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摘要： 以某典型有机污染场地为例,开展了土壤和地下水多层次健康风险评估,根据采样分析结果确定了场地特征参数和受体暴露参数,推算出场地污染修复范围及修复量。调查结果表明,该场地污染类型主要为土壤和地下水,土壤关注污染物为镉、3,3-二氯联苯胺,地下水关注污染物为3,3-二氯联苯胺。风险评估结果显示,场地土壤中镉和3,3-二氯联苯胺所有暴露途径的总致癌风险大于10^(-6),土壤中镉的非致癌危害商大于1,均高于人体可接受风险水平。土壤和地下水中3,3-二氯联苯胺的建议修复目标值分别为3.4 mg/kg、3.79×10^(-4) mg/L,土壤中镉的风险修复目标值为36 mg/kg。氯碱厂土壤受3,3-二氯联苯胺污染的待修复土方量约为44005.5 m^(3),受镉污染的待修复土方量约为2151 m^(3),其中3,3-二氯联苯胺和镉污染面积有一定的重叠,重叠区域待修复土方量约为1000 m^(3)。
关键词: 有机污染场地 ；风险评估 ；3,3-二氯联苯胺 ；建议修复目标值
被引量
5
摘要： 1994年7月15日,德国联邦政府颁布了《食品及日用品消费品法》(LFGB)第二修正案,法案禁止使用可以通过一个或多个偶氮基分解形成MAK(Ⅲ)A1或A2组芳胺类,总计20种芳胺,其中包括3,3’-二氯联苯胺(DCB),加上欧共体EU67/1548附录C2级两个芳香胺以及STANDARD 100 by OEKO-TEX增加两个,共24个涉嫌致癌芳胺(包括我国在内的各国法规都是这些芳香胺)。但1994年后所使用的检测方法无法检出以DCB为中间体的有机颜料,因为以DCB为中间体的有机颜料在1996年7月23日颁布的第五修正案的法定分析条件下不会断裂分解,因此其使用不受限制。直到2002年11月欧盟出台了欧洲标准EN 14361-2:2003,使用萃取样品预处理方法,使其还原分解出DCB,才能执行法案禁用以DCB为中间体的有机颜料。
关键词: DCB ；有机颜料 ；检测方法 ；代用品
被引量
3
摘要： 建立可将28种致癌芳香胺完全分离的气相色谱-质谱方法模型。选定色谱柱进样口温度230℃,升温初始温度70℃,传输线温度320℃;采用两种梯度升温程序分离方法:梯度升温33 min方法可以完全分离28种化合物;梯度升温21 min方法可将混和物质基本分离,但3,3′-二氯联苯胺和4,4′垭甲基-二-(2-氯苯胺)两种物质的分离峰有部分重叠。根据实际检测要求,选择其中的一种,以满足客户的需求。
关键词: 测试 ；致癌芳香胺 ；气相色谱法 ；质谱法 ；混标 ；分离
被引量
4
摘要： 淮河(江苏段)水体检测到的半挥发性有机物和有机氯农药绝大多数属于USEPA的优先控制污染物。应用USEPA规定的水中优先控制污染物和非优先控制污染物对人体健康的摄入与饮入之和的水体有机物浓度标准,计算了淮河(江苏段)水体的48种有机污染物的环境暴露浓度,并根据最高环境暴露浓度与USEPA水质指标的比值,参考IARC的化合物致癌性指标,建立了一套表征水体有机污染物的风险特征以及采取相应管理措施和建议的评价体系,对这些化合物的环境健康风险进行了评价。结果表明,有18种有机污染物超过了USEPA的标准浓度要求,其中9种物质具有一定的生态风险,其中六氯苯、N-亚硝基二正丙胺、3,3'-二氯联苯胺、2,4,6-三氯酚、五氯酚、茚并(1,2,3-cd)芘、4,4'-滴滴涕、七氯在内的8种化合物具有一定的风险,而多环芳烃二苯并(a,h)蒽需要引起更高警惕;在此基础上探讨了这些化合物的来源及作用,并提出了相应的防治建议。
关键词: 优先控制污染物 ；风险评价 ；淮河 ；有机污染物 ；风险评价 ；江苏段 ；水体 ；淮河 ；优先控制污染物 ；有机物浓度 ；半挥发性有机物 ；有机氯农药
被引量
45
【专利/发明】 • CN202111046073.0 •
+8位作者
•
申请日：2021-09-07,
公开日：2021-12-10
申请人： 山东省环境保护科学研究设计院有限公司;山东省环科院环境检测有限公司
公开（公告）号： CN113777194A
摘要： 本发明公开了一种土壤样品中3,3'‑二氯联苯胺的测定方法，包括以下步骤：对土壤样品进行预处理；将预处理后的所述土壤样品依次冻干、研磨和过筛；使用萃取剂对所述土壤样品进行萃取处理，得到萃取液；将所述萃取液的溶剂置换成二氯甲烷，得到第一样品溶液；将所述第一样品溶液进行净化处理和浓缩处理，得到待测样品溶液；向所述待测样品溶液中加入内标物，测定3,3'‑二氯联苯胺的含量。本发明采用丙酮作为萃取剂，毒性相对小，对环境和人体危害小，前处理步骤简单，使用气相色谱质谱仪测定3,3'‑二氯联苯胺的含量，快捷高效，准确度高，检出限低。
【专利/发明】 • CN202111046073.0 •
+8位作者
•
申请日：2021-09-07,
公开日：2023-05-30
申请人： 山东省环境保护科学研究设计院有限公司;山东省环科院环境检测有限公司
公开（公告）号： CN113777194B
摘要： 本发明公开了一种土壤样品中3,3'‑二氯联苯胺的测定方法，包括以下步骤：对土壤样品进行预处理；将预处理后的所述土壤样品依次冻干、研磨和过筛；使用萃取剂对所述土壤样品进行萃取处理，得到萃取液；将所述萃取液的溶剂置换成二氯甲烷，得到第一样品溶液；将所述第一样品溶液进行净化处理和浓缩处理，得到待测样品溶液；向所述待测样品溶液中加入内标物，测定3,3'‑二氯联苯胺的含量。本发明采用丙酮作为萃取剂，毒性相对小，对环境和人体危害小，前处理步骤简单，使用气相色谱质谱仪测定3,3'‑二氯联苯胺的含量，快捷高效，准确度高，检出限低。
摘要： 纺织业每年生产超过100万吨染料,其中60-70%的染料是偶氮化合物。偶氮染料及其降解中间体具有毒性、致癌性和致突变性,不仅会影响环境美观,还会影响水生植物的光合作用。此外,硫化物作为偶氮染料合成反应的还原剂大量存在于染料废水中,可产生15%-20%的含硫化物废水,对人体健康具有很大的危害性。寻求偶氮染料的高效降解及单质硫回收技术一直是研究者们长期关注的问题。微生物燃料电池（microbial fuel cell,MFC）能够利用产电微生物的代谢活性,实现高效的生物发电和污染物去除,在废水处理方面具有巨大的潜力。国内外研究主要集中在MFC处理偶氮染料影响因素等方面,对于硫化物和偶氮染料的最佳反应条件、降解路径和作用机理的探索明显不足。论文构建单室空气阴极MFC,以硫化物和有机物作为电子供体,偶氮染料和氧气作为电子受体,协同处理含硫化物的偶氮染料废水。考察了关键因素对MFC降解硫化物和偶氮染料及同步产电的影响,探究了刚果红和硫化物的降解产物和转移路径及硫化物在偶氮染料降解中的作用,检测了MFC体系中微生物的物种组成和群落结构,为MFC处理实际的染料废水提供理论支撑。为优化MFC去除污染物和产电性能的运行条件,探究在不同硫化物浓度、染料浓度和p H条件下,硫化物、刚果红和有机物的去除率以及MFC的产电情况。结果表明,随着硫化物浓度的增加,MFC的产电效能上升,刚果红染料的降解率升高,而硫化物的去除率下降。高浓度的刚果红染料能够抑制产电微生物的活性,致使MFC性能下降,染料脱色率显著降低,而硫化物浓度去除率变化不大。当硫化物与刚果红浓度比为0.9时,刚果红和硫化物的去除率最高分别为77.69%和98%,电池的产电效能最佳为23.5 m W/m2。此外,含硫化物的偶氮染料MFC在中性条件下的产电效能最好。通过紫外-可见光分光光度计、高效液相色谱和液相色谱-质谱对刚果红染料的降解产物进行分析探究,刚果红的最终脱色产物为4-氨基-1-萘磺酸钠,联苯胺和3,4-二氨基萘-1-磺酸。通过离子色谱,SEM,EDX和CV扫描曲线对硫化物的转移路径和反应产物进行分析,硫化物的氧化产物主要为单质硫,硫酸盐和硫代硫酸盐。同时,生物硫化物由于含有核黄素等氧化还原介质能够显著提高MFC的产电效能和刚果红染料的去除,并且硫化氢气体也能促进偶氮染料脱色。通过16S rRNA高通量测序技术,探究了MFC悬浮液,初始污泥,阳极和阴极生物膜上的微生物物种组成和群落结构。结果表明,阳极生物膜上Dokdonella属占主导地位,它几乎可以在所有的MFC反应器中检测到,是具有胞外电子转移和传递功能的细菌。在阴极生物膜和MFC悬浮液中丰度最高的是Acinetobacter,MFC不同组成部分上微生物物种在丰度上具有显著的差异。
关键词: 微生物燃料电池 ；硫化物 ；偶氮染料 ；微生物群落 ；硫氧化菌
被引量
4
摘要： 赭曲霉毒素A（ochratoxin A,OTA）是由各种不同食品中的曲霉属和青霉属丝状真菌产生的次级代谢物。由于OTA稳定性高,尤其是高温条件下依然稳定存在,导致加工食品中OTA的污染尤为严重,例如在谷类制品、速溶咖啡、干果、面包、啤酒和葡萄酒等加工食品中。因OTA具有肾毒性、致癌性、致畸性、免疫毒性和肝毒性作用,所以国际癌症研究机构（IARC）将OTA列为潜在的致癌物。因此,OTA的准确测定对保障食品安全和人体健康具有重要意义。迄今为止,用于监控和检测OTA的方法主要包括高效液相色谱法（HPLC）,薄层色谱,和液/气相色谱-串联质谱法（GC/LC-MS）等。然而,由于色谱法检测依赖昂贵的专业设备、训练有素的操作人员、以及复杂的样品前处理,这些要求严重限制了他们在日常即时检测中的运用。而用比色法检测时,由于检测结果的颜色变化直观可视,无需复杂设备,因而更有利于即时检测。同时,通过比色检测量化浓度对应的颜色变化,为快速、便捷的获取检测结果提供了条件。适配体（Aptamer,APT）传感器因其具有高特异性、高稳定性、成本低廉等优势成为毒素检测的研究热点。而纳米功能材料在生物传感器的构建中展示了其优异的生物相容性,独特的理化性质、水溶性强等特点而被广泛应用于比色传感器中。基于此,本课题以OTA为检测目标物,利用比色法的便捷性及适配体的特异性,构建了基于功能纳米材料的适配体比色传感器,实现了对食品中OTA的检测,为快速检测OTA提供了新思路。本课题主要的研究内容和成果如下:1、基于双功能Au/Fe3O4纳米颗粒的核酸适配体比色传感器检测赭曲霉毒素A本研究利用核酸互补结合的可逆过程,设计了以c DNA-适配体（APT）为骨架的传感体系。因适配体与目标分子的高亲和力,待测物中的OTA分子可将OTA适配体(APTOTA)从c DNA-适配体骨架中解脱出来,c DNA上的生物素分子（Biotin）随即暴露出反应位点,并与后续加入的亲和素-碱性磷酸酶（Streptavidin-ALP）结合形成c DNA-Biotin-ALP复合物,并最终通过ALP催化底物对硝基苯膦酸酯（p-NPP）发生颜色变化。为了实现快速便捷的从检测体系中分离出c DNA-Biotin-ALP进行显色反应,我们设计并合成了Au/Fe3O4纳米颗粒,其中Au不仅提高了Fe3O4在溶液中的分散性,同时基于Au-thiol的自组装反应实现了c DNA-Biotin在Au/Fe3O4纳米颗粒上的固定。而Fe3O4的磁性为快速分离c DNA-Biotin进行显色反应提供了条件。我们首先通过共沉淀法合成了Au/Fe3O4纳米颗粒。在优化了反应时间、还原剂浓度等条件后,得到了分散性好,磁性强的Au/Fe3O4。在以c DNA-APTOTA为骨架的传感器构建过程中,对c DNA-Biotin、APTOTA和Streptavidin-ALP的浓度进行了调控。研究发现在引入c DNA-Biotin功能化的Au/Fe3O4纳米颗粒条件下构建的c DNA-APTOTA骨架在具有催化活性的Streptavidin-ALP的参与下,能够实现对OTA的特异性检测,其OTA的线性检测范围为10-10～5 ng m L-1(ΔA=0.064+0.13 lg COTA,R2=0.95147),而最低检测限（LOD）为1.15 ng m L-1。本工作结合了适配体的高亲和力、高特异性和在Au/Fe3O4纳米颗粒上c DNA的固定、从混合体系中快速分离出ALP的优点。本工作所构建的比色传感器能够对花生、红酒等真实样品中的OTA进行准确检测,展示了其在实际生活中的应用前景。而基于核酸双链可逆杂交的c DNA-适配体骨架体系,为构建多功能适配体传感器的应用拓展了思路。2、基于普鲁士蓝颗粒/纳米金（PB/Au NPs）的适配体传感器比色检测赭曲霉毒素A在c DNA-APT骨架的基础上,我们进一步研究了纳米过氧化物酶拟酶在适配体比色传感器中的作用。该传感系统中c DNA-APTOTA骨架中的互补c DNA固定于具有过氧化物酶活性的纳米颗粒上,而APTOTA则固定于磁珠（Magnetic Beads,MB）上。检测物中的OTA可以打断c DNA和APT的结合,将拟酶从MB上挤脱进入上清液中,而剩余的拟酶可以通过磁分离被除去。最后,上清液中从MB上挤脱的拟酶与3,3’,5,5’-四甲基联苯胺（TMB）底物发生反应并产生颜色变化,从而实现对OTA的检测。在该传感体系中,我们设计并合成了负载纳米金的普鲁士蓝颗粒（PB/Au NPs）,作为过氧化物酶拟酶,同时作为c DNA的载体,可与APT@MB反应,形成c DNA-APT骨架。研究中,在PB纳米颗粒表面修饰单宁酸（TA）,利用单宁酸作为稳定剂和还原剂,在其表面将氯金酸（HAu Cl4）还原为Au NPs,合成PB/Au NPs。与TMB混合后,PB/Au NPs可快速催化TMB变色。同时,该纳米复合物中的Au NPs有利于c DNA的固定。在本实验研究过程中待检物中的OTA优先与APTOTA@MB反应,形成OTA-适配体复合物,使得PB/Au NPs从c DNA-APT骨架中脱落,被释放到溶液中。通过磁分离,快速收集到PB/Au NPs,并与TMB反应产生蓝色溶液。研究发现在室温下快速合成普鲁士蓝纳米颗粒,再进一步吸附单宁酸,在加热的条件下合成的PB/Au NPs具有良好的过氧化物酶活性。以APTOTA@MB,c DNA@PB/Au NPs为c DNA-APT骨架两个部分的OTA比色传感器,线性检测范围为10-10～5 ng m L-1(ΔA=0.544+0.129 lg COTA ng m L-1,R2=0.987),而最低检测限（LOD）为1.55 ng m L-1。该传感体系,降低了对昂贵生物酶的使用,进一步展示了功能纳米材料在适配体传感器中的潜力。3、基于电荷效应诱导的银增强的适配体传感器比色检测赭曲霉毒素A本研究利用Au纳米颗粒催化银沉积的功能,设计了以四甲基罗丹明（TAMRA）分子标记的适配体为传感元件的、无需分离的液体均相比色传感器。该体系以Au NP作为固定适配体的载体和银沉积的催化剂。其中的OTA适配体末端有带正电荷的TAMRA(APTOTA-TAMRA)。TAMRA+通过电荷吸引作用,将银沉积液中的有效分子吸引、富集到Au NP周围,并被催化沉积于Au NP,显示出从纳米金特异性颜色到银纳米颗粒的吸收峰变化。当待测物中含有OTA时,APTOTA-TAMRA与OTA结合,改变APTOTA-TAMRA的空间构象,正电荷分子TAMRA被核酸适配体包裹,降低了TAMRA吸引、富集银沉积液的能力,并最终导致银沉积信号降低;当待测物中没有或仅有低浓度OTA时,APTOTA-TAMRA伸展开,大量的正电荷分子TAMRA暴露在金纳米表面,吸引、富集的银沉积液,银沉积信号增强。研究发现,适配体比色传感器检测的线性范围在10～2-10～6 pg m L-1间(A408/A520=1.739-0.04456 lg COTA,R2=0.995),最低检测限可达到28.18 pg m L-1。通过对伏马镰刀毒素B1（FB1）、黄曲霉毒素B1（AFB1）、呕吐毒素（DON）等毒素的检测,验证了该适配体比色法传感器在OTA检测中的特异性。而成功从玉米、花生、大豆提取液中检测到痕量OTA进行检测,展示了该TAMRA促进的银沉积增强OTA适配体传感器在实际样品检测中的应用潜力。该传感体系利用Au NPs催化的银沉积导致的颜色变化为检测信号,避免了对酶-底物的使用,简化了适配体传感器反应体系。而液体均相反应,避免了分离步骤,进一步提高了检测效率。
关键词: 比色检测 ；纳米金 ；磁性纳米粒子 ；适配体传感器 ；赭曲霉毒素A
被引量
1
摘要： 赭曲霉毒素A（Ochratoxin A,OTA）是曲霉和青霉产生的次级代谢产物,常见于玉米、大麦、燕麦、咖啡、葡萄和葡萄酒中。OTA具有肾毒性、肝毒性、免疫毒性、细胞毒性、致癌性、致畸性和致突变性等特点,对人和动物体健康危害极大。国际癌症研究机构将其归类为IIB类致癌物质。为了保证食品安全,许多国家规定了不同食品中OTA的最大残留限量（MRL）。例如,欧盟（EU）规定谷物中OTA的MRL为5μg/kg,婴儿食品的MRL为0.5μg/kg。中国政府允许谷物中OTA的MRL为5μg/kg。因此,建立快速准确的OTA检测方法,对严格管控食品中OTA含量,保障食品安全和人类健康具有重要意义。
目前,检测OTA的几种常规方法有薄层色谱法（TLC）、气相色谱-质谱法（GC-MS）、液相色谱-质谱法（LC-MS）、高效液相色谱法（HPLC）、免疫分析法。仪器分析法结果灵敏度高、重现性好,但检测成本高,且需要熟练的操作人员因而无法满足样本的大量筛选。而免疫分析法由于操作简单、响应迅速、不受仪器设备的限制备受关注,并且大量应用于日常检测中。
本研究在传统酶联免疫吸附法（ELISA）的基础上,结合比率荧光传感的快速响应,构建了三种免疫分析方法用于定量检测实际样品中的OTA含量。
1.间接竞争ELISA方法（ic-ELISA）
在过氧化氢（Hydrogen peroxide,H2O2）存在的条件下,辣根过氧化物酶（Horseradish peroxidase,HRP）标记的二抗（Ig G-HRP）催化底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺（3,3',5,5'-tetramethylbenzidine,TMB）生成氧化态TMB,溶液由无色变为蓝色。使用硫酸（Sulfuric acid,H2SO4）终止反应后,溶液由蓝色变为黄色。通过对酶标仪读取的OD450数值进行分析,实现对OTA的定量检测。检测体系优化后,得到标准曲线方程:y=34.8687x+42.8091,相关系数R2=0.9984,线性范围为0.1594-8.3792 ng/m L,最低检测限（LOD）为0.1146 ng/m L。该方法与其他真菌毒素均不发生交叉反应。在玉米、燕麦和大米样品中的回收率分别为95.04%-109.64%、93.48%-108.43%、97.98%-116.92%,均符合美国分析化学协会（AOAC）的规定。
2.基于银纳米团簇和钙黄绿素-铈离子的比率荧光免疫分析法
碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase,ALP）标记的二抗（Ig G-ALP）将PNPP去磷酸化使其分解为对硝基苯酚（PNP）和磷酸根。PNP通过内过滤效应（Internal filtration effect,IFE）猝灭银簇（BSA-Ag NCs）的荧光,磷酸根通过与铈离子结合恢复钙黄绿素-铈离子体系(Calcein-Ce3+)的荧光。在400 nm和450 nm激发光下,对酶标仪在640 nm和518 nm处读出的荧光强度进行分析,实现对OTA的定量检测。得到标准曲线方程:y=34.8469-0.5649x,R2=0.9981,线性范围为0.625-25ng/m L,LOD为0.04 ng/m L。该方法特异性良好,在玉米、燕麦和大米样品中的回收率分别为94.51%-105.54%、106.49%-110.44%、91.95%-100.75%,均符合AOAC的规定。
3.ALP催化铕离子配位聚合物介导的比率荧光免疫分析法
ALP在镁离子存在的情况下催化铕离子配位聚合物（Eu-CP）分解并促进镁离子配位聚合物的生成。在354 nm激发光下,对酶标仪在418 nm和618 nm处读出的荧光强度进行分析,实现对OTA的定量检测。得到标准曲线方程:y=0.3144x+0.1629,R2=0.9909,线性范围为0.4883-62.5 ng/m L,LOD为0.0273 ng/m L。该方法特异性良好,在玉米、燕麦和大米样品中的回收率分别为107.82%-119.11%、97.83%-110.14%、97.07%-105.45%,均符合AOAC的规定。
本研究建立了三种样品中定量检测OTA的免疫学方法,其中ic-ELISA检测法具有操作简便,成本低以及高通量等优点。基于BSA-Ag NCs和calcein-Ce3+的比率荧光免疫分析法的灵敏度优于ic-ELISA。ALP催化Eu-CP介导的比率荧光免疫分析法的灵敏度和检测范围均优于前两种方法。
关键词: 赭曲霉毒素A ；免疫分析法 ；比率荧光 ；内过滤效应
摘要： 孔雀石绿（MG）具有高度毒性、持久性和致癌性,广泛使用严重危害生态系统,威胁公共健康和食品安全,构建新的灵敏的多模分子光谱分析方法很有必要。本文介绍了表面增强拉曼散射光谱、荧光光谱技术、共振散射光谱技术以及紫外吸收光谱四模检测的研究进展,核酸适配体和MOF基纳米酶的发展状况,综述了孔雀石绿的检测方法及应用,并利用MOF基纳米酶优异的催化性能以及四模检测的方式,建立一个分析新方法应用于实际生活中。本论文针对MG的特点,采用SERS/RRS/荧光/光度四模法检测之,并制备出Cu NM,其作为催化剂催化TMB与H2O2反应,H2O2会给反应中的其他物质提供电子或吸收电子从而避免食物基质干扰和提高对分析物的识别能力,利用适配体与MG的特异性识别功能来检测孔雀石绿,从而达到避免食物基质干扰和提高灵敏度的目的。具体研究工作内容如下:首先以铜金属有机框架（Cu MOF）为前驱物,采用高温焙烧法制备出铜基纳米酶（Cu NM）,采用X射线衍射（XRD）、X射线光电子能谱（XPS）、透射电镜（TEM）和氮气-吸附脱附技术等手段对合成的Cu NM材料进行表征。实验发现,Cu NM催化H2O2氧化3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB）生成氧化产物TMBOX;MG适配体（Apt）可以分子间作用吸附在Cu NM表面,会抑制Cu NM的催化性能;当加入待测物MG后,Apt与Cu NM脱附,Cu NM转变为游离状态,从而恢复其催化活性。光波银为SERS和RRS基底,TMBox为SERS探针,一定范围内,其Cu NM-H2O2-TMB-Tris-HCl-Apt-MG体系SERS强度变化值与MG浓度呈线性关系。这一新的纳米催化指示反应可采用SERS/RRS/荧光/Abs四模法检测。结果表明,对MG的检测具有令人满意的选择性和合理的重现性。在检测范围为0.004-0.4 nmol/L时,最低检测限为0.0032 n M。因此,建立了一个快速、稳定、灵敏度高的检测环境中孔雀石绿残留的检测方法。
关键词: SERS ；适配体 ；碳基纳米酶 ；四模分析法 ；催化
摘要： 可视化检测方法是一类以光学响应信号为基础,颜色变化为分析依据的方法,通过肉眼分析溶液颜色深浅或种类变化,实现对目标物的可视化检测,它具有操作简单、结果可视化和不需要复杂或昂贵的仪器等优点。随着纳米科技的迅猛发展,贵金属纳米材料由于其优异的光学特性、高效的催化活性和表面易于修饰等优点,被广泛用于构建可视化传感器,极大提高了可视化传感器的稳定性和灵敏度。本论文基于贵金属纳米材料独特的物理和化学性质,构建了简单便携、灵敏度高的可视化传感器,并应用于食品安全检测、疾病诊断和环境监控等领域。1)免疫测定为实施各种快速、简单和灵敏的生化检测提供了理想的系统。在本文中,已经开发了“Signal-off”调谐“Signal-on”（SF-T-SN）比色免疫测定法,用于检测抗病毒药物金刚烷胺（AMD）。在这种策略中,传统竞争性“Signal-off”免疫测定法是以免疫识别信号随AMD浓度增强而减弱为基础。引入活性金属调节过氧化物纳米模拟酶的活性,将传统的“Signal-off”模式有效地转化为更令人满意的“Signal-on”报告机制,并克服了使用天然酶的弊端。重要的是,由于报告机制的切换和纳米酶的高催化活性,这种“从off到on”的方式使得基于纳米酶的比色响应信号与AMD浓度成正比,从而规避传统“Signal-off”免疫测定检测小分子时有限的信号放大和灵敏度低等固有缺陷。因此,通过肉眼或测量光学信号可以灵敏地检测AMD浓度。基于这一方法,当前的灵敏度（肉眼为0.195 ng/mL,光学检测为0.134 ng/mL）不仅比已报道的方法优越,而且比传统“Signal-off”免疫分析法通过肉眼观察和UV–vis测量的灵敏度至少提高了60倍和2倍。还可以检测出掺入AMD的鸡肉样品,其回收率和相对标准偏差（RSD）均在可接受范围内,这表明该方法可用于未来的生化分析和食品安全监测。2)末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）是急性白血病等疾病的常见生物标记物,检测TdT活性对于临床疾病的早期诊断和药物筛选至关重要。在本文中,基于刻蚀剂氧化态的3,3',5,5'–四甲基联苯胺(TMB2+)刻蚀金纳米棒（Au NRs）,开发了一种简单快速、免标记、高灵敏度且多色视觉检测TdT活性的比色传感器。经TdT扩增作用下延伸的富G DNA产物在Hemin和K+的帮助下形成了具有辣根过氧化物酶催化活性的G-四链体/Hemin模拟酶,从而催化H2O2氧化TMB在酸性条件下得到刻蚀剂TMB2+。基于此,随着TdT浓度的增加,Au NRs被逐渐刻蚀,导致Au NRs的纵向LSPR峰蓝移并伴随着一系列颜色变化。在最佳实验条件下,该比色传感器可用于定量监测动态范围为0.25–12 U的TdT活性,UV–vis测量和肉眼检测限分别为0.21 U和1.0 U。相比于检测TdT活性的传统比色方法,不同TdT活性与多种颜色一一对应是该比色传感器最吸引人的优点。同时该传感器灵敏度高,选择性好,无需使用复杂的设备即可轻松读取结果,适用于资源受限区域的实时现场检测。3)黄曲霉毒素B1是一类广泛存在于农产品、食物和粮油中,且对肝脏具有强烈毒性和致癌性的食品污染物。在本文中,我们将磁珠酶联免疫测定法（MagLISA）和银纳米壳包金纳米棒机制结合起来,提出了一种基于银壳金核纳米棒的磁珠多色免疫测定法（MBMCIA）用于高灵敏、高分辨检测超低浓度AFB1。为了设计这种免疫测定系统,首先使用磁珠（MBs）代替微孔板为固定相,通过EDC/NHS反应合成MBs-AFB1-BSA复合物;然后碱性磷酸酶（ALP）作为MagLISA和显色反应的桥梁,催化水解抗坏血酸磷酸酯钠（AA-P）生成抗坏血酸（AA）;生成的抗坏血酸将银离子还原为银单质并沉积在Au NRs表面,从而改变Au NRs的纵向LSPR峰和溶液颜色。在最佳条件下,所设计的MBMCIA在0.01–1.00 ng/mL的AFB1浓度范围内,溶液颜色发生从红色到紫红色、紫色、蓝色、绿色和浅绿色的生动颜色变化,检测限（LOD）低至5.7 pg/mL,可肉眼半定量检测低浓度目标物。同时,实际样本加标的回收率（99.1%–104.3%）和相对标准偏差（1.51%–7.05%）结果表明MBMCIA可适用于分析实际样本。MBMCIA集分离、富集、抗干扰和可视化读数为一体,为现场可视化食品安全检测和环境监控开辟了新途径。
关键词: 贵金属纳米材料 ；可视化检测 ；金刚烷胺(AMD) ；末端脱氧核苷酸转移酶(TdT) ；黄曲霉毒素B1(AFB1)
摘要： 邻氯硝基苯选择性催化加氢制备2,2'-二氯氢化偶氮苯,是制备3,3′-二氯联苯胺工艺中最重要的有机反应。但邻氯硝基苯在加氢还原过程中易受氢解脱氯的影响,而且目前邻氯硝基苯催化加氢反应的溶剂大多为有机溶剂。这些有机溶剂大部分具有挥发性和毒性,这会让产品分离过程中能源消耗增加,有机溶剂在反应后处理中难以避免会产生损失。近年来,随着国内环保形势的逐渐严峻和国际市场对偶氮染料中间体的需求不断上升,因此开发一种绿色高效合成3,3'-二氯联苯胺的生产工艺具有重要意义。
本文对市面上7种活性炭进行筛选和硝酸氧化预处理,通过浸渍法和氢气还原法制备出Pt/AC5-20催化剂用以邻氯硝基苯为原料,在不加入有机溶剂的条件下催化加氢得到2,2'-二氯氢化偶氮苯,将得到的2,2'-二氯氢化偶氮苯固体进行转位重排反应得到3,3'-二氯联苯胺。通过单因素实验得到最合适的加氢工艺条件为3%Pt/AC5-20催化剂,乳化剂为十二烷基苯磺酸钠,助催化剂2,3-二氯-1,4-萘醌,催化剂、乳化剂、碱液、助催化剂的用量分别为邻氯硝基苯质量的1%、0.8%、50%、0.4%,氢气压力为1.0 MPa,反应温度为343 K,氢氧化钠溶液的质量分数为17%,在此反应条件下催化剂循环使用11次后仍然具有较高的催化活性。
2,2'-二氯氢化偶氮苯转位重排的方法选择硫酸重排法,其最合适反应条件为硫酸浓度为70%;硫酸溶液与2,2'-二氯氢化偶氮苯的摩尔比为14;反应时间10小时;反应温度选择278～283 K。重排反应中最佳的反应条件得出产品3,3'-二氯联苯胺的收率可达到90%左右,产物纯度可达99%。
对失活催化剂和新鲜催化剂进行电感耦合等离子体发射光谱,透射电镜、N2低温吸附脱附等表征,结果发现失活催化剂的比表面积明显下降,得出催化剂失活的主要原因是催化剂内部的孔道被堵塞。后续采用5%硫酸、邻二氯苯、去离子水和N-甲基吡咯烷酮进行催化剂再生,实验发现N-甲基吡咯烷酮的再生效果最好,再生后的催化剂能够恢复到新鲜催化剂加氢性能的98.11%。
本文制备的3%Pt/AC5-20催化剂采用无溶剂法催化加氢制备2,2'-二氯氢化偶氮苯,经过硫酸重排法得到3,3'-二氯联苯胺的收率可达到90%左右,产物纯度达到99%。这为3,3'-二氯联苯胺的绿色合成提供了一种思路和方向。
关键词: 催化加氢 ；铂碳催化剂 ；重排反应 ；3,3'-二氯联苯胺 ；2,2'-二氯氢化偶氮苯
摘要： 配体保护的金属纳米团簇（MNCs）由于其独特的性质,比如离散和尺寸依赖的电子结构、强光致发光（PL）、磁性、固有手性和高催化活性等引起了广泛关注。重金属铬离子已被公认为环境中的重污染物质之一,虽然铬是一种微量元素,但是容易积聚在体内,损害呼吸系统和消化系统,对人体具有高度致癌性。根据环境保护署（EPA）的规定,饮用水中的铬离子不得超过100μg/L。检测重金属铬离子的各种分析方法包括质谱、电化学、离子色谱、表面增强拉曼光谱和原子发射光谱。然而,这些方法通常依赖于昂贵的设备,复杂的实验室条件,不适合快速、高效地测定六价铬离子(Cr（VI）)。本文从金属纳米团簇角度出发,初步探讨了其结构特征、类酶活性及催化机理等,并将其成功地应用于真实水样中重金属铬离子的灵敏检测。主要研究内容如下:1.基于牛血清白蛋白（BSA）稳定的铜纳米团簇（BSA-Cu NCs）过氧化物酶样活性的Cr（VI）比色测定:以3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB）为底物,利用BSA-Cu NCs的过氧化物酶样活性,在H2O2存在下,能够催化TMB氧化为ox TMB,溶液颜色将从无色变为蓝色。此外,8-羟基喹啉（8-HQ）可以显著抑制TMB氧化的颜色反应,而Cr（VI）可以与8-HQ特异性相互作用以恢复这种显色反应。基于此,建立了一种检测Cr（VI）的比色传感系统。该传感系统具有宽线性范围,检出限低至0.54μM,并且拥有良好的选择性和优异的抗干扰能力。2.BSA稳定的具有光响应氧化酶的银纳米团簇(BSA-Ag13 NC),用于Cr（VI）的比色分析:尽管BSA-Cu NCs显示出优秀的过氧化物酶样活性,但由于H2O2的不稳定性,向反应体系中添加H2O2会破坏反应环境,因此避免使用H2O2,可以提高纳米酶的分析性能。以BSA为稳定剂,合成了具有低毒性,优异的光稳定性和生物相容性的银纳米团簇(BSA-Ag13 NC)。利用BSA-Ag13 NC的光响应氧化酶活性,基于8-HQ与Cr（VI）之间的鳌合作用,合理的设计了一种快速检测Cr（VI）的比色法,检测限低至2.32 n M。并且成功应用于湖水、自来水和污水中Cr（VI）的检测,取得了满意的结果。3.基于金纳米团簇（Au NCs）的双功能特性,开发了一种比色和荧光双通道法检测Cr（VI）:尽管Ag数量丰富且经济,但它们的尺寸不稳定、易受环境影响的缺点,使它们无法在恶劣条件下稳定存在。这些不利因素加剧了探索Ag NCs的难度。我们合成了更加稳定的金纳米团簇（Au NCs）,并基于其光响应氧化酶的活性和荧光特性,开发了一种用于Cr（VI）测定的比色荧光双通道测定法。BSA-Au NCs在光照下可催化无色TMB氧化为蓝色氧化TMB（ox TMB）。有趣的是,ox TMB和BSA-Au NCs之间的内部过滤效应会导致BSA-Au NCs的荧光猝灭。所提出的双通道检测方法具有优异的选择性和高灵敏度。比色法和荧光法的检测限分别低至2.76和1.64 n M。该方法不仅具有比色法简单快速的优点,而且具有荧光法灵敏度高的优点。此外,双通道信号可以减少误差波动并使结果更准确。
关键词: 纳米酶 ；金属纳米团簇 ；六价铬 ；比色和荧光分析 ；环境监测
摘要： 丙烯酰胺（AAm）是美拉德反应过程中产生的内源性危害物之一,常见于油炸和烘焙食品中,低剂量的AAm具有遗传毒性和致癌性,可能导致人类细胞中基因表达的突变,居民膳食中AAm的监测是食品安全领域需要关注的重点问题。现如今,现象明显、操作简单的比色传感法在食品危害物检测方面展现出巨大的应用潜力,但仍存在稳定性不强、设计模式单一等问题。为了丰富丙烯酰胺的检测方式,优化检测性能,选择比表面积大、表面易修饰、具有类酶活性的金属有机框架（MOFs）材料作为生物载体和纳米酶,结合天然酶与核酸适配体构建了比色适配体传感法用于特异性检测AAm。利用MOFs的孔径和类酶活性与天然酶结合构建了双酶比色体系,可提高天然酶的稳定性和催化活性,进一步结合AAm的适配体提高了检测的特异性与灵敏度,为基于酶-底物的传感法构建提供了新的思路,主要工作内容有以下两个方面:
1、利用具有过氧化物酶活性的MIL-101包埋葡萄糖氧化酶（GOx）制备了双酶级联体系MGzyme,以适配体（Apt）作为生物识别元件,结合磁性纳米粒子（MNPs）和互补DNA（c DNA）分别制备了捕获探针MNP-Apt和信号探针MGzyme-c DNA,二者杂交构建比色适配体传感法。加入AAm后MNP-Apt会与AAm通过碱基互补配对结合,磁分离后MGzyme-c DNA被释放于上清液,此时取上清进行比色实验可原位生成H2O2,而后产生·OH催化3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB）变蓝,AAm的浓度与比色信号强度呈正相关,在最优条件下,比色体系在652 nm处的紫外吸光度相对值大小与丙烯酰胺浓度的对数值之间存在良好的线性关系,线性范围为0.01μM～100μM,检测限为1.53 n M,应用于植物基人造肉、饼干和薯片中丙烯酰胺检测的回收率为99.00%～104.40%,与ELISA测得的结果一致。本方法同时利用MIL-101的类过氧化物酶活性与高孔隙率构建了双酶级联体系,结合适配体提高了比色传感法的特异性与灵敏度,为美拉德反应过程中产生的内源性危害物的检测提供了新的思路。
2、选择比表面积较大、表面易修饰的UiO-66-NH2作为乙酰胆碱酯酶（ACh E）的载体构建UAzyme,在其表面负载AAm的适配体构建了适配体门控探针UAzyme-Apt,用于特异性检测AAm。具有氧化酶活性的双金属掺杂MIL-53（Fe/Mn）可直接将无色TMB氧化为蓝色ox-TMB,产生明显的比色信号;AAm加入后与Apt结合使其脱离UAzyme表面,UAzyme得以与乙酰硫代胆碱（ATCh）反应,产物硫代胆碱（TCh）会削弱MIL-53（Fe/Mn）的氧化TMB显色的能力。在最优条件下,体系在652 nm处的紫外吸光度相对值与AAm浓度的对数值呈负相关,检测限为9.94 n M,线性范围为0.05μM～100μM,在麻花、面包和植物基人造肉中的加标回收率为89.27%～108.10%,与ELISA测得的结果一致。本方法构建的适配体构建门控探针可调控UAzyme的催化活性,提高传感法的检测灵敏度与特异性,为基于酶和底物比色适配体传感法的构建提供了参考。
关键词: 金属有机框架 ；适配体 ；比色 ；丙烯酰胺
摘要： 金属有机框架（MOFs）是由中心金属离子或金属簇通过配位键与有机配体自组装而形成的一类具有周期性网络结构的多孔结晶材料。由于其具有独特的结构特征,包括高孔隙率、大的比表面积、可调节的多孔尺寸和形状等,使MOFs广泛应用于气体储存和分离、催化、传感、药物递送和吸附等领域。其中,ZIF-8拥有良好生物安全性、p H响应性、稳定性且表面易于修饰与改性,因此可应用于生物医学和环境处理等领域。
手术后持续性疼痛的监测和管理目前在临床上仍然是一个挑战。局部麻醉药可通过可逆、暂时地抑制神经冲动的传导从而产生镇痛作用。罗哌卡因（RVC）是一种新型的酰胺类局麻药,但由于半衰期较短,难以达到术后镇痛的期望时间。将局麻药封装到纳米载体中实现缓慢释放以延长镇痛作用和降低药物毒性是临床值得研究的课题。到目前为止,人们已经开发出用于递送局麻药的载体,包括壳聚糖、水凝胶、脂质体和其他可生物降解聚合物等。虽然这些材料具有低毒性和良好的生物相容性,但也存在载药率低和不稳定等缺点。
除了临床医疗领域的问题,也需要从源头关注公共健康。随着社会和工业的快速发展,许多有机污染物如有机溶剂和有机染料被带入了水环境,影响着人类的健康生活。刚果红（CR）就是一种常见的阴离子染料,对眼睛和皮肤具有刺激作用,可代谢为联苯胺,有强烈的毒性和致癌性。因此,开发有效的方法去除废水中的CR刻不容缓。壳聚糖气凝胶（CSA）由于具有丰富的三维多孔结构、高孔隙率和众多活性吸附位点而在吸附领域有着广泛的应用,同时也是一种适合ZIF-8的基底材料,可以解决ZIF-8容易聚集的缺点。但纯CSA仍存在骨架强度弱、机械强度不足、水稳定性差、比表面积低等缺点。聚乙烯醇（PVA）由于具有高拉伸强度、可塑性和柔韧性可用来掺入进CSA以增强其机械性能和稳定性。
针对于以上问题,本课题基于ZIF-8设计合成了两种不同类型的复合材料递送局麻药罗哌卡因和去除水环境中的有机染料刚果红。具体的研究内容如下:
1.首先将临床上常用的亲水性盐酸RVC注射液制备为疏水性的RVC碱,用ZIF-8作为药物载体,采用乳化-溶剂挥发法中的单乳化法（O/W）制备了一种ZIF-8包裹RVC的缓释微球（RVC@ZIF-8）。RVC@ZIF-8均匀分布且呈现表面光滑的球状形貌,拥有较高的载药率和良好的缓释效果,载药率为30.6%,体外至少释放96 h。除此之外,RVC@ZIF-8对RAW 264.7细胞具有较低的细胞毒性并对小鼠红细胞具有良好的血液相容性。体内药效学实验表明RVC@ZIF-8具有长效、可逆、安全的局麻作用。在坐骨神经阻滞模型中,RVC@ZIF-8组的感觉阻滞时间较RVC组明显延长,注射给药后持续72 h以上并且未发现大鼠坐骨神经及周围肌肉组织的炎症或明显病变。
2.选择天然多糖壳聚糖（CS）和聚乙烯醇（PVA）分别作为基本原料和添加剂,利用分子间相互作用、共价交联、冷冻干燥及原位生长的方式,成功制备了ZIF-8修饰的聚乙烯醇/壳聚糖复合气凝胶（ZIF-8@P/CSA）。ZIF-8@P/CSA保留了CSA的三维孔隙结构并且ZIF-8负载率为30.47%。PVA的掺入使得ZIF-8@P/CSA表现出较好的机械强度,具有优异的压缩回弹性、柔韧性和水稳定性。ZIF-8@P/CSA对CR的吸附过程符合准二级动力学和Langmuir等温线模型,表明化学吸附是决定速率的步骤,并且该过程以单层吸附为主,对CR理论最大吸附量高达1216.5 mg·g-1,可重复利用性高,经过5次吸附循环实验后仍保持着91%以上的百分比去除率。
关键词: 金属有机框架 ；药物缓释 ；多糖气凝胶 ；吸附
摘要： 工业源排放的挥发性有机物（volatile organic compounds,VOCs）来源十分复杂,一直是我国大气污染管控中的一个难题。VOCs不仅是PM2.5和臭氧的重要前体物,而且具有危害人体健康的毒性和致癌性。探明VOCs来源、大气化学作用及其环境影响,是目前我国大气复合污染研究中的关键内容之一。本研究利用高时间分辨率单光子电离质谱仪（single photon ionization mass spectrometer 3000,SPI-MS 3000）分别对江苏省南京市浦口区和江宁区临近化工园区大气环境中的VOCs污染开展了外场观测,探究和厘清了VOCs的来源结构、二次污染贡献和健康风险等重要污染特征。另外,本研究围绕当前城镇居民投诉最强烈的恶臭VOCs污染问题,对盐城市响水化工园区内嗅阈值低、刺激性强和扰民频繁的恶臭因子开展了走航观测。在SPI-MS成分谱基础上,结合气象参数、污染物浓度、嗅阈值等指标,识别解析出化工园区不同行业的风险源分布、关键致臭因子和迁移扩散等排放特征。利用风险指数（hazard index,HI）开展了恶臭VOCs的健康风险评估。通过上述研究,系统对比和探明了典型工业区VOCs污染成因、化学转化和潜在环境风险的差异,填补和发展了该地区VOCs污染特征及恶臭因子识别表征的基础研究体系,对于制定有效的VOCs控制措施、改善区域空气质量和保障公众健康具有重要科研意义。本文的主要结论如下:（1）本研究分别对南京浦口区（44.59±49.95 ppb）和江宁区（18.79±8.11 ppb）大气环境中的VOCs进行了研究。气象参数和常规污染物观测结果显示,江宁观测点相比于浦口观测点风速相差不大,但气温较低,相对湿度较高。六种常规污染物的浓度除O3外,江宁区均略高于浦口区。另外,两个观测地点所检测出的VOCs都呈现出了类似的日变化规律,即中午浓度有所下降,凌晨与夜晚浓度有所抬升。浦口区大气中VOCs浓度高值组分为正己烷（11.08±1.57 ppb）和三氯乙烷（10.11±37.56 ppb）;江宁区为三甲苯（2.58±0.06 ppb）和正十三烷（1.54±0.68 ppb）。浦口区二次污染贡献高值组分为三甲苯,其臭氧生成潜势（ozone formation potential,OFP）和二次有机气溶胶生成潜势（secondary organic aerosol formation potential,SOAFP）分别为74.05±15.7μg/m3和0.73±0.16μg/m3;江宁区二次污染贡献高值组分同样也是三甲苯,其OFP和SOAFP值分别为92.62±2.37μg/m3和0.91±0.02μg/m3。VOCs和NOX敏感性分析研究结果显示,该区域均属于VOCs控制区,对该区域VOCs排放进行控制将有效缓解臭氧污染。（2）正交矩阵因子分解（positive matrix factorization,PMF）模型对两个研究地点解析出4个排放因子,浦口区主要是以工业生产+溶剂使用占比最高为43.3%;交通排放占比为28.2%;三氯乙烷工业排放占比为17.5%;溶剂使用占比为11.0%。江宁区主要是以交通排放+溶剂使用和工业生产+溶剂使用两个复合因子所主导,占比为别为31.0%和27.4%;油气挥发占比为21.1%;交通排放占比为20.5%。通过混合单粒子拉格朗日积分轨迹模型（hybrid single-particle lagrangian integrated trajectory model,HYSPLIT）结合浓度权重轨迹分析（concentration-weighted trajectory,CWT）结果表明,2022年7至8月南京溧水区、常州、苏州和南昌等地均有VOCs潜在污染源。2021年8至9月徐州,南京、苏州、上海、合肥和杭州等地形成有VOCs潜在污染源。健康风险评估结果表明:浦口区与江宁区两个观测站点所检测出的丙烯醛是最主要的非致癌慢性风险物质,尤其是江宁观测站点。两个站点的主要风险物质包括三氯乙烷、六氯-1,3-丁二烯、丙烯醛和二氯丙烯。（3）在响水化工园区进行的48小时走航观测结果表明,9月9日和10日TVOC浓度水平相差不大,但是9月10日出现了极端高值点,表明在该点处的VOCs无组织排放应当额外重视。检测到的VOCs主要包括甲苯、苯胺、二乙基苯、壬烷、三甲苯、二溴甲烷、1,1-二氯乙烯、己烯、甲基环戊烯、戊烯和二氯苯等。异常点位分析结果表明,部分化工企业附近存在着总挥发性有机物（total volatile organic compounds,TVOC）污染源,可能由于这些企业的相关车间有机物排放造成。相关物种的健康风险评估结果表明,研究区域存在着数种慢性致癌风险的物质（由1,2-二溴乙烷、1,1,2,2-四氯乙烷和1,3-丁二烯等物质主导）,HI值均高于安全阈值,表明该区域存在着慢性非致癌风险（由苯胺、1,2,4-三氯苯等物质主导）。通过恶臭物质分级赋值,筛选出人体所能感知到的前十种物质（主要为硫醇类化合物与苯系物）,并结合当时气象条件,对其恶臭污染物进行溯源。（4）针对南京江宁城区大气环境中VOCs的进行了离线补充分析,结果表明平均TVOC浓度为29.04±14.89ppb,较其他城市测量结果低,芳香烃是OFP值中最重要的VOCs组分,说明优先控制芳香烃将有利于减少臭氧污染的发生。通过估算测得的VOCs的LCR和NCR,与在线分析相同,丙烯醛、三氯乙烷等物质的部分NCR值和LCR值超过建议阈值,其他物种除了少数化合物外,总体健康风险较低。此外,PMF分析确定了5个VOCs潜在排放来源,交通排放贡献最高,其次是溶剂使用、生物源排放、油气挥发和工业排放。然而,在下午,交通排放和溶剂使用的贡献较低,而生物源排放反而成为最大的贡献者。PMF-MLR分析将VOCs的NCR成功分配给了5个PMF模型解析出的潜在排放源,其中生物源排放是NCR最重要的来源,并且对下午样本的贡献超过了所有其他来源的总和。
关键词: 挥发性有机物 ；排放特征 ；二次转化 ；恶臭因子 ；健康风险
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