室温,弱酸,避光,避免与氧化还原剂、Fe2+、Fe3+等接触。（3）砂仁总黄酮的生物活性研究:通过体外化学法和体外细胞法,研究了砂仁总黄酮的自由基清除能力和细胞抗氧化活性。结果表明,砂仁总黄酮对DPPH·、ABTS自由基具有较强的清除能力,总还原力与相同浓度下的维生素C相近。通过850μM H2O2诱导Hep G2细胞构建细胞氧化损伤模型,在三种砂仁总黄酮浓度下（100、300、500 mg/m L）进行体外细胞抗氧化实验,结果表明,砂仁总黄酮可显著增高氧化损伤Hep G2细胞的存活率和细胞培养液中超氧化物歧化酶活性,细胞培养液中的乳酸脱氢酶活性和丙二醛含量显著降低,进而保护Hep G2细胞因氧化应激造成的损伤。同时,通过测定最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC/MFC）发现其抑菌能力大小依次为:金黄色葡萄球菌>大肠杆菌>青霉菌>黑曲霉菌。选取被抑制效果最好的金黄色葡萄球菌,测定其杀菌曲线,结果表明:砂仁总黄酮浓度为MIC、2MIC处理10 h后,菌落数降低3个lg值。（4）砂仁总黄酮的抗肿瘤活性研究:通过荧光倒置显微镜观察和Hoechst 33342染色实验研究发现经砂仁总黄酮处理的MGC 803胃癌细胞数目减少、细胞质回缩、荧光强度增大,表明砂仁总黄酮具有促进MGC 803胃癌细胞凋亡的作用;利用MTT法检测砂仁总黄酮对MGC 803胃癌细胞的抑制率,结果表明,砂仁总黄酮对MGC 803胃癌细胞的抑制作用具有时效关系和量效关系;利用Annexin V-FITC/PI双染法,通过流式细胞仪分析结果表明砂仁总黄酮随着浓度增大凋亡率增加,当浓度为300μg/m L时细胞凋亡率达28.89±0.75%（P<0.01）,表明砂仁总黄酮可能通过促进MGC 803细胞凋亡来抑制细胞增殖。
关键词: 砂仁 ；砂仁总黄酮 ；提取纯化 ；抗氧化活性 ；抗癌活性
被引量
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