摘要: 浙贝母Fritillaria thunbergii Miq.隶属于百合科(Liliaceae)贝母属(Fritillaria L.),多年生草本,又名浙贝、珠贝、大贝、元宝贝、象贝,目前主产于浙江(北部)、江苏(南部)、安徽、湖南等省,以宁波产量最大。1963年《中国药典》首次将浙贝母收录,其具有清热化痰止咳,解毒散结消痈的功能,是中药处方中的常用药味。我国对于浙贝母化学成分的研究始于1923年,对此研究较多的应为张建兴,目前浙贝母中的化学成分多达几十种,生物碱类成分主要为异甾体生物碱,非生物碱主要为二萜、脂肪酸、β-谷甾醇及其苷类、黄酮类等。其独特的化学成分及活性表明对其进一步的研究是具有意义的。
本论文共分为三章,第一章的主要内容为对浙贝母化学成分和活性研究进展的综述。第二章主要内容是对于浙贝母鳞茎的化学成分研究,浙贝母鳞茎经甲醇充分浸提得到甲醇浸膏,采用各种色谱技术以及物理结晶等方法,从甲醇浸膏中分离得到30个单体化合物,通过现代波谱技术(1D-NMR、2D-NMR、HRESIMS、IR、UV)和物理或化学等方法,鉴定出27个单体化合物的结构,分别为:zhebeisine(1)、浙贝乙素(verticinone,2)、eduardine(3),浙贝丙素(zhebeirine,4),异浙贝甲素(iso-verticine,5),贝母素甲(verticine,6),浙贝乙素氮氧化物(verticinone-N-oxide,7),浙贝甲素氮氧化物(verticine-N-oxide,8),湖贝甲素(hepehenine,9),pingbeimunone A(10),贝母辛(peimisine,11),ent-13-epi-manool(12),ent-kauran-16β,17-diol(13),ent-kauran-15en-17-ol(14),trans-communol(15),3,16α,17-三羟基贝壳杉烷(3,16α,17-trihydroxy kaurane,16),5-羟基-2-呋喃甲醛(5-hydroxy-2-furaldehyde,17),阿魏酸甲酯(ferulic acid methylester,18),阿魏酸单甘油酯(monoglyceride ferulate,19),苦鬼臼毒素(podophyllotoxin,20),β-谷甾醇(β-sitosterol,21),β-胡萝卜苷(β-daucosterol,22),亚油酸甲酯(methyl linoleate,23),亚油酸(linoleic acid,24),油酸(oleic acid,25),亚麻酸甲酯(methyl linolenate,26),亚油酸甘油单酯(monoglyceride linoleic acid,27)。其中11个是生物碱,5个是二萜类化合物,5个是脂肪酸类化合物,3个苯丙素类化合物,2个甾体类化合物,1个杂环类化合物,其中1为新化合物,化合9、10、17、18、19是首次从浙贝母中分离得到。
第三章的内容是对分离得到的化合物进行生物活性研究的过程和结果。鉴于生物碱类成分是浙贝母药理活性的物质基础,且本课题组以往研究表明,在C-5、C-6位含有一对双键的异甾体生物碱具有较好的抗肿瘤活性,本文就所分离到的新化合物1和异浙贝甲素及其衍生物进行了体外的抗肿瘤活性研究。采用MTT法测定了化合物对14种肿瘤细胞株的细胞毒性,化合物1和异浙贝甲素衍生物均表现出了对于肿瘤细胞不同程度的抑制作用,其中新化合物1对于结直肠癌细胞株HT29与DLD1表现出抑制作用(IC50=25.1±1.0,48.8±9.4μM);异浙贝甲素衍生物(H-3、H-5~H-9、H-11)对于HT29表现出较好的抑制作用(IC50<10μM),H-5、H-7对于DLDL1表现出较好的抑制作用(IC50<10μM)。细胞凋亡实验表明,化合物1可能通过诱导细胞凋亡抑制HT29细胞的生长;H-5可能通过诱导细胞凋亡抑制DLD1细胞的生长。 摘要译文