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    1. 认领
    【期刊论文】 •

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    乔利敏 1

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    李向臣 2

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    乔富强 3

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    姚华 4
    +3位作者
    • 《畜牧兽医学报》 CSCD 北大核心 • 2011年第9期 1249 - 1255, 共7页
    机构: [1] 北京农业职业学院畜牧兽医系[2] 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所[3] 北京农学院科技产业集团 +1个机构

    摘要: 利用亮甲酚蓝(Brilliant cresyl blue,BCB)对牛未成熟卵母细胞进行染色,根据染色结果的不同对牛未成熟卵母细胞进行分组培养,观察不同组间卵母细胞发育潜能与细胞凋亡的差异,探讨以BCB着色判定牛卵质量的可行性。本试验在牛卵母细胞成熟培养前用26μmol.L-1 BCB染色90min作为处理组(BCB+和BCB-),以未染色卵母细胞作为对照组;以卵内谷胱甘肽的浓度作为胞质成熟的判定指标,以卵母细胞体外受精后囊胚率作为卵子发育能力的判定指标,同时参照卵母细胞的凋亡检测,综合评定卵子的质量。结果表明:(1)着色组(BCB+)卵母细胞成熟率与对照组和无色组(BCB-)间差异显著(P<0.05);(2)成熟卵母细胞中谷胱甘肽的浓度较培养前差异显著(P<0.05);(3)经BCB染色,卵母细胞在成熟后,BCB+组的成熟率、凋亡率较对照组、BCB-组差异显著(P<0.05);(4)体外受精后,BCB+组的囊胚率和囊胚细胞数较对照组和BCB-组差异显著(P<0.05)。由此可见,牛卵母细胞经BCB的染色选择可以作为判断卵母细胞未来发育潜能的一个标记。 摘要译文
    关键词: 牛 ;卵母细胞 ;BCB ;发育潜能
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    2
    2. 认领
    【期刊论文】 •

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    乔利敏 1

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    乔富强 2

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    姚华 3

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    关伟军 4
    +1位作者
    • 《中国畜牧杂志》 北大核心 • 2012年第5期 27 - 30, 共4页
    机构: [1] 北京农业职业学院畜牧兽医系[2] 北京农学院科技产业集团[3] 北京农学院动物科学技术学院 +1个机构

    摘要: 为研究亮甲酚蓝(brilliant cresyl blue,BCB)染色选择卵母细胞对牛核移植体系的影响,本实验以未进行染色处理的牛卵丘-卵母细胞复合体(COCs)作为对照组,在成熟培养前用26μmol/L亮甲酚蓝染色90 min作为处理组,将处理组依照胞质的颜色分为蓝色组(BCB+)和无色组(BCB-),分别在成熟培养后作为受体,经胞质内注射法构建牛体细胞核移植胚胎,统计体细胞核移植的卵裂数、囊胚数和囊胚细胞数来评价其发育潜能。结果表明:BCB+组的成熟率(80.9%)与对照组(60.2%)和BCB-组(51.9%)差异显著(P<0.05);BCB+组的囊胚率(32.26%)与对照组(21.49%)和BCB-组(5.95%)差异显著(P<0.05),另外BCB+组的囊胚细胞总数(132.5)显著高于其他组(P<0.05)。结果显示,通过亮甲酚蓝染色法筛选出成熟的高质量牛卵母细胞用于体细胞核移植,可以获得更高的克隆囊胚率。 摘要译文
    关键词: 体细胞核移植 ;亮甲酚蓝 ;囊胚 ;牛
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    被引量 4
    3
    3. 认领
    【期刊论文】 •

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    乔利敏 1

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    乔富强 2

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    姚华 3

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    雷莉辉 1
    +3位作者
    • 《中国畜牧兽医》 北大核心 • 2014年第11期 171 - 174, 共4页
    机构: [1] 北京农业职业学院畜牧兽医系[2] 北京农学院科技产业集团[3] 北京农学院动物科学技术学院 +1个机构

    摘要: 为了探讨亮甲酚蓝(brilliant cresyl blue,BCB)对牛未成熟卵母细胞染色选择后对其体外成熟(IVM)和凋亡的影响,本研究在牛卵母细胞成熟培养前用26μmol/L BCB染色90min作为处理组,以未染色卵母细胞作为对照组;将处理组依照胞质的颜色分为蓝色组(BCB+)和无色组(BCB-),成熟培养后检测卵子的发育能力。结果表明:1经BCB染色卵母细胞在成熟后,BCB+组卵母细胞成熟率(80.92%)较对照组(60.00%)和BCB-组(51.61%)差异显著(P<0.05);2BCB+组的凋亡率(6.50%)较对照组(28.21%)、BCB-组(39.06%)差异显著(P<0.05),随着卵母细胞发育潜能的升高其凋亡率逐渐降低。由此可见,以亮甲酚蓝染色为基础的牛卵丘-卵母细胞复合体的区分可以用来有效的选择更具发育活力的牛卵母细胞。 摘要译文
    关键词: 牛 ;卵母细胞 ;亮甲酚蓝染色 ;体外成熟
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    被引量 4
    4
    4. 认领
    【会议论文】 •

    发文量: 被引量:0

    乔利敏 1

    发文量: 被引量:0

    乔富强 2

    发文量: 被引量:0

    姚华 3

    发文量: 被引量:0

    雷莉辉 1
    +2位作者
    作者单位: [1] 北京农业职业学院畜牧兽医系[2] 北京农学院科技产业集团[3] 北京农学院动物科学技术学院 +1个机构

    会议名称:
    会议时间: 2014-10-24
    摘要: 为了探讨亮甲酚蓝(brilliant cresyl blue,BCB)对牛未成熟卵母细胞染色选择后对其体外成熟(IVM)和凋亡的影响,本研究在牛卵母细胞成熟培养前用26μmol/LBCB染色90mi n作为处理组,以未染色卵母细胞作为对照组;将处理组依照胞质的颜色分为蓝色组(BCB+)和无色组(BCB—)。成熟培养后检测卵子的发育能力。结果表明:(1)经BCB染色卵母细胞在成熟后,BCB+组卵母细胞成熟率(80.83%)较对照组(60.20%)和BCB—组(51.92%)差异显著(P<0.05);(2)BCB+组的凋亡率(6.50%)较对照组(28.21%)、BCB—组(39.06%)差异显著(P<0.05),随着卵母细胞发育潜能的升高其凋亡率逐渐降低。由此可见,以亮甲酚蓝染色为基础的牛卵丘—卵母细胞复合体的区分可以用来有效的选择更具发育活力的牛卵母细胞。 摘要译文
    关键词: 牛 ;卵母细胞 ;亮甲酚蓝染色 ;体外成熟
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    5. 认领
    【学位/硕士】 •

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    孔凤
    • 阜阳师范学院 • 导师:刘勇 • 2019年

    摘要: 背景:由于各种社会因素,高龄产妇所占比例逐年增加,伴随而来的是生育能力的降低,其中女性的卵巢功能降低、卵泡数量减少、卵泡质量下降是其中的重要原因。卵泡是卵子发生的场所,卵母细胞经过卵子发生的过程才能具有受精能力。卵泡发育异常会直接影响到卵母细胞的生长、成熟、受精及胚胎发育。本文通过模型动物即10-12月龄BDF1雌鼠模拟38-42.5周岁的高龄产妇,为其生育能力的研究提供借鉴和参考。方法:为了研究高龄小鼠与年轻小鼠之间存在的繁殖能力差异,分别从生理学、组织学、细胞学、发育生物学、表观遗传及分子生物学等方面进行了对比分析。通过观测发情周期、测定生殖激素含量研究了其生理学差异;利用组织学切片研究了雌鼠生殖器官的组织学差异;利用免疫荧光技术,通过激光共聚焦显微镜,对比研究了染色质构型、细胞凋亡及线粒体分布等细胞学差异;用亮甲酚蓝(Bright cresyl blue,BCB)染色检测其细胞代谢活性,用孤雌激活、RT-qPCR及体细胞核移植技术对比研究了重编程及发育潜能;用免疫荧光分析H3K36me3的表达,研究表观遗传差异。结果:与年轻小鼠相比,高龄小鼠的发情周期明显缩短(Aged=3.31±0.10 d,Young=4.78±0.16 d,P<0.05),同时也存在输卵管结构紊乱、上皮组织脱落和上皮空泡退化的现象;两组小鼠存在凋亡程度和线粒体分布的显著差异;但是采用体内成熟卵检测的核重编程能力和发育潜能结果表明,两组之间并无显著性差异(P>0.05);高龄小鼠H3K36me3修饰异常(P<0.05);高龄小鼠体内成熟卵Oct4表达有显著性差异(P<0.05),而Cdx2、Nanog、Sox17的表达未出现差异显著性。在卵子发生过程中,Germinal vesicle(GV)卵母细胞被分为两种构型,即染色质弥散分布的Non-surrounded nucleolus(NSN)构型,和染色质凝缩并围绕核仁分布的Surrounded nucleolus(SN)构型。通过对未成熟卵进一步细分,我们发现,高龄小鼠的SN构型卵母细胞表现出显著的线粒体凝集,细胞凋亡和异常的H3K36me3,而NSN构型卵母细胞除了凋亡程度有差异外几乎没有受到影响。总之,研究结果表明,虽然在高龄雌性小鼠中较低的E2含量导致发情周期缩短和卵泡质量下降,导致未成熟卵母细胞质量降低,特别是在SN型卵母细胞中,但是卵母细胞的发育潜能在高龄雌性小鼠中是正常的。这可能为高龄女性生殖带来了新的希望,为辅助生殖提供了新的研究策略。 摘要译文
    关键词: 高龄小鼠 ;卵巢功能 ;染色质构型 ;卵母细胞质量 ;发育潜能
    引用
    被引量 1
    6
    6. 认领
    【学位/硕士】 •

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    郭云云
    • 东北农业大学 • 导师:刘娣 • 2012年

    摘要: 在猪胚胎生产中,主要从屠宰场采集卵巢.由于挑选的卵母细胞来自不同生长阶段的卵泡,导致了卵母细胞质量存在差异。本研究通过亮甲酚蓝染色分选后对猪卵母细胞体外发育能力进行系统性的鉴定与研究,进一步对亮甲酚蓝筛选优质卵母细胞的方法进行验证,为保证核移植效率提供优质的卵母细胞。 本研究利用13μmol/L亮甲酚蓝(BCB)对GV期猪卵母细胞进行染色,分别检查了着色组(BCB+)、无着色组(BCB-)和对照组的卵母细胞直径、体外成熟情况、皮质颗粒迁移程度、成熟后谷胱甘肽GSH水平、乙酰荧光素FDA活力、孤雌胚胎发育能力与核移植胚胎的发育能力,为体细胞核移植提供优质的卵母细胞。在此基础上,初步研究了初次卵裂时间与孤雌胚胎发育潜能的关系。BCB染色后,对成熟卵母细胞进行孤雌激活,在激活后24h挑选出卵裂的胚胎,将其转移到新的培养滴中继续培养,剩余未卵裂的胚胎在激活后48h重复上述步骤,以0-48h未分时间段的胚胎作为一组,胚胎培养144h后,比较不同卵裂时间的胚胎发育能力,预测早期胚胎的发育潜能,为猪克隆胚胎移植提供优质的胚胎。 研究结果表明: 1)BCB染色后,猪卵母细胞直径测量与体外成熟情况:BCB+组卵母细胞直径大于BCB-组和对照组(120.47μm,104.94μm和114.81μm)。BCB+组卵母细胞成熟率为79.61%,BCB-组卵母细胞成熟率为53.51%,对照组卵母细胞成熟为63.64%,各组之间差异显著(P<0.05);染色组成熟率为66.59%,与对照组无显著差异(P>0.05) 2)BCB染色后,猪卵母细胞皮质颗粒迁移程度、GSH水平和FDA活力检测:BCB+组卵母细胞皮质颗粒迁移完全的比例为79.79%,BCB-组为27.06%,对照组的为48.87%,各组之间差异显著(P<0.05)。BCB+组成熟卵母细胞GSH含量显著高于(P<0.05)BCB-组和对照组(10.41pmol/oocyte、5.84pmol/oocyte和6.77pmol/oocyte)。BCB+组卵母细胞FDA活力率为91.43%,BCB-组为54.32%,对照组为72.11%,各组之间差异显著(P<0.05)。BCB+卵母细胞胞质成熟完全,有利于卵母细胞的后期发育。 3)BCB染色后,猪卵母细胞的孤雌胚胎发育情况与核移植胚胎发育情况:BCB+组孤雌囊胚率为34.28%、核移植囊胚率为23.74%显著高于(P<0.05)BCB-组(12.25%,6.28%)和对照组(26.52%,17.05%),且BCB+组囊胚的细胞数最多。 4)初次卵裂时间与孤雌胚胎发育潜能的关系:BCB+组0-24h卵裂的孤雌囊胚率为44.59%,25-48h为22.86%,0-48h为35.01%,各组之间差异显著(P<0.05)。BCB-组0-24h卵裂的囊胚率为22.58%高于25-48h(8.59%)和0-48h(12.47%)。对照组0-24h卵裂的囊胚率为35.54%高于其他两个时期的囊胚率(25-48h为15.88%、0-48h为21.38%),BCB+组卵母细胞早期卵裂的孤雌胚胎的囊胚率最高。 摘要译文
    关键词: 猪卵母细胞 ;亮甲酚蓝 ;体外成熟 ;发育潜能 ;初次卵裂时间
    引用
    被引量 7
    7
    7. 认领
    【学位/硕士】 •

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    张利
    • 石河子大学 • 导师:黄俊成 • 2014年

    摘要: 羔羊体外胚胎生产技术已成为家畜繁殖领域中的研究热点之一,但由于羔羊未达到性成熟和体成熟阶段,自然条件下无法收集到卵母细胞。因此,需要在羔羊的特定阶段,采用外源激素诱导,将获得卵母细胞作为实验材料。而本文是以成年羊卵母细胞研究为基础,研究了外源激素对诱导羔羊卵泡发育的作用、亮甲酚蓝染色液(BCB)与PDE3抑制剂Milrinone在羔羊卵母细胞体外培养中的应用,旨在提高羔羊卵母细胞的体外发育能力,实验分下面四部分: 1.卵泡直径对绵羊卵母细胞体外发育能力的影响 以屠宰场绵羊卵巢为材料,收集不同直径卵泡中的卵母细胞,小卵泡(小于2mm)、中卵泡(2~5mm)、大卵泡(大于5mm),以研究各卵泡直径所占比例、卵泡直径对卵母细胞的回收、卵母细胞直径、GSH含量及体外发育能力的影响。结果表明,三种卵泡所占比例差异极显著(P<0.01);卵母细胞的回收率间无差异(P<0.05),但小卵泡中的卵母细胞利用率极显著低于其他两组(P<0.01);小卵泡卵母细胞的直径极显著低于其余两组(P<0.01);体外成熟培养24h后,中、大卵泡卵母细胞的成熟率和卵母细胞GSH含量均显著高于小卵泡卵母细胞(P<0.05);经孤雌激活体外培养后,中、大卵母细胞囊胚率极显著高于小卵泡卵母细胞(P<0.01)。因此,卵泡大于2mm的卵母细胞适合体外培养和体外胚胎的生产。 2. BCB染色液对绵羊不同直径卵泡卵母细胞的筛选作用 为了探讨亮甲酚蓝(BCB)染色液对绵羊不同直径卵泡卵母细胞的筛选作用,本研究将筛选后的卵母细胞进行孤雌激活,比较不同组卵母细胞的后期发育能力。结果表明,直径大于5mm卵泡中的卵母细胞阳性率极显著高于5mm以下卵泡组(P<0.01);卵泡直径大于5mm中BCB+组卵母细胞孤雌激活后的体外培养效率显著高于小于2mm组和2~5mm组;不同实验组卵母细胞孤雌激活后获得的囊胚总细胞数结果显示,在BCB+组卵母细胞中,卵泡直径大于2mm组高于直径小于2mm组(P<0.01);BCB-组各组间没有差异(P>0.05);未经染色的卵母细胞中,直径大于2mm组也显著高于直径小于2mm组(P<0.05)。因此,直径大于2mm卵泡的卵母细胞用BCB染色液筛选后更适合体外培养,并且大于2mm BCB+组卵母细胞后期发育潜能更强。 3.外源激素诱导羔羊卵泡发育的研究 为了优化并提高羔羊卵泡的发育效率,本实验从FSH剂量、日龄、卵泡直径、体重及品种等5个方面进行了研究。结果表明,FSH总剂量为160IU的羔羊卵泡发育效果显著高于320IU(P<0.05),6周龄羔羊的卵泡发育效果显著高于4~5周龄、7~8周龄(P<0.05),8~12Kg羔羊卵泡发育效果显著高于12Kg以上的(P<0.05)。6周龄羔羊被注射等剂量FSH,萨福克和美利奴对激素的诱导效果显著高于特克赛尔(P<0.05)。因此,用160IU FSH处理6周龄,体重在8~12Kg的萨福克羔羊,卵泡发育效果较好。 4. BCB染色液与Milrinone在羔羊卵母细胞体外培养中的应用研究 为了提高羔羊体外胚胎生产效率,研究了BCB染色液对羔羊卵母细胞的筛选作用及milrinone对BCB-组卵母细胞的影响。结果表明,13μM BCB+组卵母细胞的体外培养效率与26μM组无显著差异(P>0.05)。筛选后的BCB+组卵母细胞直径和GSH含量显著高于BCB-(P<0.05),而二者都与成年羊差异不显著(P>0.05)。BCB-卵母细胞经milrinone抑制6h后,体外胚胎发育率显著高于BCB-组和对照组,而与成年羊无显著差异(P>0.05)。因此,BCB染色液与milrinone相结合,可以提高羔羊卵母细胞的体外培养效率。 摘要译文
    关键词: BCB ;激素诱导 ;milrinone ;绵羔羊 ;体外培养
    引用
    被引量 3
    8
    8. 认领
    【学位/硕士】 •

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    乔利敏
    • 甘肃农业大学 • 导师:关伟军 • 2009年

    摘要: 卵丘-卵母细胞复合体(COCs)作为胚胎体外生产的重要元件,其体外成熟(IVM)的质量是影响胚胎体外生产(IVEP)的关键因素之一,直接影响着卵母细胞的激活、受精及随后的胚胎发育能力。目前,胚胎生物技术研究主要是从屠宰场收集卵巢,由于卵巢的拣取、卵母细胞筛选的盲目性以及许多其它的因素,特别是卵母细胞的核质成熟存在着明显的不同步性,导致体外胚胎生产的效率仍然很低。利用卵母细胞体外成熟技术,可获得大量的廉价卵母细胞,既克服了超数排卵技术的局限性,又满足了胚胎工程技术发展的需要。本文以组织培养液199(TCM199)为基础培养基就牛未成熟卵母细胞经亮甲酚蓝(BCB)选择后对其体外成熟-体外受精-核移植(IVM-IVF-NT)的影响进行了研究,并且检测了卵母细胞成熟前后谷胱甘肽(GSH)的浓度,从而探索了一种较理想的筛选高质量卵母细胞的方法,在此基础上进一步研究了表皮生长因子(EGF)、β-巯基乙醇(β-ME)、亚硫磺酸(HTAU)对牛卵母细胞IVM-IVF-NT发育能力影响的研究,进而优化体外培养体系,以满足胚胎工程研究及生产性胚胎移植的需要,实现良种家畜胚胎的工厂化生产,加速畜牧业的发展。 实验结果表明: 1.牛未成熟卵母细胞经过13,26,39,52μmol/L的BCB染色90min后,其中用26,39,52μmol/L的BCB染色的BCB+组所占的百分率(27.7%,27.6%,31.9%)较13μmol/L的BCB染色后所占的百分率(2.1%)差异显著;并且染色后BCB+组间的成熟率差异不显著(P>0.05),其中BCB+组(77.4%)较BCB-组(51.3%)和对照组(60.2%)的成熟率差异显著(P<0.05),并且以26μmol/L BCB染色选择COCs最佳;通过26μmol/L BCB染色90min后,COCs在IVM-IVF-NT后BCB+组的囊胚率和囊胚细胞数最高并且较对照组、BCB-组差异显著(P <0.05)。从而证明BCB染色可以被用来有效的选择成熟前不同发育活性的牛卵母细胞。BCB染色本身不能提高MII期卵母细胞的成熟率和体外受精率,但有助于选择体外成熟以前有发育活性的卵母细胞。 2. COCs在经26μmol/L BCB染色90min后,试验结果显示对照组和处理组在成熟培养前后谷胱甘肽的浓度(unstained组,3.801034,7.418366 pmol/cell;BCB-组,3.51179,7.291422 pmol/cell;BCB+组,5.044247,11.26002 pmol/cell)差异显著(P<0.05);其中BCB+组较对照组和BCB-组中谷胱甘肽的浓度差异显著(P<0.05)。试验结果表明成熟后卵母细胞中GSH浓度大约是未成熟前卵母细胞中GSH浓度的2倍,而且经选择后的BCB+组卵母细胞成熟质量更高,有利于胚胎的后期发育。 3.经BCB染色后卵母细胞在成熟后的凋亡情况不一样。其中BCB+组的成熟率、凋亡率(80.9%,6.4%)较对照组(60.2%,27.6%)、BCB-组(51.9%,38.6%)差异显著(P<0.05)。表明随着卵母细胞发育潜能的降低其凋亡率逐渐升高。 4.三种化学激活方法Ionomycin +6-DMAP、A23187 +6-DMAP与乙醇+6-DMAP均能激活牛孤雌胚,使其发育;三种激活的方式均不能时间过长,以5 min效果较好,时间过长容易造成细胞碎裂;其中以Ionomycin +6-DMAP组激活效果较好。 5.试验表明BCB染色对未成熟卵母细胞质量的选择以及培养体系对SCNT效果的影响。得出结论:牛卵母细胞成熟培养前通过BCB染色可以选择不同发育能力的卵母细胞,从而为IVM-IVF的研究和体细胞核移植的成功率提供高质量的COCs;在核移植中,受体卵母细胞的选择以卵母细胞成熟前进行BCB染色为依据,以BCB+组作为受体卵母细胞,在成熟液中添加50 ng/mL EGF和100μmol/Lβ-ME,在核移植后重组胚培养液中添加0.5 mmol/L HTAU,其囊胚率32.26%较对照组不进行BCB染色不采用优化培养体系提高了79.22%,表明它是提高牛IVM-NT效率的优化体系。 摘要译文
    关键词: 牛 ;卵母细胞 ;体外成熟 ;胚胎培养
    引用
    被引量 4
    9
    9. 认领
    【学位/硕士】 •

    发文量: 被引量:0

    曹泽磊
    • 西北农林科技大学 • 导师:张涌 • 2009年

    摘要: 亮甲酚蓝(brilliant cresyl blue BCB)是一种生物染料,它可以和卵母细胞中的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6DPH)作用而不显色。这种酶在生长中的卵母细胞中含量比较大,随着卵母细胞的生长接近完成,这种物质也逐渐减少,乃至消失。生长期的卵母细胞中含有G6DPH,可以和亮甲酚蓝发生反应而不使卵母细胞着色,而生长完成的卵母细胞中G6DPH很少或接近没有,因此卵母细胞被BCB染成蓝色。被BCB染成蓝色的卵母细胞经体外成熟培养后,具有更好的发育潜能。因此可以通过BCB染色来选择着色的卵母细胞作受体细胞以此来提高核移植的效率。基于此,进行了以下研究: 1.研究BCB不同浓度与处理时间对成熟前卵母细胞着色率及成熟率的影响。结果表明,用26、39与52μmol/L的BCB染色后着色率(BCB+着蓝色)(58.5 %、60.3 %、61.4%)显著高于13μmol/L组(9.1%,P<0.05),但各组间BCB+的成熟率差异不显著(P>0.05),并且各染色组与对照组卵母细胞的成熟率差异不显著(P>0.05)。用26μmol/L的BCB染色90 min后所得到的着色率(59.3%)显著高于染色60、30 min的着色率(42.6%,26.5%,P<0.05),但处理时间延长至120min,着色率(60.2%)并没有得到明显的提高。 2.研究BCB染色对体外受精(IVM-IVF)的影响。本试验以未进行染色处理的牛卵丘-卵母细胞复合体(COCs)作为对照组,并设置处理对照组(在含有0.5%FBS的D-PBS中放置90 min再放入成熟液),在成熟培养前用26μmol/L BCB染色90 min作为处理组,将处理组依照胞质的颜色分为蓝色组(BCB+)和无色组(BCB-)。成熟培养后进行体外受精,授精后48 h统计卵裂率,7~8 d后检查囊胚率。结果表明: (1)染色后着色的卵母细胞成熟率(74%)与对照组(71.6%)和无色组(53.4%)差异显著(P<0.05) ; (2) IVF后蓝色组囊胚率(34.1%)较对照组(26.4%),控制对照组(24%)和无色组(8.7%)差异显著(P < 0. 05)。 3.亮甲酚蓝染色法提高核移植囊胚率。将采集的COCs分成三组,对照组:采集后COCs的直接放入成熟液培养,不用BCB处理;处理对照组:COCs于含有0.5%的FBS的D-PBS中90 min后放入成熟液中培养;试验组:将采集的COCs在含有26μmol/L BCB的D-PBS中放置90 min。然后将处理过的卵母细胞根据着色情况分为两组:BCB﹢(胞质呈蓝色,成熟卵母细胞)和BCB-(胞质未着色,生长期卵母细胞)。各组卵母细胞24小时体外成熟培养。分别用成熟后的各组卵母细胞用于细胞核移植,统计体细胞核移植的卵裂数、囊胚数和囊胚细胞数。结果表明BCB+组的囊胚率(41.9%)较对照组、控制对照组和BCB-组的囊胚率(34.9%,36.4%和9.6%)差异显著(P<0.05)。另外BCB+组的囊胚细胞核数(114.5±7.5)较其它组较高,且差异显著(P<0.05)。经囊胚细胞凋亡检测后发现BCB+组的囊胚细胞凋亡率(16.9%)虽显著低于BCB-组(35.9%),但仍高于对照组(10.4%)和控制对照组(8.5%)。 摘要译文
    关键词: 牛 ;亮甲酚蓝 ;筛选 ;卵母细胞
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